河南省科技攻关计划(122102310208)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- 微囊藻毒素-LR通过线粒体途径诱导人支气管上皮细胞凋亡被引量：1
- 2015年
- 探讨线粒体Caspase依赖性途径是否参与微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)诱导人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,16HBE)凋亡过程。将处于对数生长期的16HBE分别暴露于终浓度为0(对照组)、2.5、5、10μg·m L-1的微囊藻毒素-LR和10μg·m L-1MC-LR+50μmol·L-1Caspase广谱抑制剂Z-VAD-FMK,持续24 h和48 h。检测细胞凋亡率,线粒体跨膜电位(ΔΨm),Caspase-3和Caspase-9相对表达量。结果显示,与对照组相比,各浓度染毒组细胞凋亡率和Caspase-3、Caspase-9相对表达量均升高,10μg·m L-1MC-LR染毒组线粒体膜电位降低;与10μg·m L-1MC-LR组相比,10μg·m L-1MCLR+50μmol·L-1Z-VAD-FMK组细胞凋亡率明显降低,Caspase-3和Caspase-9相对表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。且随着MC-LR染毒浓度的升高或染毒时间的延长,16HBE细胞凋亡率和Caspase-3、Caspase-9相对表达量呈升高趋势。研究表明,MC-LR可以通过线粒体Caspase依赖性途径诱导16HBE细胞凋亡。
- 薛利剑刘晓蕙杨明峰刘迎朱靖乔豆庄东刚崔留欣张慧珍
- 关键词：微囊藻毒素-LR线粒体途径人支气管上皮细胞凋亡
- 微囊藻毒素-LR对人支气管上皮细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响
- 2014年
- 目的研究微囊藻毒素-LR(microcystins-LR,MC-LR)对人支气管上皮细胞(16HBE)凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响。方法将16HBE细胞分别暴露于终浓度为0(对照)、1、10、20、30、40μg/ml的MC-LR溶液24h后,采用MTT法检测细胞活性。将16HBE细胞分别暴露于终浓度为0(对照)、2.5、5、10μg/ml的MC-LR溶液培养24、48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用Western blot法检测凋亡相关蛋白细胞色素C(Cyt-c)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、前凋亡蛋白(Bax)的相对表达量。结果与对照组相比,各浓度MC-LR染毒组16HBE细胞的存活率较低,凋亡率较高,差异均有统计学意义(P<0.05);随着MC-LR染毒浓度的升高,16HBE细胞的存活率呈逐渐下降的趋势,凋亡率呈上升趋势;随着MC-LR染毒时间的延长,16HBE细胞的凋亡率均呈上升趋势。当暴露时间一定时,与对照组相比,各浓度MC-LR染毒组16HBE细胞Bax和Cyt-c蛋白的表达水平均升高,Bcl-2蛋白的表达水平均下降(除外2.5μg/ml MC-LR染毒24 h组),差异有统计学意义(P<0.05);且随着MC-LR染毒浓度的升高和染毒时间的延长,16HBE细胞Bax和Cyt-c蛋白的表达水平均呈上升趋势,Bcl-2蛋白的表达水平均呈下降趋势。结论 MC-LR能诱导16HBE细胞发生凋亡,并引起Cyt-c和Bax蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低。
- 李洋张丰泉杨明峰秦晋解观韬刘建新程学敏崔留欣张慧珍
- 关键词：微囊藻毒素-LR人支气管上皮细胞细胞凋亡凋亡相关蛋白
- N-乙酰半胱氨酸和微囊藻毒素-LR联合暴露对中国仓鼠卵巢细胞凋亡的影响
- 2013年
- 目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)和微囊藻毒素-LR(MC-LR)联合暴露对中国仓鼠卵巢(CHO)细胞凋亡的影响。方法取对数生长期细胞,分别加入0(对照)、1、5、10、20、30、40、50、60、80 mmol/L的NAC溶液以及终浓度为0、1、5 mmol/L的NAC溶液+终浓度为0、2.5、5、10μg/ml的MC-LR溶液培养24 h。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验检测细胞活性,采用2,7-二氯荧光乙酰乙酸盐(DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(ROS)含量的变化,采用四氯四乙基苯并咪唑基羰花青碘化物(JC-1)荧光探针法检测线粒体膜电位的变化,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin VFITC/PI)双染法检测细胞凋亡率。结果 1、5 mmol/L NAC单独作用对细胞活性无明显抑制作用,且细胞存活率均在80%以上;NAC与MC-LR同时作用时,细胞活性增加,ROS含量减少,线粒体膜电位升高,凋亡率减少。结论 MC-LR可诱导CHO细胞产生大量ROS从而引起细胞凋亡,抗氧化剂NAC可拮抗MC-LR诱导ROS生成导致的细胞凋亡。
- 薛利剑李锦辉杨明峰崔留欣张成鹏焦建华张慧珍
- 关键词：微囊藻毒素-LRN-乙酰半胱氨酸活性氧细胞凋亡中国仓鼠卵巢细胞
