国家自然科学基金(20276066)
- 作品数:3 被引量:8H指数:2
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- 相关机构:浙江大学更多>>
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- 相关领域:生物学更多>>
- 无细胞蛋白质合成系统的研究进展被引量:5
- 2004年
- 无细胞蛋白质合成系统是一种以外源mRNA或DNA为模板 ,通过在细胞抽提物的酶系中补充底物和能源物质来合成蛋白质的体外系统 .与传统的体内重组表达系统相比 ,体外无细胞合成系统具有多种优点 ,如可表达对细胞有毒害作用或含有非天然氨基酸 (如D 氨基酸 )的特殊蛋白质 ,能够直接以PCR产物作为模板同时平行合成多种蛋白质 ,开展高通量药物筛选和蛋白质组学的研究等 .本文综述了无细胞蛋白质合成系统的发展历史、系统中合成蛋白质所需的能量供应、遗传模板的稳定性和微型无细胞生物反应器等多方面的研究 ,并探讨了无细胞蛋白质合成系统中存在的难点。
- 徐志南陈海琴汪家权岑沛霖
- 关键词:蛋白质多肽生物合成无细胞系统
- 在大肠杆菌无细胞体系中表达重组人β防御素-2
- <正> 人β防御素-2是一种能避免致病微生物对其产生耐药性的阳离子抗菌肽,分子量为4kD,在机体抵御外来微生物入侵中起着最初的防御作用。大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统是一种以外源mRNA或DNA为模板,通过在细胞抽提物的酶...
- 陈海琴徐志南徐乃正芩沛霖
- 文献传递
- 无细胞蛋白质合成系统的研究进展
- <正> 无细胞蛋白质合成系统是一种以外源mRNA或DNA为模板,通过在细胞抽提物的酶系中补充底物和能源物质来合成蛋白质的体外系统。与传统的体内重组表达系统相比,体外无细胞合成系统具有多种优点如可用于表达对细胞有毒害作用的...
- 徐志南陈海琴岑沛霖
- 文献传递
- 大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统的初步研究被引量:2
- 2007年
- 在近几年来被广泛研究和应用的大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统中,大肠杆菌抽提物的制备、底物浓度的配比以及能量再生体系的选择是最关键的几个因素.以绿色荧光蛋白(GFP)为报导基因,以缺失核酸酶I基因的大肠杆菌A19为实验菌株,通过对大肠杆菌无细胞抽提物制备过程中菌体收集时间、细胞破碎压力、后处理条件等参数的摸索和确定、无细胞蛋白质合成系统中底物浓度配比的正交实验优化以及系统中能量再生体系的比较和选择,制备得到了GFP表达量为154μg/mL的大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统,与优化前相比产量提高了29倍.
- 陈海琴徐志南汪诚廖玉华岑沛霖
- 关键词:蛋白质生物合成无细胞系统
- Vif基因体外表达载体构建及其在无细胞系统中的表达被引量:1
- 2007年
- 随着-omics(组学)时代的到来,无细胞蛋白质合成系统以具有快速、方便、易于高通量等优点,正在被广泛地研究和应用。本文选取HIV病毒感染因子Vif作为目标蛋白,构建了适宜体外表达的Vif表达载体pIVEX2.4c-Vif,并将其在大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统中进行表达,为下一步进行高通量药物筛选奠定了一定的基础。
- 汪诚陈海琴徐志南殷秀飞岑沛霖
- 关键词:HIV