广州市医药卫生科技项目(201102A213119)
- 作品数：9 被引量：13H指数：2
- 相关作者：牛道立何芬邹俊涛李建锋李杨更多>>
- 相关机构：广州医学院第一附属医院中山大学东莞市塘厦人民医院更多>>
- 发文基金：广州市医药卫生科技项目广州市教育局科技计划项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 阿尔茨海默病免疫治疗研究进展
- 2011年
- AD已成为威胁人类晚年健康的一大隐患,其发病率有逐年上升之趋势,给社会带来沉重负担,对该病的研究显得非常紧迫。自1999年Schenk等人首次报道了Aβ肽疫苗免疫接种AD转基因小鼠取得的进展后,免疫治疗作为AD预防和研究的全新领域被开辟出来,并成为近年来研究的焦点之一。本文就该病的免疫治疗及疫苗研究进展作一综述。
- 袁茂运邹俊涛
- 关键词：阿尔茨海默病疫苗免疫治疗
- 髓鞘碱性蛋白介导神经元新生修复放射性脑损伤实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫颅脑照射动物可否修复放射性脑损伤所致学习记忆能力下降。方法30只雄性SD大鼠随机分为3组,空白组、单纯照射组、照射加MBP免疫组,照射采用直线加速器,6MV-X线全脑照射,单次照射7 Gy,Morris水迷宫行为学检测,并进行免疫荧光组织化学及激光共聚焦显微技术计数新生神经元(BrdU+/DCX+)数量。结果照射加MBP免疫组Morris水迷宫行为学检测及新生神经元计数接近于空白组,差异无统计学意义(P>0.05);单纯照射组Morris水迷宫行为学检测及新生神经元计数明显少于空白组及照射+MBP免疫组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论髓鞘碱性蛋白可促进颅脑照射动物模型海马区神经元新生,可改善学习及记忆能力。
- 何芬魏旋李建锋李杨廖小文曾乾牛道立
- 关键词：神经新生颅脑照射
- Aβ_(42)及GM-CSF双基因重组腺病毒的构建和免疫原性
- 2012年
- 目的构建含有β-淀粉样蛋白(Aβ42)及核糖体进入位点(IRES)引导的粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)双表达重组腺病毒疫苗。方法 PCR法扩增带有IgGк轻链信号肽序列的Aβ42基因、IRES基因和小鼠GM-CSF基因,定向克隆于穿梭质粒pAdTrack-CMV中。通过与腺病毒骨架载体pAdeasy-1在细菌内同源重组形成重组腺病毒质粒Ad-Aβ42-IRES-GMCSF,转染人胚肾293细胞后包装成有感染能力的重组腺病毒颗粒(AD-Aβ42)。重组腺病毒经氯化铯密度梯度离心纯化后感染293细胞及Hela细胞,用免疫细胞化学和ELISA方法分别检测Aβ42及GM-CSF在细胞内和培养液中的分泌表达。免疫动物鉴定其免疫原性。结果 pAdTrack-Aβ42-GMCSF测序结果和预期一致,纯化的AD-Aβ42感染Hela细胞后,免疫细胞化学证实Aβ42基因在Hela细胞内表达。AD-Aβ42感染293细胞后,ELISA检测培养上清中Aβ42含量为(159.87±33.26)ng/mL,GM-CSF含量为(205.45±38.20)ng/mL。免疫动物能诱导机体产生高滴度的抗Aβ抗体。结论成功制备了AD-Aβ42,核糖体进入位点(IRES)成功引导的GM-CSF的表达,感染细胞证实其呈分泌表达,接种动物能诱导高滴度抗Aβ抗体。为老年性痴呆(AD)的基因治疗做好铺垫。
- 何芬靳晓宇邹俊涛牛道立杨俊华魏旋李建锋姚志彬
