国家自然科学基金(30570855)
- 作品数：18 被引量：44H指数：4
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- 尾加压素Ⅱ对体外培养大鼠肾成纤维细胞的促增殖作用被引量：1
- 2009年
- 目的观察尾加压素Ⅱ(UrotensinⅡ,UⅡ)对大鼠肾间质成纤维细胞(RFB)的促增殖作用,探讨UⅡ在肾纤维化发生发展中的作用。方法体外培养大鼠肾成纤维细胞并鉴定,采用MTT法、流式细胞仪(FCM)法分别观察不同浓度UⅡ作用下,大鼠肾成纤维细胞数、细胞周期的变化。结果UⅡ可以促进RFB的增殖活性,随着UⅡ作用浓度的增加,MTT吸光度值呈先升高后降低的趋势,其中1×10-9和1×10-8mol/L UⅡ组作用显著(P<0.05);在1×10-10,1×10-9,1×10-8,1×10-7mol/L UⅡ作用下,RFB S期细胞百分率均较对照组明显增加,而G0-G1期细胞百分率均较对照组明显降低(P<0.01);在1×10-7mol/L UⅡ作用下,上述各参数与对照组比较无统计学意义(P>0.05)。结论UⅡ能促进大鼠肾成纤维细胞增殖,影响细胞周期,这可能提示UⅡ在肾纤维化发生和发展过程中发挥着重要作用。
- 王丹李才李相军齐玲尹俐高海成
- 关键词：成纤维细胞增殖
- 尾加压素Ⅱ对大鼠肾小管上皮细胞的促丝裂作用被引量：4
- 2007年
- 目的:研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)对大鼠肾小管上皮细胞的促丝裂作用。方法:采用机械分离和酶消化法获取肾小管上皮细胞进行培养、鉴定;用免疫细胞化学法定位溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入到肾小管上皮细胞DNA内;用MTT和BrdU掺入法观察不同浓度UⅡ(0、10-10、10-9、10-8、10-7和10-6mol.L-1)对肾小管上皮细胞增殖和DNA合成的影响,以确定其促丝裂作用。结果:培养的细胞经Cytokeratin-18免疫细胞化学染色后,强度不一和不均匀分布的棕黄色颗粒定位于大部分细胞的胞核周围和胞浆内。培养的肾小管上皮细胞经BrdU掺入和免疫细胞化学显色后,细胞核内有棕黄色颗粒沉着。10-10mol.L-1UⅡ组的MTT值、BrdU掺入量与对照组(0 mol.L-1UⅡ)比较差异无显著性(P>0.05);10-9和10-8mol.L-1UⅡ组的MTT值、BrdU掺入量高于对照组(P<0.01或P<0.05);与对照组比较,10-7和10-6mol.L-1UⅡ组的MTT值明显增加(P<0.05),但增加的幅度较10-9和10-8mol.L-1UⅡ组低,而BrdU掺入量无明显改变。结论:UⅡ对体外培养的大鼠肾小管上皮细胞具有促丝裂作用。
- 陈素贤李才苗春生张秀云范哲
- 关键词：内皮缩血管肽类肾小管上皮细胞
- 尾加压素Ⅱ对体外高糖培养大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响及其意义被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)对体外高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞(MC)增殖影响的机制及意义。方法:体外高糖培养大鼠肾MC,分为5组:对照组及不同浓度UⅡ(10-7、10-8、10-9和10-10mol·L-1)组,37℃孵育24h,用流式细胞术分析处于细胞周期中S期的MC比例,MTT比色法检测细胞增殖率,BrdU-ELISA法测定细胞培养上清中BrdU含量。结果:MTT实验,UⅡ10-9及10-8mol·L-1组细胞增殖率明显高于对照组(P<0.05),UⅡ10-10及10-7mol·L-1组细胞增殖率与对照组比较差异无显著性(P>0.05);流式细胞术实验,UⅡ10-9及10-8mol·L-1组MC细胞周期中S期比例较对照组明显增加(P<0.05),UⅡ10-10及10-7mol·L-1组MC细胞周期中S期的比例与对照组比较差异无显著性(P>0.05);BrdU-ELISA实验,UⅡ10-9及10-8mol·L-1组MC培养上清中BrdU含量明显低于对照组(P<0.05),UⅡ10-10及10-7mol·L-1组MC培养上清中BrdU含量与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:10-9及10-8mol·L-1浓度的UⅡ对体外高糖培养的大鼠肾小球MC具有明显促增殖作用。
- 赵岩李才林风武田琳李相军石艳苗春生
- 关键词：肾小球系膜细胞细胞培养细胞增殖
