公共文化服务平台

共 4 条记录，以下是 1-4

全选清除导出

排序方式：

Wnt信号通路在视网膜色素上皮发育中的作用被引量：2: 2014年; Wnt(wingless-type MMTV integration site family members)信号通路与细胞的发育分化密切相关,尤其对动物胚胎期中枢神经系统的发育至关重要。在眼的早期发育中,视泡背部视网膜色素上皮细胞(RPE)Wnt/βcatenin信号通路高度活跃,对神经视网膜及RPE的发育调控起重要作用。本文结合目前该领域研究进展,综合评述Wnt信号通路、Wnt蛋白家族以及Wnt信号通路与RPE发育的关系。; 殷秋菊赵娉婷杨春波李筱荣; 关键词：信号通路 Β-CATENIN 视网膜上皮细胞

姜黄素对人胚胎干细胞向视网膜色素上皮样细胞定向诱导效率的促进作用被引量：3: 2015年; 背景来源于多能干细胞的视网膜色素上皮（RPE）细胞移植治疗年龄相关性黄斑变性（AMD）和视网膜色素变性（RP）是近年研究热点,但RPE体外分化诱导效率低下、成本高等一直是难以克服的障碍.研究表明,姜黄素（curcumin）可促进人胚胎干细胞（ESCs）的定向诱导分化,但其对人ESCs向RPE样细胞的定向分化的作用机制尚不清楚. 目的研究体外培养的人ESCs向视网膜色素上皮（RPE）样细胞的诱导分化过程,探讨curcumin对人ESCs向RPE细胞定向诱导效率的影响及其机制. 方法将人ESCs株进行体外培养,将处于对数生长期的ESCs传代至基质膜（Matrigel）包被的6孔板中,以mTeSRTM1培养基培养至过渡融合状态后更换为含质量分数87％ KnockOutTM DMEM、质量分数10％血清替代物（SR）、质量分数1％非必需氨基酸和质量分数1％谷氨酰胺及青链霉素双抗的分化诱导体系,同时加入终浓度为1 μmol/L的curcumin处理24 h,对照组培养基中未加入curcumin.分别于诱导培养3周及5周时提取细胞RNA及蛋白,采用荧光定量逆转录PCR（RT-PCR）法检测诱导RPE（iRPE）细胞中干细胞标志物、RPE相关标志物及Wnt/β-catenin信号通路相关因子mRNA的相对表达水平;采用Western blot法及免疫荧光染色检测人ESCs、iRPE细胞及人RPE细胞中相关标志物蛋白的表达水平;通过细胞吞噬实验检测iRPE细胞的吞噬功能. 结果 Curcumin组诱导后3周时即可见iRPE细胞色素化,随着时间延长色素化程度更高,而对照组细胞在诱导后5周时开始出现细胞色素化.RT-PCR结果显示,curcumin诱导后3周及5周,curcumin组iRPE细胞中ESCs标志物NANOG mRNA的相对表达水平明显低于对照组,差异均有统计学意义（t=13.086,P=0.022;t=34.186,P=0.004）,而RPE标志物Pax6、RX、CRALBP及RPE65 mRNA的相对表达量明显高于对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.Western blot检测显示,CRALBP、RPE65和MITF蛋白�; 殷秋菊吴一湘于莉刘勋杨春波李筱荣; 关键词：姜黄素眼色素上皮

