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海南省重点科技项目(06102)

作品数：5 被引量：17H指数：2
相关作者：王凤阳杜丽祁超张巍成鹰更多>>
相关机构：海南大学华中师范大学更多>>
发文基金：海南省重点科技项目海南省教育厅高等学校科学研究项目国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 4篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 2篇克隆
  • 2篇CDNA
  • 1篇底物
  • 1篇血白细胞
  • 1篇胰岛
  • 1篇胰岛素
  • 1篇胰岛素受体
  • 1篇胰岛素受体底...
  • 1篇原核表达
  • 1篇受体
  • 1篇外周
  • 1篇外周血
  • 1篇外周血白细胞
  • 1篇细胞
  • 1篇结构域
  • 1篇克隆与序列分...
  • 1篇白细胞
  • 1篇PH结构域
  • 1篇SMART技...
  • 1篇CDC42

机构

  • 5篇海南大学
  • 4篇华中师范大学

作者

  • 5篇杜丽
  • 5篇王凤阳
  • 4篇祁超
  • 3篇刘涛
  • 3篇满初日嘎
  • 3篇张巍
  • 3篇成鹰
  • 2篇李治深
  • 2篇林杰材
  • 2篇申明霞
  • 2篇吴科榜
  • 2篇张莉娜
  • 1篇张艳
  • 1篇陈品林
  • 1篇张冬琳
  • 1篇许兆艳
  • 1篇雷明

传媒

  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇生物技术
  • 1篇海南大学学报...
  • 1篇华南热带农业...
  • 1篇中国畜牧兽医

年份

  • 1篇2011
  • 2篇2009
  • 1篇2008
  • 1篇2007
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
海南黄牛外周血白细胞cDNA文库的构建被引量：4
2007年
运用SMART(Switching Mechanism at 5'end of RNA Transcript)技术构建海南黄牛外周血白细胞cDNA文库。采用RNAiso Reagent处理新鲜血液,以总RNA抽提试剂盒(上海华舜)制备总RNA。用PowerscriptTM反转录酶逆转录合成第一链cDNA,LD-PCR扩增获得cDNA双链,SfiⅠ酶切和CHROMA SPIN-400TM柱分离后,500bp以上的片段与pDNR-LIB载体连接,电转化入Ecoli.DH5α,建成原始文库。经鉴定,库容量达到1.2×106克隆,原始文库滴度为3×109cfu/mL,扩增后的文库滴度为4.3×1010cfu/mL。PCR鉴定重组子,发现重组率接近100%,插入片段大小分布为0.5～2kb,插入片段平均长度约为1kb。文库的各项指标均达要求,为利用文库筛选海南黄牛已知和未知功能基因提供了材料来源,且为进一步研究基因的结构和功能奠定了重要基础。
杜丽刘涛申明霞王凤阳成鹰张莉娜祁超李治深吴科榜张艳许兆艳林杰材满初日嘎
关键词：CDNA文库SMART技术外周血白细胞
JAK2结构及其功能研究进展被引量：8
2009年
JAK2作为JAK家族的一个成员，有JH1～JH7七个结构域，分为FERM区（JH3～JH7）、V617F假激酶区（JH2）和激酶区（JH1）3个部分．JAK2与STATs所构成的信号途径在肾小管上皮细胞转分化、骨髓增殖性疾病的发生、白血病的发生和创伤脓毒症等方面都有重要的影响．但是其具体的作用机理还有待进一步的研究．AG490等JAK2特异性抑制剂和姜黄素等非特异性抑制剂能有效地调节JAK2的异常活性，控制与JAKs／STATs信号途径相关的疾病的发生．
张巍陈品林杜丽王凤阳祁超
关键词：JAK2
海南黄牛HSF1 cDNA全长的克隆与序列分析被引量：1
2008年
目的:根据人、小鼠HSF1cDNA保守区序列设计引物,通过PCR方法扩增海南黄牛HSF1cDNA,并进行序列分析。方法:利用RT-PCR、半巢式PCR以及3'-RACE技术分段扩增得到了海南黄牛HSF1cDNA序列,测序正确后进行拼接。用DNAMAN 生物信息学软件分析海南黄牛HSF1 cDNA与赫里福德牛、人、小鼠同源性和海南黄牛HSF1蛋白的氨基酸组成、等电点、亲/疏水区等蛋白质性质,并根据各种动物HSF1蛋白绘制进化树。结果:(1)海南黄牛的HSF1 cDNA序列全长为1 993bp,包括150bp的5'非翻译区,1 578bp的开放阅读框以及264bp(不含poly(A)尾)的3'非翻译区,编码524个氨基酸,分子量为56.42 kD,等电点(pI)为 4.79。(2)海南黄牛的HSF1 cDNA与赫里福德牛、小鼠和人HSF1 cDNA的同源性分别为98.99 %、81.78 %、87.82 %,相应编码蛋白氨基酸序列的同源性分别为98.86 %、83.84 %、89.06 %,其中N-末端和C-末端高度保守,而中间区域存在缺失或替换。(3)根据氨基酸序列构建不同动物HSF1蛋白的进化树,与采用经典遗传分类法构建的进化树基本一致。结论:首次克隆了海南黄牛 HSF1 cDNA全长,分析表明:海南黄牛HSF1蛋白是亲水性蛋白,在8种动物中,其同源性大于73 %,高度保守。海南黄牛与赫里福德牛HSF1蛋白同源性高达98.86 %,在三聚体化区域、转录调节域和激活域存在6个位点的单氨基酸突变,这些发现为进一步揭示海南黄牛抗热性状形成的分子机制提供了重要依据。
成鹰李治深杜丽王凤阳刘涛申明霞张莉娜张巍吴科榜林杰材满初日嘎米华存祁超
关键词：CDNA克隆
胰岛素受体底物PH结构域相互作用蛋白结构和功能研究进展被引量：2
2009年
PHIP是一种与胰腺β细胞中胰岛素受体底物(IRS)的PH结构域相互作用的蛋白。根据小鼠PHIP(mPHIP)mRNA翻译的不同起始位点,除全长的PHIP1外,mPHIP基因还编码其他3种不同变异体。在胰岛素诱导的信号途径中,主要分布于细胞核的PHIP1和IRS-1的PH结构域相互作用,介导IRS蛋白酪氨酸的磷酸化。IRS-2和PHIP1的共表达能诱导IRS在细胞膜上的定位,促进葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)向细胞质膜的转移。PHIP1的表达能提高β-细胞内细胞周期蛋白D2的表达,促进β细胞的生长。PHIP1的表达活化蛋白激酶B(PKB),活化的PKB能明显抑制β细胞的凋亡。PHIP与胰岛素信号传导途径中其他信号分子的相互作用机制尚不明确。
张巍杜丽王凤阳祁超
关键词：PH结构域胰岛素受体底物
海南黄牛Cdc42 cDNA的克隆、表达及鉴定被引量：2
2011年
试验以构建的海南黄牛外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR的方法筛选出海南黄牛细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)全长cDNA,构建pET28a-Cdc42重组质粒,经IPTG诱导表达后,进行可溶性分析和蛋白纯化,并应用Western blotting对其进行鉴定。结果显示,海南黄牛Cdc42 cDNA的编码框由576个碱基组成,编码191个氨基酸,融合蛋白分子质量约为30 ku,该蛋白主要以包涵体形式存在;纯化后的蛋白经Western blotting检测,发现对应大小的特异性条带,表明本试验成功克隆Cdc42并表达。
张冬琳杜丽成鹰刘涛雷明满初日嘎王凤阳
关键词：CDC42原核表达纯化
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