教育部科学技术研究重点项目(209146)
- 作品数：10 被引量：32H指数：4
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- 相关机构：石河子大学北京理工大学嘉兴学院更多>>
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- 相关领域：理学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 离子液体[MBPy]Tf2N的光谱特征及荧光法检测被引量：1
- 2015年
- 为满足疏水性离子液体N-甲基-N-丁基吡咯烷双三氟甲烷磺酰亚胺盐（[MBPy]Tf2N）在甘草酸生物催化体系中分析检测的需要,研究了[MBPy]Tf2N的光谱特征,并考察了溶剂、醇-水混合溶剂和p H值对[MBPy]Tf2N荧光特性的影响,建立了生物催化体系中[MBPy]Tf2N的荧光光谱检测方法.研究结果表明,[MBPy]Tf2N在186 nm处有1个最大吸收峰,常规紫外检测法不适于对其进行检测;[MBPy]Tf2N荧光光谱最大激发波长为228 nm,发射波长为340 nm,且其耐光褪色性良好,在水溶液中荧光量子产率为0.067,在醇-水混合溶剂中其荧光强度有增大趋势,在碱性介质中其荧光强度受影响较大;荧光光谱法检测[MBPy]Tf2N的检出限（S/N=3）为1.00μg/m L,标准曲线在5.00-1.25×10^3μg/m L浓度范围内线性关系良好（R2=0.9999）,生物反应液中加标回收率为97.4%-107.4%（相对标准偏差RSD=4.6%）.
- 欧阳巧凤郑兰兰曹红张馨李春沈姣陈礼婷刘进
- 关键词：光谱特征荧光检测法
- 海藻酸钠固定化β-葡萄糖醛酸苷酶的研究被引量：10
- 2011年
- 本文研究了以海藻酸钠为载体,采用交联-包埋方式固定β-葡萄糖醛酸苷酶的固定化工艺。分别考察海藻酸钠浓度、戊二醛体积分数、氯化钙浓度、交联时间和固化时间对固定化酶相对酶活力的影响,并以正交试验确定β-葡萄糖醛酸苷酶最佳的固定化条件:海藻酸钠质量浓度35g/L、给酶量1600U/g载体、戊二醛体积分数0.2%、氯化钙质量浓度20g/L、交联时间2h、固化时间2h。研究表明此时固定化酶的回收率较高,可达到71.66%,本文使用的固定化工艺简单易行,具有广阔的工业前景。
- 张斌孙倩任延鹏梁艳明张婉婧陈璐李春曹红
- 关键词：Β-葡萄糖醛酸苷酶海藻酸钠固定化酶
- TTC法测定离子液体中产紫青霉细胞存活率的研究被引量：2
- 2014年
- 以产紫青霉菌细胞为供试材料,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)测定了不同波长、萃取剂、显色时间、显色温度以及不同pH下的脱氢酶活性,并将优化后的TTC-脱氢酶还原法用于测定不同离子液体中产紫青霉的细胞存活率。结果表明,在0.5%的TTC缓冲溶液中,测定波长为485 nm时吸光度最高;选用丙酮作为萃取剂时,萃取效果好;适宜的显色时间为1 h,显色温度为32℃;在pH为7.0、0.2 mol/L的NaH2PO4-Na2HPO4(PB)缓冲溶液中,显色稳定,脱氢酶活性也较好。优化后的TTC-脱氢酶还原法能较为准确、快速的检测出不同离子液体中产紫青霉菌的细胞存活率。
- 李扬曹红李春郑兰兰杜蕾
- 关键词：TTC脱氢酶活性离子液体
- 毕赤酵母高效表达重组β-葡萄糖醛酸苷酶的诱导方法研究被引量：2
- 2011年
- 将甘草酸生物转化合成GAMG已成为国内外医药和食品行业研究的热点。该文在前期构建毕赤酵母(pichia pastoris)工程菌GS115-GUS的基础上,对重组毕赤酵母工程菌发酵条件进行了研究。通过单因素及正交试验建立工程菌最佳表达β-葡萄糖醛酸苷酶的诱导产酶方法:重组毕赤酵母GS115-GUS菌株在液体YPD培养基中活化24 h后,接种到BMGY中富集菌体,OD600达到6.0时,按照1∶1(V/V)的接种比率接入到pH为6.0的BMMY培养基中,加入1.5%诱导剂甲醇诱导产酶,且每隔24 h添加一次。该诱导产酶条件简单、易行、科学、合理,毕赤酵母高效表达GAMG的酶活高达1.97×103 U/mL,研究结果达到预期目标,为进一步研究重组酵母工程菌产β-葡萄糖醛酸苷酶的发酵水平、β-葡萄糖醛酸苷酶生物催化甘草酸制备GAMG以及工业化生产奠定基础。
- 张斌任延鹏梁艳明张婉婧孙倩李春曹红
- 关键词：毕赤酵母摇瓶发酵发酵条件优化Β-葡萄糖醛酸苷酶
- 不同阴离子组成的离子液体对产紫青霉生长、代谢及催化特性的影响被引量：4
- 2014年
- 研究了6种不同阴离子分别与1-丁基-3-甲基咪唑阳离子[Bmim]+组成的6种离子液体对产紫青霉(Penicillium purpurogenum Li-3)细胞生长、代谢、细胞膜透性和催化活性的影响.结果表明,[Bmim]Ac和[Bmim]Tf2N对菌体细胞的生长和代谢具有明显的抑制作用;6种离子液体均改善了细胞膜透性,其中以[Bmim]Ac最明显;全细胞催化反应实验表明,在分别含25%的疏水性离子液体[Bmim]PF6和[Bmim]Tf2N的2种介质体系中,甘草酸(GL)生物转化合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的转化率分别为82.73%和89.84%,GAMG的产率分别为68.65%和76.23%,与不含离子液体的纯缓冲溶液体系相比(GL转化率和GAMG产率分别为81.82%和33.31%),GL的转化率均略有提高,而GAMG的产率则提高了2倍多,表明2种疏水性离子液体对全细胞催化反应的定向性具有明显促进作用;亲水性离子液体[Bmim]Ac,[Bmim]Cl和[Bmim]NO3对细胞的催化活性具有明显的抑制作用,而[Bmim]BF4的抑制作用则较弱.
