山东省自然科学基金(ZR2010CM034)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 相关作者：赵法茂王宪泽李运祥刘正帅贾晓更多>>
- 相关机构：泰山学院山东农业大学泰安市科学技术协会更多>>
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- 小麦籽粒淀粉分支酶同工酶结构组成及时空表达
- 2014年
- 为阐明小麦支链淀粉合成的酶学机制,以8个小麦品种的籽粒为材料,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Native-PAGE）和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定SBE同工酶类型、时空表达谱及亚基组成,分析SBE同工酶空间分布特点和器官表达特异性。共检测到4种SBE同工酶,其中B和SBEⅡa分布在胚乳和叶片中,而A和Di专一定位于胚乳中。在小麦籽粒灌浆过程中,Di和SBEⅡa首先表达,而后是B,A最后表达;至灌浆末期,B和SBEⅡa停止表达。SBE同工酶都是单亚基酶,均由一条86-92 kD的多肽链组成。SBE同工酶的空间分布具有器官特异性,并在籽粒发育进程中顺序表达。Di、B和SBEⅡa是占主导地位的SBE同工酶,可能是决定SBE总酶活性的主效应酶,在籽粒和叶片支链淀粉合成中起关键作用。
- 刘正帅刘贵芬杨明煜贾晓李运祥赵法茂
- 关键词：小麦淀粉分支酶支链淀粉
- 大杯蕈子实体多糖提取优化及抗氧化活性分析
- 2014年
- 探析大杯蕈子实体多糖的适宜提取条件,明确其抗氧化活性.以大杯蕈子实体为材料,利用Plackett-Burman(PB)实验和响应面分析法(RSM)优化子实体多糖(FPS)的分离提取条件;以总还原力、羟基自由基、超氧阴离子自由基和二苯代苦味肼(DPPH)自由基为指标,测定FPS抗氧化活性.结果表明,FPS最佳提取条件是乙醇倍数3.55,醇沉时间28.77 h,提取次数2.57次,FPS理论得率是2.549%.为操作方便,调整为乙醇倍数3.6,醇沉时间29h,提取次数3.00,在此条件下,多糖的理论得率是2.329%,实际得率为2.015%.当FPS浓度为5000μg/mL时,大杯蕈子实体多糖的总还原力为0.629,对于羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH的清除率分别为27.19%、60.101%和69.7%.随着FPS浓度的增加,其还原力逐渐增强,对羟基自由基、超氧阴离子自由基和DPPH的清除率也逐渐增大,证明大杯蕈子实体多糖具有潜在的抗氧化活性.
- 张晨赵法茂胡春龙刘正帅刘贵芬贾晓
- 关键词：大杯蕈体外抗氧化活性
- 小麦籽粒异淀粉酶聚合体的结构及酶学性质
- 2011年
- 【目的】阐明小麦淀粉去分支酶(Debranching enzyme,DBE)的结构和酶学特性,为品质改良提供理论依据。【方法】以小麦品种糯麦2号为材料,利用硫酸铵分级沉淀、超滤、阴离子交换柱层析和葡聚糖凝胶层析法对异淀粉酶(Isoamylase,ISA)同工酶聚合体进行分离纯化,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对ISA聚合体的结构和组成成分进行分析。【结果】小麦籽粒胚乳中异淀粉酶(ISA)形成2种不同聚合体,即ISA1同源四聚体和由4个ISA1与1个ISA2组成的异源五聚体,分子量分别约为320 kD和380 kD。ISA1同源四聚体的最适催化温度为30℃,40℃处理10 min后完全失去活性;ISA1/ISA2异源五聚体的最适温度为35℃,50℃处理10 min后仍有50%的活性。纯化后的ISA1和ISA2进行Native-PAGE检测证明,ISA2单独存在没有催化活性,将ISA2加入到ISA1中可检测到与ISA1/ISA2异源聚合体相同的ISA活性。【结论】小麦胚乳中存在2种形式的ISA多亚基聚合体;在40℃和50℃高温条件下,ISA1/ISA2异源聚合体的热稳定性高于ISA1同源聚合体;ISA2可显著增强ISA1聚合体的酶活性,可能在支链淀粉合成中起关键作用。
- 赵法茂齐霞张天英李天骄毕建杰王宪泽
- 关键词：小麦热稳定性
- 小麦腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶同工酶类型及时空表达分析被引量：3
- 2013年
- 以9个小麦品种为材料,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Native-PAGE）和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定ADP-葡萄糖焦磷酸化酶（AGP）同工酶类型、表达数量及亚基组成,分析AGP同工酶空间分布特点和器官表达特异性。结果表明：（1）小麦植株中共表达6种AGP同工酶,即AGPp、AGPs、AGPe1、AGPe2、AGPe3和AGPe4。（2）AGPp分布在种皮中,AGPs分布在种皮与叶片中,而AGPe1、AGPe2、AGPe3和AGPe4专一在胚乳中表达;在小麦籽粒灌浆过程中,AGPe1首先表达,AGPe2和AGPe3紧随其后,AGPe4最后表达。（3）AGP各同工酶均由大、小2个亚基组成,小亚基分子量为50 kD左右,大亚基分子量在51～54 kD之间。（4）AGP同工酶空间分布具有器官特异性,并在籽粒发育进程中顺序表达;AGPe3、AGPe1和AGPe2是占主导地位的AGP同工酶,且可能是决定AGP总酶活性的主效应酶,在灌浆后期籽粒淀粉合成中起关键作用。
- 赵法茂岳向文杨红花肖军李运祥王宪泽
- 关键词：小麦同工酶
