国家高技术研究发展计划(2002AA213021)
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
- 相关作者：曹毅乔代蓉王小行陈放魏亮更多>>
- 相关机构：四川大学四川川大光耀生物工程有限公司四川师范大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 产甘油酵母菌株的分离与鉴定被引量：6
- 2003年
- 针对西部极端微生物资源开发,从川西北高寒草地野生花粉中分离耐高渗的酵母菌株.通过采用形态和生理生化试验对分离出的3株编号为SCU 1、SCU 2、SCU 3的酵母菌株进行鉴定,初步鉴定3个菌株为:粉状毕赤酵母(Pichiafarinosa)、克鲁丝假丝酵母(Candidakru sei)、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae).通过对3株酵母菌株的产甘油鉴定结果显示,耐高渗粉状毕赤酵母可通过产生甘油适应外界渗透压变化.
- 乔代蓉曹毅魏亮廖光伟杨滔
- 关键词：酵母甘油
- 麻疯树脂酶全长基因克隆、表达及其蛋白质结构预测被引量：7
- 2006年
- 脂酶(Lipase,EC3.1.1.3)是普遍应用于皮革、饲料及生物柴油工业的工业酶制剂,具有广泛的应用价值。目前对植物来源的脂酶研究较少。本研究用在生物柴油中具有应用前景的油料植物——麻疯树(Jatrophacurcas)作为研究对象,克隆了该物种的脂酶基因(JcLIP)。通过多序列比对并结合物种的亲缘关系设计了具有较高特异性的简并引物,通过使用RT-PCR和RACE技术,最终获得了麻疯树脂酶基因的全长序列并成功地在大肠杆菌中表达,酶活测定结果表明,麻疯树脂酶在大肠杆菌中表达在包涵体中,但是能产生具有活力的蛋白质,酶活约为0.8U.mL-1。结构预测和比较表明,JcLIP蛋白质具有脂酶的结构核心和催化活性中心,而在非核心区具有较毛霉脂酶更多的插入和随机卷曲,这可能是决定二者之间酶活差异的重要原因。
- 王小行彭峰牛冬云李钢陈放
- 关键词：脂酶麻疯树蛋白质结构
- 盐生杜氏藻Ugd基因的cDNA克隆及序列分析被引量：4
- 2004年
- 作者对不同物种Ugd基因的同源序列进行相似性分析后设计一对兼并引物,利用RT PCR技术获得一条200bp左右的片段,测序分析显示其同芋头(Colocasiaesculenta)的Ugd基因的编码区有71.7%的相似性.然后再以此片段为模板设计引物,通过RACE技术获得盐生杜氏藻Ugd基因的全长序列.经克隆测序作blastx分析发现其同芋头(Colocasiaesculenta)、大豆(Soybean)、水稻(Oryzasativa)、拟南芥(Arabidopsisthaliana)的Ugd基因有78%到81%的同源性.
- 李音乔代蓉易弋贺庆华李良孙辉曹毅
- 关键词：同源克隆RACE
- 盐藻GPDH基因的载体构建及在烟草中的表达
- 2004年
- 作者用冻融法,将构建有盐藻3 磷酸甘油脱氢酶基因的植物高效表达载体DsGPDH导入感受态的根癌农杆菌EHA105中.叶盘法转化烟草,在含卡那霉素的MS培养基上进行选择性培养,生根率达到80%.用PCR的方法对再生苗进行了初步筛选,阳性率约为50%.对PCR阳性苗,进行RT PCR分析,证实整合到烟草基因组中的GPDH基因表达产生了mRNA.
- 张华乔代蓉白林含张庆莲邓雪柯曹毅
- 关键词：盐藻转基因烟草
- 盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶基因克隆及其蛋白质结构预测被引量：2
- 2006年
- 本文通过对盐生杜氏藻(Dunaliellasalina)cDNA文库进行大规模EST测序并结合RACE实验克隆了盐生杜氏藻3-磷酸甘油脱氢酶基因,并且通过Southernblotting实验确定了该基因在这个物种中拷贝数。通过生物信息学的方法,预测该基因所编码的蛋白质结构,验证了该蛋白质具有3-磷酸甘油脱氢酶完整的功能性结构域和磷酸水解酶类结构域。本实验为解释盐生杜氏藻在面临高渗胁迫下快速合成甘油的机制提供了帮助。
- 李钢邓运涛任刚杨滔王小行
- 关键词：3-磷酸甘油脱氢酶结构域盐生杜氏藻
