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艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项(2011ZXl0004-001)

作品数：1 被引量：3H指数：1
相关作者：段希洁耿合员杨扬陆柔剑谭文杰更多>>
相关机构：中国疾病预防控制中心更多>>
发文基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇新冠状病毒
  • 1篇冠状
  • 1篇冠状病毒
  • 1篇冠状病毒属
  • 1篇核酸
  • 1篇核酸类
  • 1篇分子
  • 1篇分子诊断
  • 1篇分子诊断技术
  • 1篇病毒

机构

  • 1篇中国疾病预防...

作者

  • 1篇周为民
  • 1篇谭文杰
  • 1篇陆柔剑
  • 1篇杨扬
  • 1篇耿合员
  • 1篇段希洁

传媒

  • 1篇中华实验和临...

年份

  • 1篇2012
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
2012年发现的新冠状病毒分子检测方法的建立与探针优化被引量：3
2012年
目的建立2012年确定的新冠状病毒的分子检测方法，并筛选优化引物与探针。方法依据最先发表的208bp长的新冠状病毒1b片段核酸序列，比对分析后设计合成常规RT—PCR引物1对及荧光定量RT—PCR引物1对与TaqMan探针2条（TZl，TZ2），同时合成锁核酸修饰的TaqMan探针2条（LNA-TZl，LNA-TZ2）。建立检测新冠状病毒感染的常规RT—PCR方法与4种荧光定量RT—PCR，分析比较其灵敏度与特异性，同时参照欧洲发表的2种荧光定量RT—PCR引物与探针对（upE，ORFlb）建立相应方法，以合成的阳性模板比较6对荧光定量RT—PCR引物与探针的检出灵敏度。结果所合成的常规RT—PCR与荧光定量RT—PCR引物与探针皆有较好特异性，不能扩增其他人冠状病毒模板及常见呼吸道病毒模板，检出下限达50～500拷贝／反应。锁核酸修饰TaqMan探针可改善荧光定量PCR检测方法的反应性能，经锁核酸修饰的TaqMan探针与常规TaqMan探针相比，检出率提高10倍左右，其中LNA—TZl与upE探针对具最佳反应性能。结论本研究所建立的常规RT—PCR与荧光定量RT—PCR可用于新冠状病毒的分子检测，并推荐使用LNA—TZl与upE探针对。本研究为新冠状病毒分子检测方法应用与改进奠定了基础。
周为民陆柔剑耿合员李辉段希洁杨扬谭文杰
关键词：冠状病毒属分子诊断技术核酸类
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