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NUMB调控肿瘤增殖的机制研究被引量：3: 2014年; 目的探讨膜相关蛋白NUMB调控肿瘤增殖的机制。方法构建NUMB基因敲除载体,转染Hela细胞后,经抗性筛选获得稳定细胞株,通过实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测NUMB基因和蛋白表达,验证NUMB基因敲除效果。采用裸鼠成瘤实验研究NUMB基因敲除对肿瘤增殖的影响;利用流式细胞术和Brdu标记实验检测NUMB缺失对细胞周期的影响;在体外模型中检测细胞周期各个时期多种调控蛋白的表达水平。结果 Western blot及qRT-PCR结果表明NUMB基因敲除的体外模型构建成功;裸鼠成瘤实验显示NUMB基因敲除促进肿瘤增殖;流式细胞术和Brdu标记实验表明NUMB基因缺失加速细胞周期G1/S期转换,促进肿瘤细胞增殖;Western blot检测发现NUMB基因敲除组细胞周期调控蛋白Cyclin-E的表达增加,而P27的表达降低。结论 NUMB通过调控Cyclin-E以及P27的蛋白水平影响细胞周期,进而调控肿瘤增殖。; 俞谦邵喜明李华顺; 关键词：肿瘤增殖 NUMB 细胞周期 CYCLIN-E

膜相关蛋白Numb在结肠癌中的表达和意义被引量：8: 2012年; 目的探讨膜相关蛋白Numb在结肠癌组织中的表达和生物学意义。方法对63例结肠癌和20例正常结肠组织的组合组织芯片进行常规免疫组化染色,检测Numb蛋白的表达,结合临床病理资料进行分析。采用免疫荧光染色和Westen blot检测结肠癌SW480、SW620细胞系中Numb的表达。结果低分化的结肠癌组织较正常结肠组织和中、高分化的结肠癌组织胞浆中Numb的表达阳性率下降(P<0.05),Numb表达强度与结肠癌分化程度相关。Westen blot结果显示,结肠癌细胞系中Numb的表达强度,SW480较SW620细胞系高(P<0.05)。激光共聚焦免疫荧光染色观察,Numb呈点状分布于胞质和包膜,SW480较SW620细胞系在胞浆中分布更密集。结论 Numb可能在肿瘤进展过程中起保护作用,对肿瘤的发生发展有重要调控。; 曾蕴林邵喜明李华顺; 关键词：NUMB 结肠癌 SW480 SW620

Numb与神经发育被引量：5: 2010年; 不对称性细胞分裂是一个母细胞通过一次分裂,产生两个不同命运的子细胞的分裂方式,是单细胞生物向多细胞生物进化的关键一步。根据现有的证据推论,不称性细胞分裂是在器官发育过程中产生细胞多样化的一种基本方式。Numb是第一个被发现决定多细胞生物不对称细胞分裂的信号蛋白。在果蝇中,Numb通过促进Notch泛素化拮抗Notch信号通路,从而决定子细胞的命运,后来的研究表明Numb是细胞内吞调节蛋白,并用通过内吞参与调节神经细胞的粘附,轴突的生长及细胞迁移等过程;并且发现Numb与肿瘤抑制基因p53、泛素化蛋白HDM2形成三聚体抑制p53的泛素化,从而调节肿瘤的恶性程度。本文系统地分析了Numb发现的历史及后来在脊椎动物中的作用和机制,重点介绍了Numb在神经发育过程中的功能。; 钱文雨李华顺; 关键词：NUMB 神经发育 NOTCH 内吞

Gsα调控小鼠大脑皮层发育被引量：1: 2011年; 异源三聚体G蛋白激活alpha亚基(Gsα),是一种普遍存在的鸟苷酸结合蛋白,调节受体介导的胞内cAMP信号通路进而参与调控细胞的生命活动。目前Gsα信号通路的研究主要在生物化学和药物方面,但在小鼠大脑皮层发育中的作用还没有详尽的描述。本研究首先利用cre-loxP系统在小鼠大脑皮层神经前体细胞中成功敲除Gsα基因;其次,通过收集出生后不同天数的正常小鼠和敲除小鼠,统计分析后发现敲除鼠的脑重和体重减轻;最后,对小鼠大脑做切片后染色,发现在小鼠大脑皮层条件性敲除Gsα基因的成年鼠中表达thy1-EGFP(增强绿色荧光蛋白)的神经元的数量减少,皮层形成异常。由此推测,Gsα在小鼠大脑皮层发育中发挥重要作用。; 何仁兵李华顺

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国家自然科学基金(30771102)