- 关键词：Β-淀粉样蛋白重组腺病毒
- 重组大鼠脑源性神经营养因子腺病毒的构建及体外表达分析被引量：2
- 2011年
- 目的构建含有大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)基因的重组腺病毒(AD)载体,并分析其体外表达情况。方法将采用RT-PCR技术获取的大鼠BDNF的cDNA基因定向克隆入穿梭质粒pAdTrack-CMV中。通过与腺病毒骨架载体pAdeasy-1在细菌内同源重组形成重组腺病毒质粒pAd-BDNF,转染人胚肾293细胞后包装成有感染能力的重组腺病毒颗粒(Ad-BDNF)。重组病毒感染体外培养的Hela细胞后,用RT-PCR、Western blot及免疫细胞化学检测细胞BDNF基因及蛋白表达情况。结果 pAd-BDNF测序结果和预期一致,同源重组并经293细胞包装后形成重组腺病毒Ad-BDNF,重组病毒感染Hela细胞后能高水平表达BDNF。结论成功制备了重组腺病毒Ad-BDNF,感染细胞证实其呈分泌表达,为将其进一步应用于神经系统损伤性疾病治疗的研究打下了基础。
- 郎洪刚曹文斌牛道立何芬
- 关键词：BDNF腺病毒基因治疗脑损伤
- 新生期小鼠接种Aβ_(42)的免疫特性研究
- 2012年
- 目的观察新生期小鼠接种Aβ42后诱发的T细胞免疫效应变化,为下一步研究接种Aβ42影响小鼠认知功能做基础。方法新生24 h内的SPF级C57BL/6小鼠随机分2组,每组12只,新生24 h内皮下多点免疫接种Aβ42(80μg)加等体积量弗氏佐剂,对照组接种生理盐水加等体积量弗氏佐剂,于生后第1、2周末再加强免疫1次,4周末摘眼球采血,无菌取出小鼠脾脏。ELISA法检测抗体量,细胞流式分析CD4+/CD8+细胞的比值与Th1/Th2细胞的比值。结果 Aβ42组的抗体量是(31.03±4.15)μg/mL,高于对照组(P<0.01);与对照组小鼠脾脏细胞中CD4+/CD8+细胞的比值(0.55±0.19)相比,Aβ42组CD4+/CD8+细胞的比值(0.89±0.28)较高,Aβ42组小鼠脾脏细胞Th1/Th2细胞的比值(6.54±1.16)低于对照组小鼠脾脏细胞Th1/Th2细胞的比值(8.92±1.77),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论新生期接种Aβ42可以诱导小鼠产生抗Aβ42抗体,其免疫反应向Th2方向极化。
- 李少阳邹俊涛王淏杨俊华夏宇岑姚志彬
- 关键词：阿尔茨海默病AΒ42免疫反应
- 沉默Pokemon基因对鼻咽癌细胞株CNE-2放射敏感性的影响被引量：1
- 2012年
- 【目的】探讨沉默Pokemon基因对鼻咽癌细胞(CNE-2)放射敏感性的影响,寻求放射治疗鼻咽癌的新方法。【方法】首先利用siRNA预测软件得到3条siRNA序列,并制备合成siRNA片段,利用RT-PCR和免疫印迹法检测其沉默Pokemon基因的效果,筛选出沉默效果最佳的siRNA片段,转染CNE-2细胞后观察其对CNE-2细胞p53基因表达的影响、MTT法检测细胞的增殖活性、流式细胞术检测细胞的凋亡、克隆形成法检测转染siRNA联合放射处理后细胞的放射增敏比。【结果】成功筛选出了沉默效应最佳的siRNA片段,转染CNE-2细胞后能显著降低其Pokemon基因的表达、提高p53基因的表达、降低细胞的增殖活性、加速细胞的凋亡,同时增加了CNE-2细胞的放射敏感性。【结论】沉默Pokemon基因能增加鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性,这为临床鼻咽癌的放射增敏治疗提供了新思路。
