国家重点基础研究发展计划(2010CB945104)
- 作品数：4 被引量：29H指数：4
- 相关作者：胡娅莉侯亚义郭葳颜桂军蒋玥更多>>
- 相关机构：南京大学医学院附属鼓楼医院南京大学南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- miR-181a促进人子宫内膜间质细胞蜕膜化催乳素的表达被引量：10
- 2012年
- 目的目前虽已发现一些在胚胎着床过程中起重要作用的分子,但微小RNA(microRNA,miRNA)在蜕膜化过程中作用的研究报道较少,文中调查孕鼠围着床期子宫组织中miR-181a的表达规律,并探讨miR-181a对人子宫内膜间质细胞(human endometrial stromal cell,hESC)体外诱导蜕膜化过程中蜕膜化标志基因蜕膜化催乳素(decidual prolactin,dPRL)表达的调控作用。方法收集怀孕0～6.5 d孕鼠子宫组织,采用TRIZOL法提取总RNA,通过实时定量PCR检测子宫组织中miR-181a的表达。制备Ad-miR-181a重组腺病毒,并感染hESC,24 h后采用0.5 mmol/L 8-Br-cAMP和1μmol/L Medroxyproges-terone(MPA)联合进行体外蜕膜化诱导培养;通过化学发光免疫法和实时定量PCR分别检测细胞培养液上清中dPRL的浓度与间质细胞中催乳素(prolactin,PRL)mRNA的表达;同时采用荧光素酶报告基因检测miR-181a对hESC中dPRL(-332/+65)启动子的调控作用。结果早孕小鼠子宫组织中miR-181a的表达高于非妊娠小鼠子宫,且随着妊娠天数的增加呈逐渐上升的趋势,在小鼠着床"窗口期"即孕4.5 d达到高峰(2.60±0.15倍,P<0.01,n=5),孕5.5 d子宫miR-181a的表达开始平稳下降;成功获得滴度为5.19×1010ifu/ml的miR-181a腺病毒,该腺病毒介导的miR-181a过表达显著增加hESC蜕膜化标志基因dPRL mRNA表达水平,增高超过8倍(P<0.01);在8-Br-cAMP和MPA联合诱导hESC体外蜕膜化时,高表达miR-181a可明显增加8-Br-cAMP联合MPA诱导的PRL mRNA表达水平与PRL蛋白分泌(P<0.01)。荧光素酶报告基因进一步证实miR-181a可以激活dPRL(-332/+65)启动子的活性达到2倍(P<0.05)。结论 miR-181a参与8-Br-cAMP和MPA诱导子宫内膜间质细胞蜕膜化过程中PRL的表达调控。
- 张群刘红玉蒋玥王玢颜桂军孙海翔胡娅莉
- 关键词：催乳素蜕膜化
- 多囊卵巢综合征患者外周血中Th17和Treg细胞的改变被引量：9
- 2014年
- 目的观察多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者外周血中Th17细胞与FOXP3+CD25highCD4+调节性T(Treg)细胞比例及相关因子表达的变化并探讨其意义。方法取8例PCOS患者及12例健康妇女外周血,流式细胞术检测Th17和Treg细胞占CD4+T细胞的比例;实时定量PCR测定外周血单个核细胞(PBMC)中Th17和Treg细胞相关因子IL-17、RORγt、FOXP3、TGF-β、IL-1β及IL-6 mRNA的相对表达量。结果 PCOS患者外周血中Th17细胞的比例明显高于健康妇女(P<0.01),Treg细胞的比例较健康妇女有增高趋势但差异无统计学意义(P>0.05)。PCOS患者PBMCs中,IL-17、RORγt、FOXP3、TGF-β的mRNA相对表达量明显高于健康妇女(P<0.01),而IL-1β则明显低于健康妇女(P<0.01),IL-6差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PCOS患者可能处于一种Th17细胞明显增多的炎性状态,这可能参与了PCOS的发生发展,但其中细胞因子的作用尚待进一步研究。
- 郭葳侯亚义罗予
- 关键词：多囊卵巢综合征TH17细胞调节性T细胞
- 卵巢早衰患者外周血中T_H17和Treg细胞的变化被引量：8
- 2011年
- 目的观察卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)患者外周血中TH17细胞与FOXP3+CD25highCD4+调节性T(Treg)细胞比例及相关因子表达的变化并探讨其意义。方法取30例POF患者及12例健康妇女外周血,流式细胞术检测TH17和Treg细胞占CD4+T细胞的比例;实时定量PCR测定外周血单个核细胞(PBMC)中TH17和Treg细胞相关因子IL-17、RORγt、FOXP3、TGF-β、IL-1β及IL-6 mRNA的相对表达量。结果 POF患者外周血中TH17/CD4+T细胞的比例明显高于健康妇女(P<0.01),Treg/CD4+T细胞的比例较健康妇女有增高趋势但无统计学差异,TH17/Treg细胞比例的比值明显高于健康妇女(P<0.01)。POF患者PBMCs中,IL-17、RORγt、FOXP3的mRNA相对表达量明显高于健康妇女(P<0.01),而IL-1β、IL-6则明显低于健康妇女(P<0.01,P<0.05),TGF-β无明显差异(P>0.05)。结论 POF患者可能处于一种TH17细胞明显增多并趋于优势地位的炎性状态,这一机制可能参与了POF的发生、发展,但其中细胞因子的作用尚待进一步研究。
- 郭葳李鹏飞胡娅莉朱海燕李洁侯亚义
- 关键词：卵巢早衰TH17细胞调节性T细胞
- Nur77促进人子宫内膜蜕膜化间质细胞中催乳素的表达被引量：4
- 2011年
- 目的蜕膜化催乳素在妊娠的建立与维持中具有重要作用,但目前对参与蜕膜化催乳素表达调节因子的研究较少。文章旨在探讨孤儿核受体Nur77在人子宫内膜间质细胞蜕膜化过程中对蜕膜化标志基因(Prolactin,PRL)的作用。方法制备Ad-Flag-Nur77重组腺病毒,通过荧光素酶报告基因和荧光定量PCR结合重组腺病毒介导的Nur77过表达及小干扰RNA沉默Nur77基因的实验,阐述Nur77对蜕膜催乳素的调控作用。结果成功获得滴度为8×1010ifu/ml的重组Nur77腺病毒,该腺病毒可在子宫内膜间质细胞中高表达Flag-Nur77融合蛋白;体外培养的人子宫内膜间质细胞经8-Br-cAMP和甲羟孕酮(medroxy progesterone,MPA)刺激后,Nur77的表达明显增加,并在体外诱导蜕膜化培养的第3天达到高峰;过表达Nur77可明显上调人子宫内膜间质细胞中dPRL(-332/+65)启动子活性>4倍,并以浓度依赖的方式明显增加人子宫内膜间质细胞中PRL mRNA的表达,P<0.01;功能缺失实验进一步表明基因沉默内源性Nur77蛋白表达明显抑制dPRL启动子活性达60%,同时显著抑制8-Br-cAMP和MPA诱导的人子宫内膜间质细胞中PRLmRNA的表达,P<0.01。结论孤儿核受体Nur77参与8-Br-cAMP和MPA诱导子宫内膜间质细胞蜕膜化过程中PRL的表达调控。
- 蒋玥赵静华美娟甄鑫胡娅莉颜桂军孙海翔
- 关键词：催乳素蜕膜化
