天津市科技计划(07ZCGYSF05200)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：韩瑞发任海林孙岩胡海龙王春阳更多>>
- 相关机构：天津医科大学天津市泌尿外科研究所更多>>
- 发文基金：天津市科技计划国家自然科学基金天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- E2F3基因腺相关病毒干扰载体的构建被引量：4
- 2009年
- 目的:构建针对E2F3基因的腺相关病毒干扰穿梭质粒载体,为进一步包装能够表达干扰序列的病毒奠定基础。方法:通过已经合成的pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo干扰质粒载体,进行限制性内切酶Mlu酶切,将干扰片段克隆入线性质粒pAAV-MCS中,构建具有表达沉默E2F3基因的RNA干扰穿梭质粒。通过Bgl Ⅱ及Mlu单酶切,BamH1和HandⅢ双酶切、PCR鉴定及基因片段序列分析验证构建是否成功。结果:pAAV-siE2F3线性化后,片段大小约6 300bp;以Mlu为两边酶切位点设计的引物对重组质粒进行PCR,可获得的产物大小1 700bp;应用ITR专用引物进行重组质粒的PCR后证实本研究所构建的重组质粒ITR片段存在,大小约3 500bp,上述指标均与预期设计结果相符。基因测序结果表明插入序列无基因突变,序列完整。结论:穿梭质粒载体的成功构建,为进一步包装能够表达针对E2F3基因干扰序列的腺相关病毒,进一步研究E2F3基因在肿瘤中的功能奠定基础。
- 胡海龙韩瑞发孙岩刘利维任海林梁恩利王春阳吴长利
- 关键词：RNAIE2F3
- 早期生长反应因子-1及乙酰肝素酶在膀胱移行细胞癌中的表达及意义被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨早期生长反应因子(Egr)-1与乙酰肝素酶(heparanase)蛋白在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达情况及相关性。方法:采用免疫组织化学SABC法检测58例BTCC组织及10例正常膀胱黏膜组织的Egr-1蛋白、heparanase的表达情况,并分析两者表达情况与BTCC临床病理特征的关系,以及两者在BTCC中表达的相关性。结果:Egr-1蛋白和heparanase蛋白在10例正常膀胱黏膜组织中不表达,在BTCC组织中阳性表达率分别为70.69%(41/58)和58.62%(34/58)。Egr-1蛋白及heparanase蛋白阳性表达率在不同年龄、性别、肿瘤大小及数目的患者之间差异无统计学意义(P>0.05);不同病理分级及临床分期患者Egr-1蛋白及heparanase蛋白表达率差别有统计学意义(P<0.01)。在BTCC中Egr-1蛋白与heparanase蛋白表达呈正相关(r=0.3875,P<0.01)。结论:Egr-1及heparanase蛋白的高表达在BTCC的发生、发展中起重要作用,与非肌层浸润型膀胱癌进展为肌层浸润型膀胱癌过程相关。
- 庄士超白铁男韩瑞发胡海龙
- 关键词：膀胱肿瘤乙酰肝素酶
- 膀胱移行细胞癌E2F3、miR-17-5p、miR-20a的表达及相关性分析被引量：3
- 2011年
- 目的检测E2F3、miR-17-5p、miR-20a在膀胱癌中的表达情况,分析E2F3与miR-17-5p、miR-20a之间是否存在关联性。方法荧光定量RT-PCR法检测不同病理分级膀胱移行细胞癌组织和细胞系5637、T24中miR-17-5p、miR-20a和E2F3基因的表达,Western blot检测E2F3蛋白的表达。结果与正常膀胱黏膜比较,膀胱移行细胞癌组织及5637、T24细胞系中E2F3、miR-17-5p和miR-20a均高表达(P<0.05)。E2F3表达随着病理分级的升高逐步增多,miR-20a表达随病理分级的升高有降低趋势。5637细胞系相对T24细胞系高表达E2F3(P<0.05)。结论膀胱移行细胞癌中miR-17-5p、miR-20a和E2F3均高表达,miR-20a和miR-17-5p的表达与E2F3的增高密切相关。
- 任海林孙岩李世斌韩瑞发
- 关键词：膀胱肿瘤E2F3
