福建省自然科学基金(2010J01069)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 苏云金杆菌毒素调控基因plcR的特性与表达被引量：1
- 2010年
- 根据蜡状芽胞杆菌plcR基因和papR基因序列设计特异引物,对6个Bt菌株(WB1、WB7、WB9、HD98、8010、8311)及5个Bc菌株(6A1、6A2、6A3、6A4、6S1)进行了PCR检测。结果显示,3个Bt菌株及4个Bc菌株含有plcR-papR基因。克隆了Bt8010、Bc6A2和6A3的plcR、papR基因,核苷酸序列分析表明,三个菌株的plcR、papR基因与NCBI数据库中的Bt、Bc及Ba相应序列都有很高的相似性。Bt8010的plcR基因编码框由846个核苷酸组成,可编码282个氨基酸;papR基因的编码框由144个核苷酸组成,可编码48个氨基酸。推导的氨基酸序列分析表明,Bt8010的PapR有21个氨基酸的信号肽序列,PlcR没有信号肽序列。与Bc6A2、6A3和Bc 569相比,Bt8010的PlcR和PapR在氨基酸序列上与Bc相应序列存在相对较大的差异。将plcR-papR基因连接到表达载体pHT304中,并转化至大肠杆菌JM109中成功进行了表达,为研究Bt plcR基因的功能奠定了基础。
- 黄必旺邵恩斯蔡瑞苏芙蓉关雄
- 关键词：苏云金杆菌基因表达
- Bt肠毒素基因与plcR基因的相关性及肠毒素对小鼠的急性毒性被引量：1
- 2011年
- 用PCR方法检测溶血肠毒素BL、肠毒素T和肠毒素S三种肠毒素基因(hblA、becT、entS)及毒素调控基因plcR在30株苏云金芽胞杆菌株(Bt)中的分布.结果表明,含有hblA基因、entS基因、becT基因及plcR基因片段的Bt菌株分别占66.7%、70%、70%和73.3%.其中,含有plcR基因的菌株都至少含有一种肠毒素基因,不含肠毒素基因的菌株也未检测到plcR基因,说明plcR基因与肠毒素基因有着密切的关系.用3个Bt菌株WB9、HD2和HD9(都含有hblA、becT、entS和plcR基因片段,HD2和HD9经RPLA与TECRA肠毒素检测试剂盒检测具有高滴度)对小白鼠进行口服急性毒性试验.结果表明,所有3种供试菌株的发酵上清液对小白鼠行为和健康没有明显影响,对内部器官(心、肝、肺等)也没有产生病理现象.
- 黄必旺林晓东苏芙蓉关雄
- 关键词：苏云金芽胞杆菌肠毒素基因调控基因急性毒性
- 苏云金芽孢杆菌chi36基因的克隆、表达和酶活性分析
- 2011年
- 通过PCR方法从苏云金芽孢杆菌010菌株克隆出几丁质酶基因chi36,该基因开放阅读框(ORF)的长度为1 083bp,编码360个氨基酸。氨基酸序列分析表明:Bt 010的Chi36与Bt15A3、Bc28-9、Bc6E1的Chi36相似性分别为99%、99%和96%,其N-端具有27个氨基酸的信号肽序列。该蛋白归类为18家族几丁质酶,属于一种胞外酶。将chi36基因插入到PGEX-KG原核表达载体的表达框中,构建成原核表达载体并转化到大肠杆菌E.coli BL21(DE3)进行蛋白表达,酶活性测定结果表明,表达产物对几丁质有降解作用,在pH值为5.0、温度为55℃时酶活性最高。
- 黄必旺谢宇飞沙莉黄志鹏
- 关键词：苏云金芽孢杆菌几丁质酶基因表达酶活性
