国家自然科学基金(39270295)
- 作品数:9 被引量:22H指数:3
- 相关作者:何善述雷景迈陈蓓蓓段秋红王西明更多>>
- 相关机构:华中科技大学同济医科大学温州医学院附属第二医院更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- DDPH逆转增生后PASMC的时间相关性研究被引量:1
- 2008年
- 目的研究DDPH对低氧内皮细胞条件培养液(HECCM)促肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增生后的逆转效应及时间相关性,探讨DDPH使增生后PASMC恢复为正常收缩表型的时间。方法利用HECCM建立猪PASMC增生模型;采用细胞培养、改良的四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、免疫细胞化学染色测定α平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)等方法观察HECCM的促PASMC增生作用,及DDPH对PASMC增生后的逆转效应,并观察逆转效应与DDPH作用的时间相关性。结果(1)HECCM促PASMC增生后,PASMC由收缩表型转化为合成表型,胞质内的α-SM-actin含量下降,具有一定时间相关性。(2)在HECCM促PASMC增生后,加入DDPH可使PASMC由合成表型逆转为收缩表型,α-SM-actin含量回升,具有一定时间相关性。结论DDPH对HECCM促PASMC增生有逆转效应并呈一定时间相关性,DDPH作用一定时间后PASMC表型可基本逆转恢复至正常。
- 杜兵陈蓓蓓王西明段秋红何善述
- 关键词:DDPH肺动脉平滑肌细胞表型逆转低氧
- 蛋白激酶及DDPH对HECCM促PASMC增殖的影响被引量:2
- 2002年
- 应用猪肺血管的内皮细胞进行常氧 /低氧培养 ,制备常氧 /低氧内皮细胞条件培养基 (Norm oxic/ Hypoxial en-dothelia cell conditional m edium,NECCM/ HECCM) ,分别观察蛋白激酶 A(protein kinase A,PKA)、蛋白激酶 C(proteinkinase C,PKC)和受体酪氨酸蛋白激酶 /胞浆酪氨酸蛋白激酶 (recepror tyrosine protein kinase/ plasma tyrosine protein ki-nase,RTK/ PTK)及 DDPH对 HECCM促肺动脉平滑肌细胞 (pulmonary arterial smooth m uscle cell,PASMC)增殖的影响。探讨这些蛋白激酶在促 PASMC增殖中的作用 ,以及 DDPH抑制这种促增殖的机理。结果提示 :PKC是 HECCM促 PASMC增殖的关键性效应分子 ,但其被激活的上游信号转导分子除了 RTK/ PTK外 ,还有其它非 RTK/ PTK介导的信号转导方式 ;DDPH对 HECCM促 PASMC增殖的抑制点在 PKC上游 ,可能直接作用于 RTK/ PTK,或者阻断 Ca2
- 何声秀段秋红陈蓓蓓雷景迈何善述陈娟
- 关键词:DDPH增殖肺动脉平滑肌细胞蛋白激酶
- 人红细胞老化过程中花生凝集素和ConA受体电镜细胞化学研究被引量:1
- 2000年
- 目的 观察人血液中 ,老化红细胞膜上花生凝集素 (PNA)和刀豆凝集素 (Con A)受体细胞化学反应的变化。 方法 应用金标花生凝集素 (PNAg)和刀豆凝集素 (Con Ag) ,对早期和老化红细胞膜上 PNA和 Con A受体进行电镜细胞化学显示 ,并用计算机图像分析系统对电镜照片进行定量处理。 结果 与早期红细胞相比 ,老化红细胞膜上 PNAg颗粒和 Con Ag颗粒均有明显增多。 结论 老化红细胞膜上唾液酸的丢失导致半乳糖基和甘露糖基暴露的相应增加 。
- 刘胜洪杨木兰张春明张亦农刘冰官阳郝刚刘能保阮幼冰
- 关键词:红细胞细胞老化花生凝集素细胞化学CONA受体
- DDPH抑制HECCM促PASMC增殖时第二信使变化的研究被引量:4
- 2000年
- 采用 MTT比色、荧光技术和放免技术观察了猪肺动脉低氧内皮细胞条件培养液 (HECCM)和 1- (2 ,6 -二甲基苯氧基 ) - 2 - (3,4-二甲氧基苯乙胺基 )丙烷盐酸盐 (DDPH)对猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)增殖、第二信使 ([Ca2 +]i 和 c AMP)的影响。结果显示 :1HECCM促进 PASMC增殖 ,而 DDPH可抑制之 ,抑制率为 77.46 %。 2HECCM升高 PASMCs内 [Ca2 +]i,而 DDPH可对抗此作用。 3HECCM组 PASMCs内 c AMP含量明显低于对照组(NECCM组 ) ,而 HECCM+DDPH组 PASMCs内 c AMP与
- 段秋红廖国宁雷景迈何善述
- 关键词:慢性低氧性肺动脉高压丙烷盐酸盐DDPH
- DDPH对HECCM促PASMC增殖后的逆转效应研究被引量:2
- 2002年