- 尾加压素Ⅱ及其受体在大鼠肾成纤维细胞中的表达及银杏叶的干预作用被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠肾间质成纤维细胞尾加压素Ⅱ(UⅡ)及其受体(GPR14)表达的影响和银杏叶(GBE)的干预作用。方法:体外培养大鼠肾成纤维细胞,以未处理细胞作为正常对照组,以AngⅡ作为刺激因素,分别加入终浓度为0、25、50、100和200g·L-1的GBE,RT-PCR检测各组细胞UⅡ及GPR14 mRNA表达,免疫印迹法检测各组细胞UⅡ及GPR14蛋白含量,ELISA法检测培养上清中Ⅰ型胶原(ColⅠ)含量。结果:AngⅡ组UⅡ、GPR14表达量及培养上清中ColⅠ含量明显高于正常对照组(P<0.01),与AngⅡ刺激组比较,AngⅡ+GBE组UⅡ及GPR14的mRNA表达量下降(P<0.01),蛋白含量减少(P<0.01或P<0.05),培养上清中ColⅠ含量明显降低(P<0.01或P<0.05)。结论:GBE可抑制AngⅡ诱导的肾间质成纤维细胞UⅡ及受体mRNA表达,降低其蛋白含量,减少细胞外基质ColⅠ分泌。
- 王丹李才李相军石艳苗春生
- 关键词：GPR14成纤维细胞
- 关木通对大鼠肾功能和组织病理学的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:观察大鼠关木通灌胃后肾功能及肾脏组织病理学改变。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照组和模型组。模型组在给予关木通3、7和15 d时,采血并留取24 h尿液,分别检测血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白及尿视黄醇结合蛋白(RBP);在上述时间点观察肾脏组织病理学改变,并与对照组对比。结果:①与对照组比较,模型组大鼠给予关木通后不同时间血肌酐、尿素氮及24 h尿蛋白排泄率无明显升高;与对照组比较,尿RBP含量给药后3 d即显著增加(P<0.01),并随着给药时间的延长持续升高。②模型组大鼠给药后3 dHE染色可见局部肾小管上皮细胞变性、坏死和崩解,并随给药时间的延长逐渐加重。结论:关木通致大鼠肾损伤的主要病理改变为肾小管上皮细胞变性、坏死。
- 魏春利西月李才苗春生曲锐李立国
- 关键词：关木通
- 尾加压素Ⅱ和组织型转谷氨酰胺酶在大鼠肾间质纤维化组织中的表达及意义被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)和组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在大鼠肾间质纤维化组织中的表达及意义,为进一步明确UⅡ致纤维化的机制提供实验依据。方法:雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(n=8)和模型组(n=8),采用左侧输尿管结扎术制备肾间质纤维化模型。术后第2周末处死各组大鼠。采用HE和Masson染色观察肾组织病理学改变;采用免疫组化法检测肾间质中UⅡ、tTG和纤维连接蛋白(FN)的表达;采用RT-PCR技术检测UⅡ和tTG mRNA的表达水平。结果:HE和Masson染色可见,模型组大鼠肾间质增宽,胶原纤维明显增生。免疫组化显示,假手术组大鼠UⅡ、tTG和FN在肾小管、肾间质区有少量表达,肾小球内除UⅡ有微量表达外,tTG和FN无阳性表达;模型组大鼠UⅡ、tTG和FN在肾小管和肾间质区的表达信号较假手术组明显增强(P<0.01),模型组大鼠UⅡ的蛋白表达与FN的蛋白表达呈正相关关系(r=0.724,P<0.05)。模型组UⅡ和tTG的基因表达明显高于假手术组(P<0.05),模型组大鼠肾内UⅡ基因和蛋白表达与tTG基因和蛋白表达均呈正相关关系(r=0.647,P<0.05;r=0.787,P<0.01)。结论:UⅡ和tTG可能共同参与肾间质纤维化,UⅡ的致纤维化作用可能部分是通过tTG的活化而实现的。
- 曲萌王丹李才李相军苗春生李蕴潜
- 关键词：组织型转谷氨酰胺酶单侧输尿管结扎肾纤维化
- 银杏叶片对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的保护作用被引量：6
- 2007年
