国家自然科学基金(30400251)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 体外诱导小鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化相关基因表达的研究被引量：3
- 2006年
- 目的体外培养小鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)诱导分化为成骨细胞,定量分析其骨生成关键标志基因的表达水平。方法体外培养小鼠BMSCs 7、14、21 d,提取细胞总RNA,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPIN)和骨唾液酸蛋白(BSP)基因的表达水平。结果小鼠BMSCs体外稳定增殖和分化,Ⅰ型胶原培养14 d和21 d mRNA水平分别是培养7 d时的0．75±0．04倍和(0．34±0．03)倍;ALP、OPN和BSP基因表达水平随着培养时间延长而上升,其中培养21 d时的ALP、OPN和BSP mRNA水平分别是培养7 d时的(19．70±2．36)倍、(150．12±9．31)倍和(7．73±0．58)倍。结论荧光定量RT-PCR可以灵敏地检测成骨细胞关键标志基因表达水平,随着培养时间延长,Ⅰ型胶原的表达水平逐渐下降,而ALP、OPN和BSP的表达水平显著上升。
- 王琳刘德瑜石心泉裴开颜李东贾孟春
- 关键词：骨髓基质干细胞
- 人骨髓基质细胞向成骨细胞分化过程中差异表达基因的筛选被引量：1
- 2006年
- 为了探讨人骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)向成骨细胞分化过程中差异表达的基因,本实验采用体外培养人BMSCs,诱导向成骨细胞分化。分别选取培养12和21 d的细胞作为驱动方(driver)和实验方(tester),进行抑制消减杂交,构建cDNA消减文库,将挑选出的阳性克隆与GenBank人基因库中已公布的核酸序列进行同源性比较分析。结果表明．从培养21 d的BMSCs中,筛查出5个差异基因,与人基因库中已知基因的同源性分别达到90%以上。有兴趣的是,核心蛋白聚糖和Bax inhibitor 1在培养21 d的BMSCs中差异表达。RT-PCR检测显示,核心蛋白聚糖基因在培养21 d的细胞中高表达,而在12 d的细胞中未检测到表达；Bax inhibitor 1基因在培养21 d细胞中的表达明显高于12 d的细胞。
- 刘美玲石心泉周万灏刘洪文李东贾孟春
- 关键词：骨髓基质细胞成骨细胞核心蛋白聚糖基因
