国家自然科学基金(30470654) 作品数:22 被引量:56 H指数:5 相关作者: 谭毅 谭冬梅 何明忠 赵邦霞 尉晓蔚 更多>> 相关机构: 重庆医科大学 西南农业大学 大连大学附属中山医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 重庆医科大学创新基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
肿瘤转移抑制因子CD9/MRP-1基因在小鼠围着床期子宫内膜的动态表达 被引量:5 2008年 目的:探讨肿瘤转移抑制基因(CD9)/运动相关蛋白(MRP-1)mRNA和蛋白在胚胎着床过程中的作用。方法:应用RT-PCR和免疫组化技术观察CD9/MRP-1mRNA和蛋白在早孕和假孕小鼠子宫中的表达规律。结果:早孕d1-4小鼠子宫组织均有CD9/MRP-1mRNA表达,且d4表达最多;其蛋白主要表达在d1-4的子宫内膜上皮细胞,且早孕d2-4CD9/MRP-1在子宫基质细胞散在阳性表达。假孕d1-8小鼠子宫组织均有CD9/MRP-1mRNA表达,假孕d5表达开始增加,至d6达到峰值。而CD9/MRP-1蛋白在假孕d1-8子宫内膜腺上皮均有表达,而子宫内膜腔上皮均无表达。假孕d2-5,子宫基质细胞出现散在阳性表达。结论:①CD9/MRP-1在早孕小鼠子宫中呈动态表达,提示它在胚胎精确侵袭子宫内膜的调节中发挥作用。②CD9/MRP-1在妊娠小鼠子宫的表达是非胚胎依赖性的。 谭冬梅 何明忠 赵邦霞 彭洪英 谭毅关键词:子宫内膜 胚胎着床 肿瘤转移抑制因子CD63/ME491基因在小鼠子宫内膜表达的动态观察 被引量:5 2007年 目的了解小鼠动情周期和早孕子宫中CD63/ME491 mRNA和蛋白的表达规律,探讨CD63/ME491在胚胎着床过程中的作用。方法应用RT-PCR和免疫组化技术分别观察CD63/ME491 mRNA和蛋白的表达。结果在整个动情周期中,CD63/ME491 mRNA在动情间期表达最多,而在动情期表达最少,但蛋白质却是在动情前期和间期表达最丰富,子宫内膜上皮和基质细胞均呈阳性。早孕的小鼠子宫组织均有CD63/ME491 mRNA表达,且在胚胎开始植入的第4天表达最多,以后维持在较高的表达水平。CD63/ME491蛋白在妊娠第1~6天子宫内膜腔上皮细胞和腺上皮细胞呈阳性表达。但在基质细胞表达的量和范围却不同:妊娠第1天,无CD63/ME491蛋白的表达;妊娠第2天,子宫内膜基质细胞出现微弱阳性表达;以后CD63/ME491蛋白在基质细胞的表达量和表达范围逐渐增强。结论在胚胎着床过程中,CD63/ME491在小鼠子宫中呈动态表达,提示它可能参与了子宫内膜对滋养层细胞有限侵袭的调控。 赵邦霞 谭冬梅 何明忠 陈媛 高立芳 谭毅关键词:子宫内膜 胚胎着床 Expression of TRAIL in Mouse Uterine Endometrium during Embryo Implantation 被引量:2 2006年 Objective To investigate the expression of TRAIL in mouse uterine endometrium during embryo implantation and its role in the apoptosis of decidual cells. Methods Expression of TRAIL in uterine endometrium of pregnant mouse from d 1 to d 8 was detected with RT-PCR and immunohistochemistry. Results The expressed level of TRAIL mRNA in uterine endometrium of pregnant mouse from d 1 to d 8 was higher during embryo implantation than that prior to embryo implantation (P〈0.05). No expression of TRAIL protein