- 目的:研究银杏叶片对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏的保护作用。方法:Wistar大鼠随机分为假手术组、UUO模型组、苯那普利组及银杏叶片组,于给药后2周和4周分别测定各组大鼠肾脏指数、左右肾重比、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)酶活性、尿液尿素氮、尿肌酐、血尿素氮、血肌酐及24 h尿蛋白排泄量等指标。结果:给药后2周,银杏叶组大鼠NAG酶活性[(18.0±5.4)U.L-1]、血尿素氮[(7.3±1.3)mmol.L-1]、血肌酐[(35.2±8.4)μmol.L-1]及24 h尿蛋白排泄量[(9.82±4.42)mg]均明显低于模型组(P<0.05);给药后4周,银杏叶片组大鼠NAG酶活性[(10.3±4.1)U.L-1]、血尿素氮[(8.7±0.9)mol.L-1]、血肌酐[(44.2±6.7)μmol.L-1]及24 h尿蛋白排泄量[(10.17±8.42)mg]均较模型组明显降低(P<0.05);给予银杏叶片能减轻UUO大鼠肾间质纤维化程度。结论:口服银杏叶片对UUO大鼠肾功能和结构具有明显保护作用。
- 李相军李才孙广东苗春生孙波
- 关键词：银杏叶输尿管梗阻纤维化
- 尾加压素Ⅱ对大鼠近端肾小管上皮NRK-52E细胞增殖和细胞周期的影响被引量：3
- 2008年
- 目的探讨尾加压素Ⅱ（UⅡ）对大鼠近端肾小管上皮NRK-52E细胞增殖和细胞周期的影响及其机制。方法在NRK-52E细胞培养液中加入10^-10、10^-9、10^-8和10^-7mol/L UⅡ,同时设UⅡ活性阻断组：UⅡ＋尼卡地平和UⅡ＋EDTA,以单纯DMEM为对照组。培养48 h后,采用5-溴-2′-脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）掺入法检测各组细胞的增殖活性,流式细胞术分析细胞周期。结果UⅡ（10^-10-10^-8mol/L）以浓度依赖方式促进NRK-52E细胞BrdU掺入（A值分别为0.491±0.038、0.291±0.024和0.281±0.037）,其中以10-8mol/L UⅡ的作用最明显,10^-7mol/L UⅡ对NRK-52E细胞增殖的影响与对照组比较差异无显著意义。UⅡ影响NRK-52E细胞周期,在10^-10-10^-8mol/L浓度范围内增加S期细胞百分比（分别为26.96%±3.35%、44.26%±3.28%、48.12%±2.22%）。尼卡地平和EDTA均可以降低UⅡ诱导NRK-52E细胞的BrdU掺入增加,降低S期细胞百分比。结论UⅡ具有较强促进NRK-52E细胞增殖的作用,但大剂量则无此作用,其诱导NRK-52E细胞增殖作用部分是通过Ca^2＋内流来介导的。
- 田琳李才赵岩于晓艳苗春生
- 关键词：细胞增殖细胞周期NRK-52E细胞
- 糖基化终产物对大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E尾加压素ⅡmRNA表达的影响被引量：2
- 2007年
- 目的探讨晚期糖基化终产物(AGEs)对大鼠近端肾小管上皮细胞NRK-52E尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)mRNA表达及对细胞外基质(ECM)合成的影响。方法在培养大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E中,分别加入不同浓度的糖化牛血清白蛋白(AGE-BSA)及其对照物牛血清白蛋白(BSA)进行刺激,ELISA法检测培养上清中纤连蛋白(FN)及Ⅳ型胶原(CollagenⅣ)含量,RT-PCR检测细胞UⅡ mRNA表达。结果与加入BSA组比较,AGE-BSA组UⅡmRNA表达以时间和剂量依赖方式明显增加(P<0.05),培养上清中FN及ColⅣ含量也明显增加(P<0.05),与UⅡmRNA表达量呈正相关(r=0.922,0.878)。结论AGEs能明显诱导大鼠肾小管上皮细胞UⅡmRNA表达,促进FN和ColⅣ分泌,提示UⅡ可能在AGEs引起的ECM合成增加中起一定作用,进而参与糖尿病肾病ECM积聚的病理过程。
- 田琳李才于晓艳苗春生
- 关键词：糖基化终产物糖尿病肾病
- 尾加压素Ⅱ对体外高糖培养大鼠肾小球系膜细胞周期的影响被引量：2
- 2008年
- 目的观察尾加压素Ⅱ(UⅡ)对体外高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞周期的影响。方法体外高糖培养大鼠肾小球系膜细胞,加入不同浓度的UⅡ(10-7、10-8、10-9和10-10mol/L),37℃孵育24h,用碘化丙啶染色流式细胞术分析肾小球系膜细胞周期分布。结果UⅡ对体外高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞有明显的促增殖作用,表现为细胞周期S期比例增加,以浓度为10-8mol/L时最明显。Ca2+阻断剂尼卡地平、Ca2+螯合剂EDTA及抗UⅡ抗体能明显抑制其促增殖作用。结论UⅡ能提高体外高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞S期DNA合成速率,提示UⅡ对其具有明显的促增殖作用。
- 赵岩李才林风武田琳
- 关键词：系膜细胞细胞周期糖尿病肾病