玻璃体腔移植人脐带间充质干细胞对糖尿病大鼠视网膜形态及胶质细胞原纤维酸性蛋白和视紫红质表达的影响被引量：1: 2016年; 目的观察玻璃体腔移植人脐带间充质干细胞（hUCMSC）对糖尿病大鼠视网膜形态及胶质细胞原纤维酸性蛋白（GFAP）、视紫红质（RHO）表达的影响.方法 8周龄健康雄性Sprague-Dwaley大鼠78只用于实验.其中,70只大鼠按40 mg/kg剂量尾静脉注射链脲佐菌素建立糖尿病模型;8只大鼠以相同剂量尾静脉注射0.1 mol/L pH 4.0柠檬酸缓冲液作为正常对照组,建模6周后,在建模大鼠中取10只作为糖尿病模型对照组;其余60只建模大鼠右眼玻璃体腔注射移值hUCMSC细胞悬液2μl作为实验眼,左眼玻璃体腔注射等量Dulbecco改良Eagle/F12培养基作为对照眼.注射移植后1、2、4周分别进行后续实验.实验眼记作U1、U2、U4组,对照眼记作D1、D2、D4组,每组各20只眼.摘除眼球作石蜡切片行苏木精-伊红染色,光学显微镜观察大鼠视网膜结构形态,测量视网膜外核层及内核层（INL）的厚度;冰冻切片-组织免疫荧光方法观察hUCMSC在大鼠视网膜的分布、迁移情况;实时定量聚合酶链反应（PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测大鼠视网膜中GFAP、RHO的mRNA和蛋白相对表达量.结果光学显微镜观察发现,正常对照组大鼠视网膜各层结构正常.糖尿病模型对照组大鼠视网膜神经纤维层（NFL）变薄,视网膜神经节细胞（RGC）数量减少.U1、D1组大鼠RGC数量减少、排列紊乱;U2、U4、D2、D4组大鼠RGC数量不断减少.与D4组比较,U4组大鼠视网膜INL厚度明显增加,差异有统计学意义（P＜0.05）.冰冻切片-组织免疫荧光实验结果显示,U1组大鼠视网膜可见沿内界膜分布的hUCMSC;U2组大鼠视网膜hUCMSC数量逐渐减少,主要位于NFL和神经节细胞层.实时定量PCR及Western blot检测结果显示,随建模时间延长,糖尿病模型对照组及D1、D2、D4组大鼠视网膜中GFAP mRNA、蛋白相对表达量逐渐升高,RHO mRNA、蛋白相对表达量逐渐降低.分别与D2、D4组比较,U2、U4组大; 邹媛媛汪建涛李筱荣; 关键词：间质干细胞移植视紫质

苯丙氨酸促进人胚胎干细胞向视网膜色素上皮细胞高效分化的研究: 2015年; 目的观察苯丙氨酸对胚胎干细胞（ESC）向视网膜色素上皮（RPE）细胞定向分化诱导效率的影响.方法 H1人ESC（hESC）分为对照组和实验组,以mTeSR培养基常规培养.细胞克隆过度融合后对照组以撤除碱性成纤维细胞生长因子、含10％ knockout血清替代物的培养基诱导hESC自主分化至第7周.实验组从第3周开始在诱导培养基中添加0.2 mmol/L苯丙氨酸培养至第7周.观察两组细胞形态学变化;实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测人类配对盒基因6（Pax6）、小眼球相关转录因子（MITF）、RPE65、酪氨酸酶（tyrosinase）、Wnt配体（Wnt3a）、淋巴样增强因子-1（Lef1）、转录因子7（Tcf7）基因mRNA的表达;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测MITF、RPE65蛋白的表达;流式细胞技术（FCM）检测RPE65阳性细胞比例.Sprague Dawley大鼠12只,随机分为对照组和治疗组;单眼内路法视网膜下腔注射,对照组注射2 μl 1倍磷酸盐缓冲液,治疗组注射2 μl纯化的hESC-RPE.治疗后6周行视网膜电图（ERG）检查,观察暗适应3.0 a-b波振幅.结果诱导分化第7周,实验组出现大量肉眼可见的色素团块,明显多于对照组.色素化区域内可见多边形蜂窝状排列的单层细胞,胞质充满色素颗粒.RT-PCR检测结果显示,实验组Pax6、MITF、RPE65、tyrosinase（t=39.44、26.14、31.28、77.24）、Wnt3a、Lef1、Tcf7（t=46.11、27.69、17.42）mRNA表达量高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）.Western blot检测结果显示,实验组MITF、RPE65蛋白表达量高于对照组.FCM检测结果显示,实验组、对照组RPE65阳性比例分为（18.91±1.76）％、（0.88±0.09）％;实验组RPE65阳性比较明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）.ERG检查结果显示,治疗组大鼠暗适应3.0 a-b波振幅较对照组显著提高,差异有统计学意义（t=7.543,P＜0.01）.结论苯丙氨酸显著提高hESC向RPE定向诱导效率.hESC诱导来源�; 吴一湘杨春波于敏李筱荣; 关键词：胚胎干细胞视网膜色素上皮

全选清除导出

共1页<1>

国家自然科学基金(81371037)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

国家自然科学基金(81371037)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