山东省医药卫生科技发展计划项目(2013WS0251)
- 作品数：6 被引量：44H指数：3
- 相关作者：毕宏生唐凯郭大东杜宇翔张莲更多>>
- 相关机构：山东中医药大学山东中医药大学附属眼科医院广西中医药大学更多>>
- 发文基金：山东省医药卫生科技发展计划项目国家自然科学基金山东省中医药科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- 龙胆泻肝汤对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎的治疗作用被引量：16
- 2015年
- 目的探讨龙胆泻肝汤对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)的治疗作用。方法 Lewis大鼠随机分为对照组6只、EAU组18只和LXT组18只,光感受器间维生素A结合蛋白免疫EAU组和LXT组大鼠。观察大鼠生理特征及眼部炎症变化,出现葡萄膜炎症时给予LXT组大鼠龙胆泻肝汤灌胃;免疫后12 d比较各组大鼠眼组织病理学差异;免疫后每隔4 d检测房水蛋白及血清中白蛋白、球蛋白变化。结果成功制备了EAU大鼠模型;免疫后5 d大鼠开始出现葡萄膜炎症状,12 d炎症最重。EAU大鼠肛温在1 d、7 d、10 d和12 d高于对照组(P=0.020、0.000、0.015、0.001);免疫后12 d,EAU组房水蛋白浓度为(36.03±3.23)g·L-1,LXT组为(24.67±2.60)g·L-1,差异有显著统计学意义(P=0.000);组织病理学显示EAU组视网膜结构破坏程度明显高于LXT组(P.000)。EAU组免疫后4 d、8 d及12 d白蛋白均低=0于对照组(P=0.045、0.000、0.033),LXT组4 d和8 d白蛋白低于正常(P=0.045、0.005),但12 d时恢复至正常;12 d时EAU组球蛋白明显高于正常(P=0.047),LXT组未见明显异常。结论龙胆泻肝汤能有效减轻EAU大鼠前房炎症,减少炎症细胞浸润,保护眼部组织结构,增强机体抗氧化能力,调节免疫状态,对EAU发挥治疗作用。
- 唐凯郭大东张莲司俊康杜宇翔毕宏生
- 关键词：龙胆泻肝汤实验性自身免疫性葡萄膜炎组织病理学房水蛋白白蛋白球蛋白
- 龙胆泻肝汤抑制葡萄膜炎大鼠Notch信号通路活化的作用被引量：10
- 2019年
- 目的探讨龙胆泻肝汤(Longdan Xiegan Decoction,LXD)对实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)大鼠Notch信号通路活化的抑制作用及其对辅助性T细胞17(T helper 17,Th17)和调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)表达水平的影响。方法随机将雌性Lewis大鼠分为正常对照(NC)组、EAU模型组、LXD干预组。EAU模型组和LXD干预组大鼠诱导EAU,免疫后LXD干预组大鼠每天给予LXD灌胃处理,EAU模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃。免疫后12 d观察大鼠眼部炎症表现,取三组大鼠眼球进行病理切片,观察病理学变化;实时荧光定量PCR(quantitative polymerase chain reaction,QT-PCR)和酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测免疫后12 d三组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中Notch1、DLL4、白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)和IL-17 mRNA及蛋白的表达;流式细胞仪检测三组大鼠各组织中Th17、Treg细胞的表达。