中国博士后科学基金(20080440778)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：陈艳娜王俊伟张巨峰牟艳芳卢彦欣更多>>
- 相关机构：深圳北京大学香港科技大学医学中心广东药学院内蒙古医学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 携带HSV-1TK基因的逆转录病毒载体构建及在HeLa细胞中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的:构建携带单纯疱疹病毒脱氧胸腺嘧啶激酶基因(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)的逆转录病毒,用于宫颈癌的治疗研究。方法:用限制性内切酶从质粒pcDNA3.1/HA-myc-His(-)Z-TK切下HSV-1TK cDNA序列,亚克隆入逆转录病毒载体pLXSN得到重组质粒pLXSN-TK,鉴定正确的阳性重组质粒经PA317细胞包装,G418筛选,在NIH3T3细胞进行病毒滴度测定。然后用病毒感染人宫颈癌细胞HeLa。PCR、RT-PCR和Western blotting方法检测HSV-1TK基因在HeLa中的整合和表达情况。结果:重组质粒pLXSN-TK经PA317细胞包装后收获病毒上清,感染HeLa细胞,检测发现HSV-1TK基因整合到细胞基因组DNA中,并且能有效的转录和翻译。结论:成功构建了逆转录病毒pLXSN-TK,该病毒能有效感染HeLa细胞,并使携带的治疗基因HSV-1TK在细胞中表达,为今后HSV-1TK基因治疗宫颈癌的研究奠定基础。
- 张巨峰樊东升张超卢彦欣王俊伟牟艳芳陈艳娜万峻
- 关键词：逆转录病毒宫颈癌
- 人IL-12重组逆转录病毒载体在HeLa细胞中的表达
- 2010年
- 目的:包装携带人白细胞介素12(IL-12)的逆转录病毒,用于宫颈癌的治疗研究。方法:携带IL-12的逆转录病毒重组质粒pL35P40SN经PA317细胞包装,G418筛选,在NIH3T3细胞进行病毒滴度测定。然后用病毒感染人宫颈癌细胞HeLa。PCR、RT-PCR方法检测IL-12基因在HeLa中的整合和表达情况。结果:重组质粒pL35P40SN经PA317细胞包装后收获病毒上清,感染HeLa细胞,检测发现IL-12基因整合到细胞基因组DNA中,并且能有效的转录。结论:成功包装了携带IL-12基因的逆转录病毒,该病毒能有效感染HeLa细胞,并使携带的基因IL-12在细胞中表达,为今后IL-12基因治疗宫颈癌的研究奠定基础。
- 张巨峰陈艳娜张文峰王俊伟牟艳芳黄树林
- 关键词：IL-12基因逆转录病毒宫颈癌
