国家自然科学基金(30771103)
- 作品数：19 被引量：40H指数：5
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- HL－60细胞诱导分化后血管内皮生长因子表达变化分子机制的探讨
- 2012年
- 目的探讨全反式维甲酸（ATRA）诱导HL-60细胞分化模型中血管内皮生长因子（VEGF）表达调控的分子机制，为白血病的抗血管新生治疗提供新的靶点。方法Wright—Gimesa染色观察细胞形态，硝基四唑氮蓝（NBT）还原实验检测HL-60细胞分化，逆转录－聚合酶链反应（RT—PCR）、蛋白质印记（Westernblot）分别从mRNA和蛋白水平检测细胞VEGF、信号转导和转录激活因子-3（STA33）、c-myc的表达变化。结果1μmolATRA作用于HL-60细胞96h后可明显抑制细胞增殖，并出现明显的分化现象，倒置显微镜下可观察到细胞向成熟粒细胞方向分化；NBT阳性率为82．59％（t=－24．157，P〈0．01）；VEGFmRNA表达水平下降（t=7．339，P〈0．05）、STAT3mRNA表达水平下降（t=3．667，P〈0．05）、c—mycmRNA表达水平下降（t=6．858，P〈0．05）。VEGF蛋白表达水平下降（t=3．386，P〈0．05）、STA33蛋白表达水平下降（t=4．074，P〈0．05）、c-myc蛋白表达水平下降（t=3．333，P〈0．05）。结论在ATRA诱导HL-60细胞分化的模型中VEGF的表达水平随诱导分化的进程而下降，其下调机制可能与STAT3、c—myc具有相关性。
- 李燕梅宋冠华温培娥任霞毕可红姜国胜
- 关键词：维甲酸血管内皮生长因子类HL-60细胞
- 纳米抗体在肿瘤诊断和治疗中的应用及其前景被引量：3
- 2019年
- 纳米抗体(Nb)最早发现于羊驼的外周血液中,与传统抗体相比,Nb具有体积小、稳定性好、免疫原性低、组织渗透性强、易于通过基因工程生产等特点,是目前已知最小的功能性抗原特异性结合片段,因此Nb近年来被认为是一种极具开发价值的蛋白质,在基础研究、新药研发、疾病治疗等多个领域得到了广泛的应用。本文重点综述Nb的结构特点和生化特性、在肿瘤诊断和治疗等领域的研究进展,同时预测Nb的应用前景。
- 王冠徐文娟姜国胜
- 关键词：肿瘤
- 曲古霉素A和淫羊藿甙诱导HL-60细胞分化过程中nm23和c-myc及G-CSF表达变化的研究被引量：6
- 2008年
- 目的:研究曲古抑菌素A(TSA)、淫羊藿甙(ICA)诱导急性非淋巴细胞白血病HL-60细胞株分化过程中nm23基因的表达变化及其作用机制。方法:通过MTT试验检测HL-60增殖分化变化,观察细胞形态,分析表面标志和硝基四氮唑蓝(NBT)还原反应,观察HL-60细胞分化水平变化情况;通过流式细胞仪检测细胞周期的改变,RT-PCR检测nm23-H1、nm23-H2、G-CSF、c-myc基因表达的变化。结果:HL-60细胞经TSA、ICA作用后增殖受抑制,24、48和72h抑制率分别为(12·73±1·17)%、(38·15±3·32)%和(58·45±3·06)%,向成熟粒细胞系分化,细胞被阻滞在G1期,nm23、c-myc基因的表达下调,G-CSF基因表达上调。结论:HL-60细胞分化过程中c-myc基因的表达下调,G-CSF基因表达上调与下调nm23基因的表达有关。
- 谢超董伟温培娥杨炜华任霞唐天华姜国胜
- 关键词：淫羊藿甙HL-60细胞
- 三氧化二砷与HMBA对白血病K562细胞增殖抑制作用及其分子机制的研究被引量：6
- 2008年