结果病理检查结果表明,LXD对EAU大鼠眼部组织结构有明显的保护作用。QT-PCR和ELISA检测结果发现,与NC组相比,LXD干预组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Notch1、DLL4、IL-10、IL-17 mRNA和蛋白表达水平均升高,但除IL-10外,其他明显低于EAU模型组(均为P<0.05);流式细胞仪检测结果发现,EAU模型组大鼠的各组织中Th17/Treg比例均高于NC组,经LXD干预后,Th17细胞表达水平下降,Treg表达水平升高,两者比例趋向平衡。结论 LXD可有效降低EAU大鼠脾脏、淋巴结、眼组织中Notch1、DLL4、IL-10和IL-17 mRNA和蛋白的表达水平,改善Th17/Treg细胞比例的平衡,从而有效减轻EAU大鼠的眼部炎症,保护眼部组织结构,调节全身及眼部的免疫状态。
- 殷学伟刘滨魏慧霞唐凯毕宏生郭大东
- 关键词：龙胆泻肝汤实验性自身免疫性葡萄膜炎辅助性T细胞NOTCH1DLL4
- ZnO纳米粒子通过线粒体通路抑制小鼠光感受器细胞Na^＋/K^＋-ATP酶表达和活性的作用研究被引量：1
- 2018年
- 氧化锌(ZnO)纳米粒子已被发现具有生物毒性,氧化应激被认为是最重要的因素之一。前期实验证实,ZnO纳米粒子能显著减少锰超氧化物歧化酶(Mn SOD)蛋白的表达,降低Mn SOD活性。本文通过检测乳酸脱氢酶(LDH)释放、线粒体活性氧(ROS)水平和膜电位(Δφm)、延迟整流钾电流变化和Na^+/K^+-ATP酶的表达及活性等变化,检测ZnO纳米粒子对小鼠光感受器细胞的细胞毒作用。结果表明,ZnO纳米粒子可显著增强小鼠光感受器细胞中LDH的释放、增加线粒体内ROS水平并下调Δφm、阻断延迟整流钾电流,同时降低Na^+/K^+-ATP酶的表达及活性,从而对小鼠视网膜光感受器细胞产生细胞毒作用,提示ZnO纳米粒子可通过线粒体通路引起氧化应激,从而抑制小鼠光感受器细胞Na^+/K^+-ATP酶表达和活性,产生细胞毒性,导致细胞死亡。本文的研究结果有助于理解ZnO纳米粒子引起细胞毒性的作用机理。
- 刘滨殷学伟郭励劼丁红燕毕宏生郭大东
- 关键词：ZNO纳米粒子活性氧延迟整流钾电流
- 贝伐单抗和雷珠单抗治疗渗出型老年性黄斑变性有效性meta分析被引量：15
- 2014年
- 目的 系统评价贝伐单抗和雷珠单抗治疗渗出型老年性黄斑变性（AMD）的有效性.方法 计算机检索荷兰医学文摘数据库Embase、美国临床医学期刊全文数据库Ovid、美国国立医学图书馆医学数据库Pubmed、中国知网、万方数据库、维普中文期刊数据库.收集国内外公开发表的关于贝伐单抗和雷珠单抗治疗渗出型AMD的随机对照试验.检索时限截止至2013年11月.按照纳入与排除标准筛选文献、提取资料和进行质量评价.用RevMan 5.2.6软件进行统计分析.比较贝伐单抗和雷珠单抗治疗前与治疗后3、6、12个月渗出型AMD患者的视力和黄斑中心凹厚度.结果 最终纳入5个研究,共1954例渗出型AMD患者.其中,贝伐单抗治疗组967例,雷珠单抗治疗组987例.Meta分析结果显示,贝伐单抗治疗组与雷珠单抗治疗组视力提高值比较,差异无统计学意义[3个月：加权均数差（WMD） =0.32,95％可信区间（CI）为-0.84～1.49,P=0.59;6个月：WMD=0.47,95％ CI为-0.67～1.62,P=0.42;12个月：WMD=0.84,95％ CI为-0.23～1.90,P=0.12];贝伐单抗治疗组与雷珠单抗治疗组黄斑中心凹厚度降低值比较,差异无统计学意义（3个月：WMD=6.21,95％ CI为-6.23～18.65,P=0.33;6个月：WMD=4.06,95％ CI为-6.16～14.27,P=0.44;12个月：WMD=-5.39,95％ CI为-14.41～3.63,P=0.24）.结论 贝伐单抗与雷珠单抗治疗渗出型AMD具有相似的治疗效果.
