浙江省自然科学基金(Y205193)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：杜玉清曾庆娟许崇永尤捷杨超颖更多>>
- 相关机构：温州医学院附属第一医院温州医学院附属第二医院山东中医药大学附属医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人VEGF166基因转染兔骨髓内皮祖细胞及对其增殖的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨人血管内皮生长因子165（hVEGF165）基因转染兔骨髓源性内皮祖细胞（EPCs）及对EPCs增殖的影响。方法体外分离、培养、扩增并鉴定EPCs，脂质体介导转染携带增强型绿色荧光蛋白标记的VEGF166质粒、空白质粒，同时经ELISA法检测转基因EPCs表达VEGF蛋白，并采用CCK-8法检测对其增殖的影响。结果FITC标记剂豆凝集素I和Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白荧光双染证实正在分化的EPCs，同时经免疫组化法证实VEGF受体2FLk-1和VIII因子的表达；VEGF165质粒转染组EPCs上清液中表达VEGF166,VEGF165转染EPCs的转染率约22．5％；hVEGF165基因转染促进EPCs增殖。结论hVEGF165基因可成功转染EPCs，且可促进EPCs的增殖，为基因治疗血管性疾病提供了动物实验基础。
- 曾庆娟尤捷许崇永方必东杨超颖杜玉清
- 关键词：内皮祖细胞血管内皮细胞生长因子基因转染
- 血管内皮生长因子基因转染自体骨髓血管内皮祖细胞治疗下肢缺血的实验研究
- 2010年
- 目的:利用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF165)基因转染体外诱导的血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),并移植到下肢缺血的高脂血日本大耳兔体内,观测其促进血管新生、改善肢体缺血的效果。方法:①制作高脂血兔,梯度离心法分离兔骨髓单个核细胞(MNCs),用内皮细胞专业培养基(EGM-2)诱导培养EPCs,并用双荧光染色法及免疫组化等方法进行鉴定。②脂质体介导携带EGFP标记的VEGF165质粒转染EPCs,用激光共聚焦显微镜检测VEGF蛋白的表达,用流式细胞仪检测转染率。③制作兔单侧下肢缺血模型,并将其随机分为A、B、C 3组,分别移植EPCs、VEGF165基因转染后的EPCs及EGM-2培养基,多种方法检测移植效果。结果:①诱导出的梭形细胞,经FITC-UEA-I和DiI-acLDL荧光双染证实为正在分化的EPCs,同时经免疫组化法证实其Flk-1和Ⅷ因子的表达。②激光共聚焦显微镜下见绿色荧光蛋白表达,证实VEGF165转染成功,经流式细胞仪检测得到转染率约22.5%。③DSA及免疫组化检查显示VEGF165基因转染后的EPCs移植后改善肢体缺血的效果优于其他2组。结论:VEGF基因转染EPCs后能改进EPCs质量,移植后促血管新生能力增强,其效果优于未转染组。
- 曾庆娟刘斌丁承宗杜玉清
- 关键词：血管内皮生长因子基因转染血管内皮祖细胞下肢缺血
