福建省卫生厅青年科研基金(2004-1-1)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：游捷林建银赵蓉刘礼斌黄清玲更多>>
- 相关机构：福建医科大学更多>>
- 发文基金：福建省科技计划项目福建省卫生厅青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 晚期糖基化终末产物对内皮细胞前列腺素合成的影响及可能机制被引量：1
- 2006年
- 目的探讨晚期糖基化终末产物对内皮细胞前列环素、前列腺素E2合成的影响及可能机制。方法不同浓度的晚期糖基化终末产物作用内皮细胞,酶联免疫吸附法测定前列环素的稳定代谢产物6-酮—前列腺素F1α和前列腺素E2的表达。逆转录聚合酶链反应、免疫细胞化学测定环氧合酶2 mRNA和蛋白表达的改变。晚期糖基化终末产物受体、核因子κB单/双基因反义RNA对晚期糖基化终末产物刺激内皮细胞分泌6-酮—前列腺素F1α、前列腺素E2的影响。结果晚期糖基化终末产物引起内皮细胞分泌6-酮—前列腺素F1α、前列腺素E2增加(P<0.01),具有剂量依赖关系。晚期糖基化终末产物引起内皮细胞环氧合酶2的mRNA和蛋白表达增加(P<0.01)。晚期糖基化终末产物受体、核因子κB单/双基因反义RNA可减轻晚期糖基化终末产物刺激的内皮细胞分泌6-酮—前列腺素F1α、前列腺素E2(P<0.05或0.01),双基因的抑制效果更明显(P<0.05)。结论晚期糖基化终末产物可能通过晚期糖基化终末产物受体、核因子κB途径使内皮细胞的环氧合酶2表达增加,从而引起前列环素、前列腺素E2合成增加,这个机制可能参与了晚期糖基化终末产物所致的血管炎症损伤。
- 游捷黄清玲林旭刘礼斌林建银
- 关键词：病理学与病理生理学晚期糖基化终末产物环氧合酶2前列腺素合成反义RNA基因转染
- 晚期糖化终产物受体、核因子-κB双基因反义RNA抑制糖化终产物刺激的炎症因子表达被引量：2
- 2006年
- 目的:观察晚期糖化终产物受体(receptor ofadvanced glycation endproducts,RAGE)、核因子-κB(NF-κB)双基因反义RNA对晚期糖化终产物(ad-vanced glycation endproducts,AGEs)刺激ECV304细胞分泌炎症因子的影响。方法:酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法观察AGEs对ECV304细胞分泌TNF-α和IL-6的影响,应用脂质体将RAGE、NF-κB单/双基因反义RNA转染ECV304,流式细胞仪、筛选低表达RAGE、NF-κB的细胞株,观察RAGE、NF-κB双基因反义RNA对AG-Es刺激ECV304细胞分泌TNF-α和IL-6的影响。结果:AGEs可引起ECV304细胞分泌TNF-α和IL-6增加,诱导作用具有时间和剂量依赖规律。稳定转染筛选出低表达RAGE、NF-κB的细胞株,在AGEs100 mg.L-1诱导下双基因转染细胞ECV-asRAGE-asP65克隆中RAGE、NF-κBp65表达抑制率分别为(62.2±8.7)%及(37.2±7.1)%。AGEs 100 mg.L-1刺激下ECV-asRAGE-asP65克隆分泌TNF-αI、L-6较空载体转染细胞、单基因转染细胞减少更明显(P<0.01)。结论:RAGE、NF-κB双基因反义RNA可抑制AGEs刺激的ECV304细胞的TNF-α和IL-6释放。
- 游捷赵蓉刘礼斌林建银
- 关键词：糖基化终产物受体核因子-ΚB炎症因子
- 晚期糖化终产物受体反义RNA腺相关病毒载体的构建及在肾脏系膜细胞中表达被引量：3
- 2007年
- 目的构建晚期糖化终产物受体(RAGE)反义RNA腺相关病毒载体,并在大鼠肾脏系膜细胞中表达。方法构建腺相关病毒介导的RAGE反义RNA载体,3个质粒共转染293细胞,获得病毒原液,感染大鼠肾脏系膜细胞,流式细胞术、RT-PCR、ELISA检测重组病毒感染的细胞RAGE的表达和分泌细胞外基质的情况。结果经酶切鉴定、序列分析显示RAGE基因片段正确完整反向插入pAAV-MCS。利用293细胞包装获得病毒原液的滴度为8.7×107VP/mL。感染重组病毒的细胞与正常细胞比较RAGE表达被抑制(48.2±6.1)%,分泌Ⅳ型胶原(ColⅣ)水平明显下降(P<0.05)。结论成功构建具有抑制功能的RAGE反义RNA腺相关病毒载体,为进一步研究RAGE的作用机制,以及基因治疗RAGE相关疾病提供一个重要工具。
- 游捷赵蓉刘礼斌林建银
- 关键词：反义RNA晚期糖化终产物受体腺相关病毒
