浙江省科技计划项目(2006C22049)
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 相关作者：袁秀芳王朝文王一成徐丽华牛登元更多>>
- 相关机构：浙江省农业科学院甘肃农业大学新疆农业大学更多>>
- 发文基金：浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 大肠杆菌LTB增强PRRSV-GP5蛋白免疫反应的研究被引量：2
- 2010年
- 以猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)主要中和表位所在的糖蛋白GP5为模式抗原,采用肌肉注射、皮下注射和滴鼻免疫方式免疫6～8周龄ICR小鼠,利用间接ELISA检测血清抗体,MTT法检测淋巴细胞增殖.结果表明:三免后GP5弗氏佐剂乳化组小鼠血清抗体的水平最高,LTB+GP5免疫组的抗体水平显著高于单独GP5免疫组,肌肉注射免疫组的抗体水平明显高于皮下注射组,滴鼻免疫组没有检测到特异性血清抗体;各GP5免疫组均能不同程度地诱导脾脏B淋巴细胞增殖,其中GP5弗氏佐剂乳化组、LTB+GP5肌肉注射和LTB+GP5皮下注射组B淋巴细胞增殖显著,除了GP5弗氏佐剂乳化免疫组外,其他各免疫组均无明显的脾脏T淋巴细胞增殖反应.
- 王朝文吴润王一成袁秀芳徐丽华李军星路斌
- 关键词：PRRSVGP5蛋白免疫佐剂
- 猪腹泻大肠杆菌LTa(R210G)和LTb原核表达及其在小鼠的免疫反应
- 2009年
- 大肠杆菌不耐热性肠毒素(LT)具有免疫增强作用,是良好的免疫佐剂。为了更好的研究其免疫增强效果,本研究将LT的两个亚基LTa(R210G)和LTb克隆到pGST中,原核表达LTa(R210G)和LTb,经Western-blotting分析,表达蛋白具有免疫原性。对表达蛋白进行大量纯化后,以卵清蛋白为模式蛋白(OVA)为模式蛋白,免疫小鼠,ELISA结果表明,OVA+LTa(R210G)佐剂组小鼠的抗体滴度最高,OVA+LTb和OVA+LTa+LT组抗体滴度相似,高于OVA+氢氧化铝组,而OVA+氢氧化铝组高于无佐剂OVA组。因此,LTa(R210G)和LTb具有良好的免疫增强作用,是一种极有希望的免疫佐剂。
- 袁秀芳王一成徐丽华刘邓牛登元王朝文
- 关键词：原核表达免疫反应
- pCI-LT(R210G)基因疫苗的免疫原性研究
- 2009年
- 袁秀芳徐丽华王一成牛登元刘邓王朝文
- 关键词：产肠毒素大肠杆菌免疫原性基因疫苗PCI不耐热肠毒素仔猪黄痢
- 猪大肠杆菌LT基因位点突变、真核表达及小鼠免疫效果
- 2010年
- 大肠杆菌不耐热性肠毒素具有免疫增强的作用,为了更好的研究LT免疫增强效果,我们从临床分离大肠杆菌,提取基因组DNA,扩增出大肠杆菌不耐热性肠毒素基因LT,经位点突变,将LT210位的A突变为G,突变后的LT克隆到真核表达载体pCI质粒中,命名为pCI-LT(R210G),磷酸钙共沉法转染IBRS细胞证实LT(R210G)体外获得表达。将pCI-LT(R210G)免疫小鼠,ELISA结果表明:免疫小鼠两周后体内检测到特异性抗LT抗体,4周达到最高值。同时,MTT试验结果表明免疫小鼠产生强烈的淋巴细胞增殖反应。研究结果证明已成功构建pCI-LT(R210G)真核表达质粒,是一种极有发展前景的基因疫苗。
- 袁秀芳王一成徐丽华刘邓牛登元王朝文
- 关键词：位点突变真核表达免疫反应