- 杜宇翔郭大东司俊康唐凯毕宏生
- 关键词：黄斑变性药物治疗META分析
- 实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠的发病特点被引量：2
- 2014年
- 背景 Lewis大鼠是建立实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）动物模型的常用种系,对其发病特点,尤其是EAU大鼠眼部超微结构改变的研究尚未见报道. 目的 观察EAU大鼠的发病体征及其眼部超微结构的改变. 方法 选取SPF级6～8周龄雌性Lewis大鼠18只,采用随机数字表法随机分为对照组6只和模型组12只.模型组大鼠后肢足底、两侧腹壁和躯干上皮下各注射含有光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP,1177-1191）和结核菌素（TB）的完全弗氏佐剂（CFA）乳化液,对照组大鼠不作处理.注射后观察两组大鼠饮食、体温和活动情况,每天裂隙灯显微镜下观察大鼠眼部炎症表现,于免疫后12d获取大鼠眼组织标本,对虹膜、睫状体和视网膜进行常规组织病理学检查,并分别在扫描电子显微镜和透射电子显微镜下观察虹膜、睫状体和视网膜的超微结构改变.结果 模型组大鼠免疫后采食量为（190.00± 18.03）g,明显少于对照组的（285.33±28.02）g,差异有统计学意义（t=4.955,P=0.012）;模型组和对照组大鼠的饮水量分别为（241.67±18.56）ml和（289.67±18.18）ml,差异有统计学意义（t=3.201,P=0.033）;模型组大鼠体温升高,精神倦怠.裂隙灯显微镜下观察发现,模型组大鼠免疫后6d出现虹膜充血、前房积脓和瞳孔膜闭,免疫后12d眼部炎症最严重,炎症评分为（3.83±0.41）分,而对照组大鼠眼前节未见异常.组织病理学检查发现,模型组大鼠前房、虹膜、睫状体组织和玻璃体腔内均可见大量淋巴细胞、中性粒细胞和单核巨噬细胞浸润.扫描电子显微镜下可见模型组大鼠虹膜肌纤维粗细不均,睫状体上皮表面粗糙及RPE细胞绒毛疏松.透射电子显微镜下观察可见,模型组大鼠虹膜单核巨噬细胞浸润,睫状体上皮细胞膜褶皱蓬松及排列紊乱,视网膜Müller细胞中有髓样小体,RPE细胞中有线粒体空泡出现,而对照组大鼠虹膜、睫状体及
- 刘正峰崔彦李姣滕达唐凯毕宏生
- 关键词：实验性自身免疫性葡萄膜炎炎症超微结构
- Treg细胞在实验性自身免疫性葡萄膜炎发病过程中的动态变化被引量：2
- 2016年
- 背景 研究表明,调节性T细胞（Treg）是一类负向调控免疫应答的T细胞亚群,在维持免疫稳态和免疫耐受方面发挥重要作用.自身免疫性葡萄膜炎是一种免疫性眼病,Treg细胞在自身免疫性葡萄膜炎发生和发展过程中的调控作用尚不完全清楚. 目的 观察Treg细胞在实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）大鼠发病过程中的动态变化.方法 选取84只6～8周龄SPF级Lewis大鼠,采用随机数字表法随机分为模型组和对照组.模型组于大鼠双后足垫、腹部双侧及背部皮下注射光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP）1177-1191、结核菌素（TB）、完全弗氏佐剂（CFA）和PBS混合乳化剂共300μl,对照组大鼠以同样方法皮下注射等容量不含IRBP的TB与CFA乳化剂.分别于造模后第9、13、18、23、28、35、48天观察模型组和对照组大鼠的眼部炎症症状并根据严重程度进行炎症评分.于造模后上述时间点分别处死模型组及对照组大鼠各6只,采用常规组织病理学方法观察各组大鼠眼部虹膜、睫状体和视网膜组织形态变化;分离大鼠脾脏淋巴细胞,采用流式细胞术检测大鼠脾脏悬液中Treg细胞特异性标志物Foxp3标记细胞比例;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠脾脏淋巴细胞中Foxp3 mRNA相对表达量变化. 结果 免疫后第8天模型组大鼠虹膜血管扩张充血,开始出现眼部炎症表现,免疫后第13天虹膜血管明显扩张,前房可见渗出和积脓,瞳孔区有膜样渗出,炎症评分最高,为（3.75±0.42）分,之后眼部炎症反应逐渐减轻,至免疫后第23天炎症反应接近消失,造模后第7、11、13、15、17、19、21天间模型鼠眼炎症反应评分总体比较差异有统计学意义（F=81.709,P＜0.001）.对照组大鼠眼部检查正常.组织病理学观察发现,模型组大鼠虹膜、睫状体、视网膜等组织有中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞浸润,组织结构排列疏松,以免疫后第13天最为明�
- 张莲宋继科唐凯郑凤鸣郭俊国毕宏生
- 关键词：淋巴细胞活性
