宁夏回族自治区科技厅科技攻关项目(Z2006-1-75001)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：李敏赵东马春骥王玉炯张旭强更多>>
- 相关机构：宁夏大学宁夏医科大学更多>>
- 发文基金：宁夏回族自治区科技厅科技攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 绵羊肺炎支原体Y98株未知基因Hsp70(DnaK)的克隆被引量：6
- 2011年
- 绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)是绵羊传染性胸膜肺炎(Contagious ovine pleuropneumo-nia)的主要致病菌。热休克蛋白Hsp70也叫(DnaK),具有分子伴侣和免疫的作用。本试验以MO Y98基因组为模板,通过比对15种支原体Hsp70基因的序列并设计简并引物,分别利用同源克隆和染色体步移—Tail-PCR技术克隆到了四段Hsp70(DnaK)基因片断并进行了核苷酸序列测定。利用序列拼接软件对克隆的四段序列进行序列拼接,通过ORF Finder软件分析出了MO Y98的Hsp70的开放式阅读框架,预测分析该基因是由1 815bp组成,编码604个氨基酸。本试验于国内外首次克隆到了MO的Hsp70基因序列,为MO的抗原研究以及Hsp70的功能研究等奠定了基础。
- 马春骥李敏赵东王玉炯
- 关键词：绵羊肺炎支原体HSP70同源克隆TAIL-PCR
- 运用均匀设计法优化pST1-K99在原核系统中的表达
- 2009年
- 运用均匀设计法,对影响pST1-K99在大肠杆菌中表达的因素进行了优化,摸索出了对周质蛋白进行诱导表达的最佳条件,即pH=6.0,装液量30 mL,IPTG终浓度0.484 mmol/L,IPTG诱导时间6 h,诱导温度34℃.在此条件下,所表达的目的蛋白的平均密度从0.14提高到0.20,比优化前提高了43%.
- 赵辉李敏王玉炯
- 关键词：均匀设计
- 绵羊肺炎支原体与猪肺炎支原体交叉抗原研究被引量：4
- 2011年
- 为了研究绵羊肺炎支原体标准株Y98与猪肺炎支原体标准株232全菌蛋白免疫原性的异同,试验采用SDS-PAGE和免疫印迹分析技术对其进行了研究,结果表明:绵羊肺炎支原体标准株Y98同猪肺炎支原体标准株232免疫印迹结果基本一致,在70,50,40,25 ku蛋白带处存在共同抗原。
- 赵东马春骥李敏陈晓虎张旭强王红燕
- 关键词：绵羊肺炎支原体猪肺炎支原体抗原免疫印迹分析