- 李扬曹红欧阳巧凤李春郑兰兰张馨
- 关键词：离子液体阴离子全细胞
- 离子液体[BMIM]BF_4对甘草酸及其衍生物色谱行为的影响被引量：4
- 2014年
- 将离子液体1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐（[BMIM]BF。）加入到高效液相色谱流动相中，研究其对甘草酸（GL）及其衍生物甘草次酸（GA）和单葡萄糖醛酸基甘草次酸（GAMG）色谱行为的影响。结果显示，加入离子液体后的流动相能够明显改善色谱峰形、减少峰拖尾、增大峰面积和峰高、提高检测灵敏度，并缩短GL，GA及GAMG3种化合物的同时检测时间，提高检测效率。优化色谱条件为：InertSustain C18（4．6mm×250mmi．d．，5μm）反相色谱柱为分离柱，柱温40℃；甲醇-1．0mmol／L[BMIM]BF4（体积比81：19，乙酸调至pH3．0）为流动相，流速0．7mL／min，进样体积20μL，检测波长251nm。GL，GA及GAMG在5．00—100mg／L范围内线性关系良好（r≥0．9998），检出限分别为0．02，0．04，0．09mg／L；加标回收率分别为100．1％，98．0％，98．2％，RSD为0．18％～0．43％。同时测定GL生物转化体系中3种组分，结果满意。
- 郑兰兰曹红唐明翔欧阳巧凤张馨
- 关键词：离子液体[BMIM]BF4甘草酸甘草次酸
- 甲壳素固定化β-葡萄糖醛酸苷酶的研究被引量：2
- 2011年
- 以甲壳素为载体、戊二醛为交联剂,固定β-葡萄糖醛酸苷酶,对β-葡萄糖醛酸苷酶的固定化条件进行了研究,并通过正交实验确定了酶固定的最佳条件:戊二醛浓度0.7%,交联时间4h,吸附时间为9h,反应温度40℃,此时酶活力回收率可达67.32%。
- 孙倩李开雄李春段海燕叶海曹红
- 关键词：Β-葡萄糖醛酸苷酶甲壳素固定化
- 亲水性离子液体[EMIM]BF_4对固定化β-葡萄糖醛酸苷酶催化活性的影响被引量：8
- 2013年
- 以壳聚糖为固定化载体,采用吸附交联法制备固定化β-葡萄糖醛酸苷酶;以1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([EMIM]BF4)/缓冲溶液均相体系为介质,研究了亲水性离子液体[EMIM]BF4对固定化酶生物催化甘草酸(GL)合成单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的影响.实验结果表明,当均相体系中[EMIM]BF4的体积分数为16%,pH为5.4,反应温度为50℃及摇床转速为200 r/min时,酶活力达到最高,并且明显优于纯缓冲溶液体系中的最高酶活.重复利用性实验结果表明,与纯缓冲液介质体系相比,固定化酶在含亲水性离子液体[EMIM]BF4的均相介质中表现出较好的操作稳定性.表观动力学参数和活化能数据表明,亲水性离子液体[EMIM]BF4在催化体系中能够增强酶和底物GL的亲和力,有效稳定酶-底物的过渡态,并降低反应活化能,而使固定化β-葡萄糖醛酸苷酶表现出较高的催化活性.
- 曹红孙倩李春李开雄李军
- 关键词：催化活性甘草酸
- 壳聚糖微球吸附交联法固定β-葡萄糖醛酸苷酶被引量：1
- 2010年
- 以壳聚糖微球为载体,采用吸附-交联法将β-葡萄糖醛酸苷酶固定化,采用正交试验设计最佳固定化条件,β-葡萄糖醛酸苷酶的最佳固定化条件为:壳聚糖浓度2.0%、吸附时间12 h、戊二醛浓度0.58%、交联温度40℃、交联时间3 h,固定化酶的酶活回收率最高,可达到74.10%。
- 孙倩李开雄李春段海燕叶海曹红
- 关键词：Β-葡萄糖醛酸苷酶壳聚糖固定化
- [BMIM]PF_6/缓冲液两相体系中固定化β-葡萄糖醛酸苷酶催化特性研究被引量：8
- 2011年
- 利用1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐([BMIM]PF6)/缓冲液两相体系为介质,固定化β-葡萄糖醛酸苷酶催化甘草酸(GL)合成单葡萄糖醛酸甘草次酸(GAMG),以期改善酶催化效能.实验表明,当反应条件固定化酶为0.25g,两相体系中[BMIM]PF6的体积分数为35%,pH为5.0,反应温度为40℃时,酶活力最高达1 000U,远大于纯缓冲液单相体系中的最高酶活力450U.离子液体重复利用实验表明,[BMIM]PF6回收率高于85%,在含有重复回收的[BMIM]PF6介质中,固定化酶相对活力大于93%.
- 曹红孙倩段海燕叶海陈思羽刘桂艳
- 关键词：离子液体