- 目的:探讨诱导分化剂对K562细胞增殖抑制的作用与分子机制。方法:通过MTT试验和细胞形态学观察K562细胞增殖的改变和分化情况。通过流式细胞仪实验检测细胞周期改变,RT-PCR检测EVI1、TGF-β1和WT1基因表达的变化。结果:K562细胞经六亚甲基二乙酰胺(HMBA)和(或)三氧化二砷(As2O3)作用后增殖明显受到抑制,并向不同方向分化,细胞被阻滞在G1期。K562细胞的增殖抑制作用与EVI1和WT1基因表达下调,TGF-β1基因表达上调一致。EVI1/β-actin从0.9253渐降至0.1379,WT1/β-actin从0.9953降至0.1978。TGF-β1/β-actin从0.3315增至1.2452。结论:HMBA、As2O3及其联合抑制K562细胞增殖作用与EVI1和WT1基因表达下调,TGF-β1基因表达上调有关。
- 董伟谢超刘佳宁温培娥杨炜华任霞唐天华姜国胜
- 关键词：白血病K562细胞乙酰胺类砷剂
- Fas／FasL信号通路在千金子甾醇诱导HL-60细胞凋亡中的作用与机制研究被引量：4
- 2014年
- 目的：在明确千金子甾醇诱导HL-60白血病细胞发生凋亡的基础上，从Fas/FasL信号通路的角度探讨其诱导凋亡的分子机制。方法 HL-60细胞培养体系中分别以千金子甾醇终浓度2．5、10、40μg/ml作用24 h后CCK-8法检测千金子甾醇对HL-60细胞增殖的抑制作用，光学及荧光显微镜下观察细胞形态学变化，Annexin Ⅴ/PI 流式细胞术检测细胞凋亡，反转录-聚合酶链反应法检测Fas/FasL、caspase-8和caspase-3 mRNA转录水平，比色法检测caspase-8和caspase-3的相对活性。结果千金子甾醇可明显抑制HL-60细胞的增殖，增殖抑制率分别为（34．9±3．7）％、（54．6±5．2）％、（61．3±4．3）％，细胞呈典型凋亡形态学改变，细胞早期凋亡率分别为（23．4±3．1）％、（35．7±4．3）％、（53．2±3．9）％。Fas、FasL、caspase-8和caspase-3 mRNA转录水平明显上调（P＜0．01），caspase-8和caspase-3活性显著增高（P＜0．01）。结论千金子甾醇可以诱导HL-60细胞发生剂量依赖性细胞凋亡，其机制与上调Fas/FasL凋亡信号通路有关。
- 郭菲李霞张超任霞史美艳姜国胜
- 关键词：HL-60细胞细胞凋亡
- HL-60细胞高三尖杉酯碱诱导后CD44表达变化及机制的研究被引量：6
- 2008年
- 目的:研究高三尖杉酯碱(homohar-ringtonine,HHT)诱导HL-60细胞分化后CD44表达变化及其与细胞周期调控的关系,探讨HHT的作用机制。方法:建立HHT诱导分化模型,瑞氏染色观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖变化,NBT还原实验测定细胞分化状态,流式细胞术检测细胞表面CD11b表达及细胞周期变化,RT-PCR检测CD44、p27、p21和Cyclin E基因在mRNA水平的表达变化。结果:MTT实验显示,HHT对HL-60细胞产生增殖抑制作用,HL-60细胞G0/G1期细胞百分比明显上升,S期细胞百分比明显下降,P<0.05。半定量分析PCR扩增产物光密度相对表达量显示,HHT诱导后HL-60细胞中CD44基因表达逐渐减弱,p27和p21基因逐渐增强,Cyclin E基因逐渐减弱。CD44与p27表达呈明显负相关,r=-0.686,P<0.05。结论:HHT可能通过下调CD44基因,进而提高p27和p21表达,抑制Cyclin E活性而对HL60细胞产生诱导分化作用。
- 刘佳宁毕高峰温培娥杨炜华任霞唐天华谢超董伟姜国胜林汝湘
- 关键词：HL-60细胞细胞周期
- sox4不同结构域的真核表达质粒的构建和鉴定
- 2014年
