国家科技重大专项(2001BA804A30-11)
- 作品数:45 被引量:344H指数:11
- 相关作者:崔保安陈红英魏战勇李新生张红英更多>>
- 相关机构:河南农业大学河南省动物性食品安全重点实验室南京农业大学更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项河南省科技攻关计划河南省杰出人才创新基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 怀牛膝多糖对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响
- 多糖是一种新型免疫增强剂,且具有天然、低毒、无药物残留的优点,能保障动物源食品的安全,日益受到兽医学界研究者的关注。本试验将牛膝多糖(achyranthes bidentata polysaccharide,ABPS)配...
- 张红英邱妍胡元亮王林青崔保安
- 关键词:鸡新城疫疫苗高剂量抗体效价免疫效果
- 文献传递
- 传染性喉气管炎病毒河南株ILTV-CG GX基因的克隆与序列分析被引量:2
- 2007年
- 根据GenBank中收录的鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)GX基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,应用PCR技术扩增ILTV河南株(ILTV-CG)GX基因。将ILTV-CG接种10日龄鸡胚,提取ILTV基因组DNA进行PCR扩增。将回收的PCR产物与pGEM-T Easy载体进行连接,转化JM109感受态细胞,经蓝白斑筛选,对菌液PCR和酶切鉴定为阳性的菌株进行测序。测序结果表明,所克隆的GX基因全长为950 bp,含有一个开放阅读框,编码299个氨基酸的多肽。推导的氨基酸有4个潜在的N-糖基化位点,有11个与二硫键形成有关的半胱氨酸。序列分析表明,克隆的ILTV-CGGX基因与GenBank中发表的ILTV-SA2株GX基因核苷酸同源性为97.2%,变异点为第124位插入1个碱基G,第136位又插入2个碱基C,从而引起该毒株GX基因推导的氨基酸序列在第33位插入1个亮氨酸,还存在多处氨基酸发生变化,氨基酸同源性为95.3%。GX基因的成功克隆为构建ILTVGX基因缺失的病毒活载体奠定基础。
- 陈红英崔保安李新生杨明凡赵丽方剑玉
- 关键词:传染性喉气管炎病毒聚合酶链反应
- 一例鸡鼻气管炎的诊断与治疗
- 2008年
- 贾艳艳崔保安陈红英郭显坡郭小参吕晓丽冯利霞
- 关键词:鼻气管炎鸡群呼吸道疾病产蛋率下降鼻气管鸟杆菌
- 山药多糖研究进展被引量:36
- 2006年
- 张红英赵现敏崔保安
- 关键词:山药多糖化学结构药理作用
- 猪细小病毒不同代次VP2基因序列差异分析被引量:1
- 2009年
- 将猪细小病毒NJ-1株在PK-15细胞上传代到35代,利用PCR及序列测定对01代、07代、14代、21代、28代及35代的VP2序列进行了测定,并推导出相应的氨基酸序列;通过对不同代次的毒株核苷酸及氨基酸序列之间的差异性进行了分析。结果表明,不同代次之间具有高度的同源性,其中核苷酸及氨基酸序列同源性分别为99.7%-100.0%、99.2%-100.0%,核苷酸的差异呈现有一定的规律性,随着代次之间的间隔增大其差异也相应增加,但氨基酸序列差异不明显,猪细小病毒核酸呈现较强遗传稳定性。
- 魏战勇王学斌李明风张红英陈红英杨明凡崔保安
- 关键词:猪细小病毒同源性
- 猪圆环病毒病的PCR诊断与防制被引量:3
- 2008年
- 根据GenBank发表的猪圆环病毒AF027217基因序列,设计、合成一对特异性引物,对疑似感染猪圆环病毒的患病猪的血液及病死仔猪内脏组织进行了PCR扩增,检测结果为阳性。并对猪场采取综合防制措施,取得较好效果。
- 王东方崔保安陈红英魏站勇吕晓丽管倩郭小参赵丽
- 关键词:猪圆环病毒PCR防制
- IL-2与猪细小病毒VP_2基因双表达载体的构建及免疫原性的研究被引量:16
- 2006年