in mouse utrine endometrium was detected through d 1 to d 3. However, TRAIL protein was found in the luminal epithelial cells to which embryos attached on d 4. Moreover, TRAIL was expressed solely in decidual cells around invadting embryos through d 5 to d 6 while in trophoblastic cells adjacent to decidua through d 7 to d 8. Conclusion Apoptosis of luminal epithelial cells of endometrium induced by TRAIL could be one of mechanisms with which embryos penertrated the epithelial barrier, and apoptosis of both decidual cells and trophoblastic cells induced by TRAIL may play an important role during accruate invasion of trophoblastic cells. Dong-mei TAN Ming-zhong HE Qi CHEN Guo-qi LAI Li-zhi WANG Yi TAN关键词:TRAIL IMPLANTATION ENDOMETRIUM 瘦素在着床前小鼠胚胎中的表达及其对胚胎发育的影响 被引量:3 2008年 目的探讨瘦素(leptin)在围着床期小鼠胚胎中的表达规律和分布情况以及leptin抗体对小鼠胚胎体外发育的影响。方法雌性NIH小鼠超排后与雄鼠交配,分别在妊娠1~4d上午从输卵管或子宫角冲取相应时期的胚胎,用于以下实验:①分别提取总RNA,检测胚胎中leptin mRNA表达情况。②采用免疫荧光技术,观察leptin蛋白在囊胚的表达和分布情况。③将8-细胞小鼠胚胎培养于含不同浓度leptin抗体的培养液中,观察囊胚形成及脱透明带的情况。结果leptin mRNA仅在囊胚期特异性表达,其余各时期胚胎未见表达;leptin蛋白在囊胚的滋养层细胞和内细胞团的细胞质和细胞膜呈阳性表达,而在细胞核无表达。一定浓度的leptin抗体可明显降低囊胚的形成率(1∶400,P<0.05)和脱带率(1∶1600,P<0.05),且随着抗体浓度的增加,这种抑制作用更明显。结论leptin能促进着床前胚胎发育,同时也可能参与了胚胎着床过程。 高立芳 赵邦霞 谭冬梅 何明忠 谭毅关键词:瘦素 胚胎发育 免疫荧光 分泌型卷曲相关蛋白2对HepG2细胞生物学行为的影响 2008年 目的了解分泌型卷曲相关蛋白2(sFRP2)对HepG2细胞增殖、侵袭和迁移等生物学行为的影响。方法采用sFRP2重组腺病毒感染HepG2细胞,四甲基偶氮唑盐法检测HepG2细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期分布,免疫组织化学法检测肿瘤转移相关因子的表达,Westernblot检测D连环素的表达,Transwell小室检测细胞迁移能力。结果sFRP2明显抑制HepG2细胞增殖,限制细胞周期从G0/G1期进入S期;sFRP2显著增强HepG2细胞CD44和cD82/KAI1等与肿瘤转移抑制相关蛋白的表达,而明显降低有助于肿瘤侵袭转移的细胞外基质金属蛋白酶诱导因子的表达;sFRP2可降低HepG2细胞的迁移能力。sFRP2感染前后,HepG2细胞均有D连环素的表达,且其表达差异无统计学意义。结论sFRP2的重组腺病毒能成功感染HepG2细胞,并对HepG2细胞的增殖、侵袭和转移具有抑制效应。 王立芝 谭冬梅 尉晓蔚 彭洪英 赖国旗 谭毅关键词:肿瘤转移 肿瘤侵润 过表达CD82对植入期小鼠子宫内膜整合素αV、β3、E-cadherin和β-catenin表达的影响 被引量:1 2014年 目的探讨CD82对着床窗口期小鼠子宫内膜上皮细胞内整合素αV、β3、E-cadherin以及β-catenin蛋白表达的影响。