- 目的：构建并鉴定sox4四段不同结构域的重组真核表达质粒。方法：以HL-60细胞的总RNA为模板，用RT—PCR方法扩增出sox4基因cDNA，将产物克隆进真核载体pCMV—Flag质粒内，构建含sox4不同结构域的重组真核表达质粒。将pCMV—Flag—sox4重组质粒转染293T细胞，Westernblot检测sox4蛋白表达。结果：核酸序列分析sox4已成功插入pCMV—Flag载体中，转染pCMV—Flag-sox4的293T细胞中检测到表达的sox4蛋白。结论：成功构建了含sox4基因的重组真核表达质粒。
- 史露露宋冠华潘素飞禹林昌史美燕任霞郭强姜国胜
- 关键词：HL-60
- 三氧化二砷和曲古抑菌素A协同诱导HL-60细胞凋亡的作用及分子机制研究
- 2008年
- 目的探讨三氧化二砷（As2O3）和曲古抑菌素A（TSA）在体外诱导急性早幼粒白血病细胞HL-60凋亡过程中的协同作用。方法采用MTT法检测As2O3和（或）TSA对HL-60细胞增殖的影响，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达。结果As2O3和TSA联用较单独用药能明显抑制细胞，引起细胞周期阻滞和凋亡，Bax基因表达升高，Bcl-2基因表达降低，Bax／Bcl-2比值升高。结论As2O3和TSA均能够引起HL-60凋亡，二者具有协同效应，其机制是引起细胞周期阻滞，且上调Bax与Bcl-2比值。
- 杨炜华温培娥谢超乔高娟任霞任海泉唐天华姜国胜
- 关键词：HL-60细胞砷剂组蛋白脱乙酰基酶类细胞凋亡
- PADI4基因与白血病细胞分化关系的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的体外探讨PADI4基因与白血病细胞分化的关系。方法检测HL60、K562、U937等9株不同白血病细胞株中PADI4在mRNA水平的表达情况,建立ATRA诱导HL60细胞分化模型,然后分别利用RT-PCR及WB技术检测PADI4基因在转录和翻译水平的表达变化。结果不同类型的白血病细胞株中PADI4表达情况不同。ATRA诱导HL60细胞后,在药物作用的96h内,随着药物作用时间的增加,在转录和翻译水平PADI4表达水平逐渐下调,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 PADI4与白血病细胞的分化有关,ATRA诱导HL60细胞分化后PADI4表达下调。
- 李红江潘素飞史露露宋冠华姜国胜
- 关键词：白血病HL-60细胞细胞分化
- 真菌Polyporus sp. M05多糖诱导白血病细胞株HL-60凋亡作用机制的实验研究
- 2010年
- 目的:研究真菌Polyporus sp.M05多糖对白血病细胞株HL-60增殖抑制及诱导凋亡作用,并探讨其分子机制。方法:活细胞计数法检测多糖的增殖抑制作用;倒置显微镜下直接观察细胞形态;PI染色流式细胞术检测多糖诱导周期阻滞及凋亡作用;RT-PCR检测凋亡相关基因。结果:多糖对HL-60细胞有增殖抑制作用,并随着浓度增大,作用增强;显微镜下观察细胞有明显的凋亡小体。流式细胞术检测细胞有明显G0/G1期阻滞及凋亡峰的出现,并随着时间越长和浓度的增大凋亡阳性率比例越高,与阴性对照相比差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR检测到Bcl-2基因下调,Bax、Fas及Caspase-9基因上调。结论:Polyporus sp.M05中提取的多糖对白血病细胞株HL-60有增殖抑制和诱导凋亡作用,分子机制与Bcl-2基因下调,Bax、Fas及Caspase-9基因上调有关,线粒体途径及死亡受体途径均参与了此凋亡过程。
- 张恒兰杨炜华温培娥任霞姜国胜孙晓柏苏恩裕姜国胜
- 关键词：真菌多糖HL-60凋亡