- 将白细胞介素-2基因和猪细小病毒VP2基因主要抗原区克隆至pCI-neo真核表达载体中,构建了pCIneo-IL2-VP2重组质粒,用脂质体将其转染到PK-15细胞中,利用免疫荧光方法检测在体外表达情况。并以小鼠为动物模型,将pCIneo-IL2-VP2重组质粒、对照组pCI-neo和猪细小病毒活疫苗通过肌肉注射进行免疫,检测免疫小鼠的淋巴细胞转化功能,特异性CTL杀伤活性和血清抗体滴度。结果显示,pCIneo-IL2-VP2在体外能够诱导PK-15细胞表达VP2蛋白,小鼠注射pCIneo-IL2-VP2质粒1周后能够诱导机体产生抗体,4周时达到峰值,与活疫苗对照组产生的抗体滴度、诱导T淋巴细胞增殖和诱导强的细胞毒性基本一致。试验表明,构建的pCIneo-IL2-VP2能够有效诱导机体产生体液免疫和细胞免疫。
- 崔保安魏战勇王学斌黄克和金喜新董振杰郑兰兰
- 猪伪狂犬病病毒单抗双夹心ELISA的构建被引量:11
- 2004年
- 建立了检测猪伪狂犬病病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)的单克隆抗体双夹心酶联免疫吸附试验(Enzyme linkedimmunosor bentassay,ELISA)方法,为该病的快速诊断奠定了基础.作者对其组装条件进行了筛选,认为兔抗PRVIgG最佳包被质量浓度为4.59mg·L-1;抗PRV的单克隆抗体(Monoclonalantibodies,McAb)的最佳质量浓度为6.45mg·L-1;最佳封闭剂为10g·L-1BSA(牛血清白蛋白),封闭时间为60min,制定了科学的结果判定标准,最低病毒检出量为200μg·L-1.与病毒分离、动物试验和中和试验相比较,该方法特异、灵敏、可靠、方便.
- 祁小乐崔保安牛春玲王莉娟刘占通
- 关键词:伪狂犬病病毒双夹心ELISA单克隆抗体
- 板蓝根多糖对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响被引量:24
- 2008年
- 150只14日龄蛋公鸡随机均分成3组,用新城疫传染性支气管炎二联(Newcastle disease-infectious bronchi-tis,ND-IB)弱毒苗点眼滴鼻免疫的同时,2个试验组分别肌肉注射高、低剂量的板蓝根多糖(Isatis root polysaccha-ride,IRPS)溶液,对照组注射生理盐水,每天注射1次,连续注射3次。分别于免疫后7、14、21、28、354、2 d各组随机抽取8只鸡翼下静脉采血,分离血清,用微量法测定新城疫血凝抑制(HI)抗体效价;于免疫后10、20、30、40、50 d每组随机抽取5只鸡心脏采血,分离淋巴细胞,用流式细胞仪双染色法检测CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞含量,并放血致死称取体质量和胸腺、脾脏、法氏囊的质量,计算器官指数。结果表明,板蓝根多糖高、低剂量组的HI抗体效价、CD4+/CD8+比值和免疫器官指数均明显高于对照组;提示板蓝根多糖对新城疫疫苗的免疫效果有明显的增强作用。
- 邱妍胡元亮董发明崔保安张红英
- 关键词:板蓝根多糖新城疫疫苗T淋巴细胞免疫器官
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒河南分离株ORF5基因的克隆与变异分析被引量:23
- 2007年
- 从河南郑州、新乡、周口不同地区猪场的急性病猪中分离到3株猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproduc-tive and respiratory syndrome virus,PRRSV),分别命名为PRRSV Hn-1/06、PRRSV Hn-2/06和PRRSV Hn-3/06,细胞中和试验证实其血清型与美洲型一致。利用RT-PCR方法克隆了它们的ORF5基因,并对其基因序列和推导的氨基酸序列与7个不同来源的PRRSV毒株进行了同源性和亲缘关系比较分析,结果表明,3个分离株之间的ORF5基因及其推导的氨基酸均同源性均大于95.5%;与VR-2332标准北美洲株和疫苗株RespPRRS MLV间的同源性均低于与中国CH-1a毒株,而与流行的欧洲株间的同源性均低于54.5%。同时对推导氨基酸序列与6个北美洲型PRRSV株进行变异分析比较,证实其推导氨基酸序列发生了变异,特别是中和位点处第39位明显不同,表明河南省流行的PRRSV为北美洲型的变异株。
- 周海范夏平安崔保安柴春霞张红英杨霞
- 关键词:PRRSVORF5基因