方法将构建的CD82腺病毒转染原代培养的小鼠子宫内膜上皮细胞。检测妊娠小鼠子宫内膜上皮细胞转染CD82腺病毒后,细胞内整合素αV、β3、E-cadherin和β-catenin的表达变化情况。结果提取的上皮细胞纯度为(93.2±0.6)%。构建的CD82腺病毒转染效率达到(92.0±4.5)%,转染原代培养的小鼠子宫内膜上皮细胞24 h后,RT-PCR检测发现CD82基因表达明显升高。转染48 h后,Western blot检测CD82蛋白水平明显升高。免疫细胞化学检测妊娠第4天的小鼠子宫内膜上皮细胞转染CD82腺病毒后,整合素αV、β3以及β-catenin的表达较未转染组均有明显上升(P<0.05),但E-cadherin的表达量无明显变化(P>0.05)。结论胚胎植入前,CD82可能影响小鼠子宫内膜上皮细胞内整合素αV、β3和β-catenin的蛋白表达。 尉晓蔚 谭冬梅 张倩 何通川 谭毅关键词:重组腺病毒 子宫内膜上皮细胞 KAI1/CD82基因抑制肿瘤转移的研究进展 被引量:4 2006年 KAI1/CD82是近年来发现并分离出的一个新的肿瘤转移抑制基因,属于TM4SF(transmembrane4superfamily)家族成员,能与多种转录因子结合,调节基因转录。研究表明,KAI1/CD82在细胞膜上可与各种整合素分子、表皮生长因子受体组成复合体,通过PKC、IP4等信号通道来介导细胞的黏附,使肿瘤细胞不易脱离原发灶而起抑制转移功能,同时对肿瘤细胞的迁移和在转移部位的增殖有抑制作用,从而实现抑制肿瘤细胞转移和侵袭。本文就KAI1/CD82基因的结构、作用机制及抑制肿瘤转移及意义作一综述。 何明忠 李跃民 谭毅关键词:肿瘤转移 肿瘤转移抑制因子CD82/KAI1基因在小鼠子宫内膜的动态表达 2006年 王焕英 谭冬梅 何明忠 王立芝 谭毅关键词:子宫内膜 胚胎着床 肿瘤转移抑制因子CD82/KAI1在假孕小鼠子宫的表达及其对小鼠胚胎着床的影响 被引量:8 2007年 目的:研究CD82/KAI1mRNA及蛋白在假孕d1-8小鼠子宫中的表达规律,以及CD82/KAI1抗体对小鼠胚胎体外发育及着床的影响。方法:用RT-PCR及免疫组织化学技术观察CD82/KAI1mRNA及蛋白在假孕小鼠子宫的表达规律。将8-细胞小鼠胚胎培养于含不同浓度CD82/KAI1抗体的培养液中,观察囊胚形成及脱透明带的情况。妊娠d4小鼠宫角注射CD82/KAI1抗体,于妊娠d8观察小鼠胚胎植入数量。结果:①CD82/KAI1mRNA在假孕d1-8小鼠子宫中均有表达,于d4、d5表达最丰富。CD82/KAI1蛋白在假孕d1-8的子宫基质细胞及腺上皮细胞均有表达,假孕d1-4腔上皮细胞无表达,假孕d5子宫腔上皮细胞出现弱阳性表达,从d6开始子宫腔上皮细胞表达逐渐增强。②一定浓度的CD82/KAI1抗体可明显抑制囊胚的形成率(1∶400,P<0.05)和脱带率(1∶800,P<0.05)。③宫角注射一定量的CD82抗体可以显著提高小鼠胚胎的着床数(8.35±0.17vs4.52±0.24,P<0.05)。结论:CD82/KAI1在妊娠小鼠子宫的表达是非胚胎依赖性的。CD82/KAI1在小鼠胚胎发育和着床过程中发挥重要作用。 谭冬梅 赵邦霞 尉晓蔚 彭洪英 赖国旗 何明忠 谭毅关键词:子宫内膜 胚胎着床 肿瘤转移抑制因子CD82/KAI1基因在小鼠子宫内膜的动态表达 被引量:8 2007年 目的:探讨肿瘤转移抑制因子CD82/KAI1在小鼠胚胎着床过程中的功能。方法:应用RT-PCR和免疫组织化学技术分别观察CD82/KAI1mRNA和蛋白在小鼠动情周期和早孕子宫中的表达。结果:在动情周期中,CD82/KAI1mRNA除在动情期较低外,其余三期的表达量基本相同,但蛋白质却是在动情期表达最丰富,子宫内膜上皮和基质均呈阳性。在早孕子宫中,CD82/ KAI1mRNA的表达逐渐增多,蛋白质表达的量和范围也逐渐增强。结论:CD82/KAI1在小鼠子宫中呈动态表达,提示它在胚胎精确侵袭子宫内膜的调节中发挥作用。 王焕英 谭冬梅 何明忠 王立芝 谭毅关键词:子宫内膜 胚胎着床