苏州市科技发展计划(SYSD2012084)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基质交联分子1对前列腺癌PC-3细胞凋亡相关蛋白表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:观察抑制基质交联分子1(STIM1)对前列腺癌PC-3细胞凋亡相关蛋白表达的影响。方法:将携带STIM1基因的小干扰RNA(shRNA)慢病毒载体STIM1-pGCSIL-GFP转染人激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞,3d后荧光倒置显微镜观察转染效率;1周后RT-PCR及Western印迹验证STIM1抑制表达有效性,并采用Western印迹检测PC-3细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax,survivin、激活型Caspase-3的表达水平。结果:倒置显微镜观察发现PC-3细胞病毒转染效率>80%。转染1周后,RT-PCR及Western印迹显示STIM1被有效抑制。抑制STIM1表达后,对照组Bcl-2/Bax比率为1.24,干扰组PC-3细胞Bcl-2/Bax比率为0.31,比率显著下降;干扰组PC-3细胞survivin表达明显降低,相对表达量为对照组的0.14倍;Caspase-3裂解激活相对表达量为对照组的1.52倍(P<0.05)。结论:STIM1在前列腺癌PC-3细胞中可视为致癌基因,抑制其表达可通过下调Bcl-2/Bax比率,降低survivin表达,激活Caspase-3级联通路,诱导细胞凋亡。
- 顾鹏周毅彬阳东荣单玉喜薛波新
- 关键词：前列腺癌凋亡PC-3细胞
- 基质交联分子1对前列腺癌DU145细胞迁移侵袭及上皮-间充质转化的影响被引量：3
- 2014年
- 目的观察基质交联分子1（STIM1）对前列腺癌DU145细胞迁移、侵袭的影响并探讨其在上皮-间充质转化（EMT）过程中的作用。方法将携带STIM1基因的小干扰RNA（siRNA）慢病毒载体STIM1-pGCSIL-GFP转染人激素非依赖性前列腺癌DU145细胞（KD组），同时设阴性对照组（NC组）及空白对照组（CON组）。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Westernblot验证抑制STIM1表达的有效性。采用划痕实验及Transwell迁移、侵袭实验检测抑制STIM1对肿瘤细胞运动及迁移、侵袭能力的影响。采用半定量RT-PCR及Westernblot分别在mRNA及蛋白水平检测EMT标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波动蛋白（Vimentin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）在各组细胞中的差异。结果与对照组比较，转染STIM1-pGCSIL—GFP后，DU145细胞内STIM1的mRNA及蛋白水平均明显降低。划痕实验显示KD组DU145细胞的运动能力明显降低。细胞迁移结果显示，CON、NC、KD组每个视野细胞数分别为（92．0±14．2）、（87．3±2．3）、（60．8±10．3）个，KD组数目明显减少（P〈0．05）；细胞侵袭实验提示，CON、NC、KD组每视野细胞数分别为（79．6±3．7）、（80．0±3．5）、（45．8±5．8）个，KD组侵袭数目明显减少（P〈0．05）。RT-PCR和Westernblot结果显示，KD组上皮标志物E—cadherin mRNA及蛋白表达水平增高（分别为NC组的1．38、1．72倍）；间质标志物Vimentin的mRNA及蛋白表达水平降低（分别为NC组的0．67、0．74倍），α-SMA mRNA及蛋白表达水平降低（分别为NC组的0．23、0．54倍，P〈0．05）。结论抑制前列腺癌DU145细胞中STIM1表达后，细胞运动及迁移、侵袭能力均明显降低，这可能与逆转EMT相关。
- 顾鹏周毅彬阳东荣单玉喜薛波新
- 关键词：前列腺肿瘤肿瘤转移上皮-间充质转化
