江苏省卫生厅资助项目(H200952200859)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：柳迎照薛渊何志强许化溪邵启祥更多>>
- 相关机构：江苏大学附属人民医院江苏大学更多>>
- 发文基金：江苏省卫生厅资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- Hlx修饰的树突状细胞系(DC2.4/mHlx)的建立
- 2010年
- 目的:建立稳定、高表达鼠转录因子Hlx的树突状细胞系DC2.4/mHlx。方法:参照GenBank中mHlx基因序列,设计mHlxCDS全长引物;以PGEM-T/mHlx质粒为模板,通过PCR获得目的基因,再克隆到PIRES2-EGFP真核表达载体,经PCR、酶切鉴定后进行序列测定,用脂质体转染DC2.4;应用G418筛选出耐药克隆,有限稀释法进行单克隆。通过观察EGFP的表达选定单克隆细胞株,再用流式细胞术分析、Real-time PCR和Western blot进行鉴定。结果:构建了PIRES2-mHlx-EGFP真核表达载体,并成功建立mHlx修饰和EGFP修饰的细胞系(DC2.4/mHlx和DC2.4/EGFP)。结论:成功建立稳定高表达mHlx的树突状细胞系DC2.4/mHlx,为深入探讨mHlx功能构建了平台,为Hlx修饰后的树突状细胞作为工具细胞的应用奠定了基础。
- 何志强王胜军薛渊石燕柳迎照仝佳陈建国邵启祥许化溪
- 关键词：DC2.4EGFP