- 牛道立李建锋何芬邹俊涛周琼芳魏旋李杨陈龙华
- 关键词：POKEMON基因鼻咽癌
- 全营养混合液配合放化疗治疗Ⅲ期非小细胞肺癌临床观察被引量：5
- 2011年
- 目的观察脂肪乳氨基酸(17)葡萄糖(11%)注射液配合放化疗治疗Ⅲ期非小细胞肺癌的疗效。方法将76例确诊的Ⅲ期非小细胞肺癌患者,随机分为脂肪乳氨基酸(17)葡萄糖(11%)注射液配合放化疗组(观察组,38例)和单纯放化疗组(对照组,38例)。两组均为同期放化综合治疗,放疗采用三维适形放射治疗,治疗总剂量50～70 Gy,2.0 Gy/次,1次/d,每周5次,化疗方案为PC(紫杉醇+顺铂),21 d一周期,共两周期。观察组加用脂肪乳氨基酸(17)葡萄糖(11%)注射液1 440 mL,中心静脉导管置管静脉滴注,1次/d,自化疗用药结束后次日开始用7 d结束,共两周期;对照组则单纯放化综合治疗,不加用脂肪乳氨基酸(17)葡萄糖(11%)注射液及其他静脉营养药物治疗。比较两组的近期疗效、血清白蛋白、白/球比值及体重变化。结果观察组近期有效率84.2%,对照组为78.9%,两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者血清白蛋白、白/球比值均有升高,且体重增加;而对照组血清白蛋白、白/球比值均有降低,且体重减少,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论脂肪乳氨基酸(17)葡萄糖(11%)注射液能够提高Ⅲ期非小细胞肺癌同期放化疗期间的治疗耐受性,改善患者的生活质量。
- 何芬蒋昌斌万明辉秦海燕李蓉牛道立
- 关键词：非小细胞肺癌三维适形放射治疗放化疗
- siRNA干扰Pokemon基因对鼻咽癌CNE-2细胞生长作用的研究被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨siRNA干扰Pokemon基因对鼻咽癌CNE-2细胞生长作用的影响。方法:利用siRNA预测软件得到3条siRNA编码DNA序列,并制备合成siRNA片段,利用RT-PCR和蛋白质印迹法检测其沉默Pokemon基因的效果,筛选出沉默效果最佳的siRNA片段。利用MTT法和流式细胞术检测CNE-2细胞生长与凋亡情况。结果:筛选出一条≥50%沉默效应的siRNA片段,转染鼻咽癌CNE-2细胞后,Pokemon基因表达明显下降(P<0.05),p14ARF和p53基因表达上调,P<0.05。鼻咽癌CNE-2细胞增殖受到抑制(P=0.015),凋亡率升高,P=0.008。结论:Pokemon基因沉默后可抑制CNE-2细胞生长,促进细胞凋亡,其机制可能与p14ARF和p53的表达上调有关。
- 牛道立李建锋何芬邹俊涛周琼芳魏璇李杨陈龙华
- 关键词：RNA干扰鼻咽肿瘤
- 脑室内注射重组BDNF腺病毒对大鼠海马神经发生的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察脑室内注射BDNF对海马神经发生的影响。方法脑室内注射重组BDNF腺病毒4周后,Morris水迷宫进行行为学检测,双标组化染色方法观察海马新生神经元数目的变化。结果与对照组相比,实验组大鼠空间学习和记忆能力明显增强(P<0.05);实验组大鼠海马DG区Brdu/DCX阳性神经元数目明显多于对照组(P<0.05)。结论脑室内注射BDNF导致大鼠认知能力增强,海马Brdu/DCX阳性神经元数目增加,提示BDNF提高认知能力可能与其引起海马Brdu/DCX阳性神经元增加有关。
- 郎洪刚曹文斌杨俊华李少阳邹俊涛
- 关键词：脑源性神经营养因子
