浙江省科技计划项目(2003C32043) 作品数:6 被引量:39 H指数:5 相关作者: 郭卫东 周春丽 路梅 李玉萍 陈瑾 更多>> 相关机构: 浙江师范大学 江西科技师范学院 西北农林科技大学 更多>> 发文基金: 浙江省科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 天文地球 更多>>
Gus基因在佛手叶片中的瞬间表达 被引量:6 2005年 采用基因枪法对佛手(Citrus medicaL.var.sarcodactylis(Noot)Swingle)嫩叶和老叶叶盘进行了Gus基因转化和瞬时表达研究,分析了轰击距离、叶片组织特性对转化效果的影响.结果显示,在7.584 5×106Pa轰击压力下,采用6 cm轰击靶距转化嫩叶可获得比较高的Gus基因瞬间表达频率;老叶的转化效果比嫩叶差;增加轰击次数并不一定能提高瞬间表达频率. 郭卫东 周春丽 路梅 谢选松关键词:佛手 基因枪 GUS基因 矮化佛手的形态特征及遗传背景分析 被引量:5 2007年 对通过137Cs-γ射线辐射诱变产生的金华佛手矮化类型与现有的主栽类型青皮佛手进行了形态特征的比较分析,同时利用ISSR分子标记技术分析了矮化佛手的遗传背景。结果表明,矮化佛手具有植株矮、树冠小,枝条节间短、少刺,叶片小而厚,果实小等特点,与现有主栽类型青皮佛手相比更适合制作盆景;根据ISSR扩增结果进行聚类分析,结果表明矮化佛手与其它类型佛手在遗传背景上存在差异,矮化性状具有一定的遗传基础。 王俊平 郭卫东 倪开诚 张真真关键词:矮化 佛手 ISSR 农杆菌介导佛手遗传转化主要影响因素的研究 被引量:22 2006年 采用根癌农杆菌介导的佛手叶盘转化法,在建立转海藻糖合酶基因(TPS)佛手体系过程中,对影响农杆菌转化频率的各种因素进行了研究。结果表明,佛手叶盘需在黑暗条件下MT培养基上预培养2-3d,与农杆菌共培养3d较合适;农杆菌菌液浓度OD600约为0.6-0.8,感染时间20min;抑制农杆菌生长的抗生素浓度以头孢霉素(Cef)250mgL-1和羧苄青霉素(Cb)250mgL-1且延迟筛选时间4d最好;共培养基中添加100μmol/L乙酰丁香酮(AS)和400mgL-1半胱氨酸(L-Cys)对佛手遗传转化有明显的促进作用。经GUS报告基因和PCR技术检测,初步证实TPS基因已整合到佛手基因组中,且GUS报告基因瞬时表达率为5.9%。 周春丽 郭卫东 路梅 陈瑾 李玉萍关键词:佛手 农杆菌 利用GUS基因瞬时表达探索佛手叶盘基因枪转化参数 被引量:7 2005年 佛手是芳香科枸橼类植物,有很好的药用和观赏价值,但其品种较为单一,对其进行遗传改良和品种选育显得十分必要.为了将基因枪转化方法应用于佛手的遗传改良和品种选育,本实验以GUS基因为报告基因,利用基因枪方法将其转入金华佛手外植体内,通过检测GUS基因在佛手叶盘中的瞬时表达情况,分析了外植体的幼嫩程度、射程、氦气压力、真空度、轰击次数等参数对GUS瞬时表达的影响,并研究了最佳检测时间.结果表明,以幼叶为受体,在射程为6 cm、氦气压力为7.584×106Pa,真空度为88.046 kPa条件下,2 d后可检测出GUS基因的最佳表达活性.轰击次数多少对GUS基因瞬时表达影响不明显. 周春丽 郭卫东 王德解 余初浪 路梅 李玉萍关键词:佛手 基因枪 GUS基因 佛手组织培养和Km敏感性试验 被引量:3 2005年 以佛手的叶片、茎段为材料,建立了其组织培养系统。研究表明,B5比M S更适合作为诱导佛手愈伤组织的基础培养基,诱导愈伤组织效率较高的培养基配方为B5+2.0 m g.L-12,4-D+0.2 m g.L-1ZT和B5+1.5 m g.-L 12,4-D+1.0 m g.L-1NAA+0.4 m g.L-16-BA。在叶片对卡那霉素敏感性的试验中发现,叶片外植体预培养2 d后进行筛选的效果较好,卡那霉素的适宜筛选浓度为25 m g.L-1。 周春丽 郭卫东 张燕燕关键词:佛手 卡那霉素 佛手^(137)C_S-γ射线辐射效应研究 被引量:10 2006年 采用137CS-γ射线对佛手枝条进行辐射处理,然后扦插培养,观察插条的成活率及生长状况,分析辐射效应及适宜的辐射处理条件。研究结果表明,辐射对佛手枝条的扦插成活率、新梢生长量和生长曲线都有显著影响,而且不同辐射剂量和剂量率的影响有显著差异。经过综合分析认为,采用137CS-γ辐射源对佛手枝条进行辐射诱变的适宜条件为剂量5 Gy、剂量率1 Gy.min-1,或剂量10 Gy、剂量率1 Gy.min-1。 郭卫东 路梅 周春丽 范琳丽 潘一峰关键词:佛手 诱变