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一种简便的STR重复次数测定方法被引量：1: 2008年; 短串联重复(STR)的多态性分析是生物个体识别最有效的一种手段,在法医学鉴定中已被广泛用于身份识别.但目前使用的方法成本太高,以致不便在更广泛的范围推广.针对法医上常选用的4 bp重复单位的STR基因座,采用PCR产物小于160 bp的迷你STR(Mini STR)和优化聚丙烯酰胺凝胶电泳条件,提高分辨率,使重复单位之间能有效分辨.设计PCR引物,使STR基因座扩增产物的大小为4 bp的倍数,应用8 bp的DNALadder即能精确测定整数倍STR重复单位数.这一方法操作简便,成本低廉,尤其是用于制作人基因身份证,使得人人制作一张基因身份证成为可能.; 余敏马明星卢培吴松锜任永富谭德勇; 关键词：DNA LADDER

4种不同血清样本处理方法对双向电泳效果的影响被引量：2: 2008年; 比较了常规处理、透析除盐处理、TCA-丙酮法和蛋白质A/G亲和柱处理血清样本对双向电泳分离效果的影响,结果显示4种方法中蛋白质A/G亲和柱处理方法可以获得较好的分离效果.; 向明钧余敏马明星陈艳涂源泉谭德勇; 关键词：血清双向电泳

线粒体转录终止因子蛋白家族研究进展被引量：17: 2007年; 线粒体转录终止因子蛋白的作用是与线粒体DNA的特异位点结合,导致线粒体基因转录停止。近年来,随着人们对线粒体基因转录机制和人线粒体疾病的深入研究,线粒体转录终止因子的功能开始受到人们的关注。本文介绍了线粒体转录终止因子及其家族成员的研究进展和有待解决的一些问题。; 余敏伍红谭德勇; 关键词：线粒体DNA

血清样本双向电泳操作条件优化被引量：2: 2007年; 为建立分辨率高、重复性好的血清样品双向电泳技术,从血清样品的水化、等电聚焦、胶条的平衡、胶条的染色等几个方面对双向电泳操作条件进行了分析。结果表明采用以下的操作过程可以获得分辨率高、重复性好的双向电泳结果:样品水化2h(25℃);胶条泡涨12～16h(25℃);17cm胶条的等点聚焦程序采用250V线性1h/1000V线性1h/4000V线性2h/8000V线性3小时/8000V线性10h/500V快速0.5h,11cm的胶条的等点聚焦程序采用250V慢速4h/1000V快速2h/4000V快速1h/8000V快速2.5小时/8000V快速7h/500V快速30min;两次平衡各15～20min;银染条件为固定两小时或过夜,敏化50～60min,定影30～40min,显影10min左右,终止10min。这一研究对利用双向电泳分析血清蛋白具有很好的参考价值。; 向明钧叶金花余敏马明星卑占宇王熙才谭德勇; 关键词：血清样本双向电泳

U251细胞血清饥饿特异抗原的ScFv噬菌体抗体库构建: 2007年; 目的:构建一个U251细胞血清饥饿特异抗原ScFv噬菌体抗体库。方法:将U251细胞进行48小时的血清饥饿培养,将其细胞裂解液免疫4周龄的BALB/c小鼠,提取被免疫小鼠脾脏细胞总RNA,反转录成cDNA,利用RT-PCR扩增免疫球蛋白IgG的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,用一个柔性片段(Linker)连接VL和VH基因片段,将连接产物重组到pCANTAB-5E载体,转入TG1菌株中,随后加入辅助噬菌体(Help phage)M13K07超感染,构建单链抗体片段(Single chainfragment of variation,ScFv)噬菌体抗体库。结果:经过富集筛选后,库容量达到3×106cfu/L,随机挑取8个克隆进行ELISA检测,获得了1个阳性克隆。结论:成功构建了一个具有一定库容的U251细胞血清饥饿特异抗原的单链抗噬菌体抗体库,为筛选血清应答蛋白抗体、进一步克隆血清应答蛋白的基因奠定基础。; 余敏尚海谭德勇孙桂林; 关键词：U251细胞血清饥饿 SCFV 抗体库

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云南省教育厅科研基金(5Y0163B)