- 利用低氧内皮细胞条件培养基 (HECCM)建立猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)的增殖模型 ;以四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色法、α平滑肌肌动蛋白 (α- SM- actin)为指标 ,用免疫细胞化学染色及透射电镜等方法观察不同浓度DDPH[1- (2 ,6 - dim ethylphenoxy) - 2 - (3,4 - dimethoxy phenylethylamino) propane hydrochloride]对 HECCM促 PASMC增殖后的逆转效应。结果表明 :HECCM促 PASMC增殖后 ,PASMC的表型发生转化 ,由收缩表型转化为合成表型 ,PASMC胞质内的 α- SM- actin含量下降 ;而 DDPH能使 HECCM促 PASMC增殖后的表型逆转 ,即由合成表型逆转为具有执行正常收缩功能的收缩表型 ,PASMC胞质内的 α- SM- actin含量回升 ;且 DDPH的这种作用具有浓度相关性。透射电镜结果从形态学上也证明 PASMC由合成表型逆转为收缩表型 ,由此推测 ,DDPH对 HECCM促
- 张红胜王西明陈蓓蓓雷景迈何善述
- 关键词:DDPH逆转效应丙烷盐酸盐Α-平滑肌肌动蛋白降压药
- 用紫外与可见光分光分析仪测定PASMC增殖的MTT比色法被引量:16
- 2000年
- 为使 MTT比色法得到更广泛的应用 ,对紫外与可见光分光分析仪测定细胞增殖 MTT比色法的实验条件进行了探索。结果发现 :以 5 mg/ m l MTT在 0 .1× 10 4~ 2 .4× 10 4细胞范围内进行检测 ,可获得较好的线性检测结果 (γ=0 .9872 )。与酶标仪直接测定比较 ,具有灵敏度高、数据准确、检测范围广 ,值得推广应用。
- 廖国宁雷景迈何善述
- 关键词:MTT比色法细胞增殖
- PDGF在低氧内皮细胞条件培养基促猪肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用被引量:2
- 2000年
- 为了探索低氧条件下猪肺动脉内皮细胞 (PAEC)对猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖调控关系 ,应用MTT比色法 ,DNA荧光测定法观察了外源性 PDGF促 PASMC增殖作用 ,以及 Suram in抑制 PDGF促增殖作用的效应 ,并在此基础上研究了猪肺动脉内皮细胞条件培养基 (HECCM)中 PDGF促 PASMC增殖的作用。结果表明 ,HECCM促 PASMC增殖作用的效应可被 Suramin部分抑制 ,由此证明 ,PDGF是低氧刺激 PAEC产生的一种促 PASMC增殖的重要因子。
- 廖国宁陈蓓蓓雷景迈何善述
- 关键词:低氧PDGF细胞增殖
- DDPH对HECCM促PAS MC增殖后的逆转及时间相关性的研究
- 2002年
- 目的 研究DDPH对肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖后的逆转效应与DDPH的作用时间依赖性。方法采用细胞培养、四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT)、免疫细胞化学染色测定α SM actin等方法观察低氧内皮细胞条件培养基(HECCM )促猪肺动脉平滑肌细胞的增殖作用 ,以及DDPH对肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖后的逆转效应与DDPH的作用时间依赖性。结果 (1)在HECCM促使PASMC增殖后 ,PASMC的表型发生转化 ,由收缩型转化为合成型 ,而DDPH能使HECCM促PASMC增殖后的表型 ,由合成型逆转为具有执行正常收缩功能的收缩型 ;(2 )在HECCM促PASMC增殖 2 4h ,36h ,4 8h后 ,各加入DDPH2 4h ,36h ,4 8h后 ,MTT法测定OD值下降 ;免疫组织化学测定α SM actin的吸光度上升 ,并具有时间依赖性。
- 王西明陈蓓蓓张红胜雷景迈何善述
- 关键词:肺动脉平滑肌细胞肺动脉高压降压药DDPH逆转
- 低氧内皮细胞条件培养液和DDPH对肺动脉平滑肌细胞骨桥蛋白基因及α平滑肌肌蛋白表达的影响被引量:3
- 2007年
- 目的:研究低氧内皮细胞条件培养液(HEC-CM)和DDPH对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)骨桥蛋白(OPN)基因表达和α平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)的影响,进而探讨DDPH对增殖后PASMC的逆转效应。方法:利用HECCM建立猪PASMC的增殖模型;采用细胞培养、改良的四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、免疫细胞化学染色测定α-SM-actin、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测OPN基因表达等方法观察HECCM的促PASMC增殖作用,以及DDPH对增殖后PASMCα-SM-actin和OPN表达的影响。结果:(1)HECCM促PASMC增殖后,PASMC的α-SM-actin含量降低而其OPN基因表达上调;(2)HECCM促PASMC增殖后,加入DDPH可使PASMC的α-SM-actin含量回升,OPN表达下调。结论:DDPH对HECCM促PASMC增殖有逆转效应,可使增殖后PASMC由合成表型逆转为正常收缩表型。
- 杜兵陈蓓蓓王西明段秋红何善述
- 关键词:DDPH骨桥蛋白低氧肺动脉平滑肌细胞