国家自然科学基金(81100802)
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
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- LINGO-1基因沉默对自身免疫性脑脊髓炎小鼠运动功能的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨沉默LINGO-1基因表达对自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠运动功能的影响.方法 通过MOG35-55诱导雌性C57/BL6小鼠建立EAE小鼠模型.将EAE小鼠（105只）完全随机分为5组：A组（21只）：侧脑室注入5μl滴度为5×109 Tu/ml编码LINGO-1shRNA的慢病毒载体（LV/LINGO-1-shRNA）;B组（21只）：侧脑室注入5μl滴度为5×10s Tu/ml LV/LINGO-1-shRNA;C组（21只）：侧脑室注入5μl滴度为5×107 Tu/ml LV/LINGO-1-shRNA;D组（21只）：侧脑室注入5μl无义序列的LVCON053;E组（21只）：未治疗组.动态观察干预后不同时间点小鼠神经功能评分情况及LINGO-1蛋白表达水平,并行髓鞘快蓝染色了解各组髓鞘脱失情况.结果 侧脑室注射LV/LINGO-1-shRNA组EAE小鼠脑组织内LINGO-1蛋白表达从干预后第7天起可见明显下调,其中以B组和C组下调最明显（1.99±0.13,2.08±0.10,P＜0.05,P＜0.01）.从第7天开始,相比较于D组和E组,A组、B组和C组运动功能评分有不同程度地下降[（3.11 ±0.13）分,（2.42 ±0.13）分,（2.96 ±0.10）分比（3.56 ±0.15）分,（3.87 ±0.12）分,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05].30 d时A组和B组髓鞘密度明显高于未治疗组（0.72±0.09,0.83 ±0.11比0.56±0.10,P＜0.05,P＜0.01）.结论 侧脑室注射LV/LINGO-1 shRNA是一种沉默EAE小鼠脑内LINGO-1表达的有效方式.LINGO-1下调可改善EAE小鼠运动功能及促髓鞘修复,但效果并不随LV/LINGO-1-shRNA剂量增加而增强.
- 郭守刚张杰汪春娟杜怡峰
- 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎LINGO-1基因沉默髓鞘
- NT-3基因修饰的嗅鞘细胞移植对自身免疫性脑脊髓炎大鼠神经修复及功能恢复的影响被引量：4
- 2015年
- 目的探讨神经营养因子-3（NT-3）基因修饰的嗅鞘细胞（OECs）对自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠神经修复及运动功能恢复的促进作用。方法构建Lewis大鼠EAE模型，采用完全随机化法分为对照组、OECs组及OECs-NT-3组，每组20只，分别将生理盐水、OECs、OECs-NT-3移植入大鼠侧脑室内，每日进行神经功能缺损评分（NDS）评估大鼠肢体功能恢复情况，应用免疫组织化学检测及辣根过氧化物酶（HRP）逆行示踪技术对EAE神经纤维修复进行形态学观察。结果细胞移植后，OECs-NT-3组大鼠神经功能评分明显低于OECs组，差异有统计学意义（P〈0．05）；第28天，大鼠体内OECs-NT-3存活数量较多，可向病灶远端扩散、迁徙；OECs-NT-3组单位面积内的神经纤维数目[第28天，（38．8±3．4）个]明显高于OECs组[第28天，（32．5±2．8）个]（P〈0．05）；OECs-NT-3组HRP标记的神经元数目多于OECs组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论NT-3基因修饰的OECs可在EAE大鼠体内存活、迁移，并可促进神经纤维再生，减轻皮质神经元的逆行性损伤，改善EAE大鼠的运动功能。
- 郭守刚汪春娟董泗芹丛琳刘光云
- 关键词：神经营养因子3嗅鞘细胞脑脊髓炎自身免疫性
- 17β-雌二醇对解聚素金属蛋白酶9表达水平的影响被引量：1
- 2013年
- 目的研究17β-雌二醇对解聚素金属蛋白酶9（ADAM9）表达水平的影响。方法应用盐析法提取人类基因组DNA，扩增ADAM9基因启动子目的片断，构建表达ADAM9启动子的报告基因质粒。应用脂质体转染法，分别转染人人神经母细胞瘤细胞SK．N—SH、人胚肾细胞HEK293和宫颈癌细胞HeLa内。17β-雌二醇处理各组细胞后，检测ADAM9启动子转录效率。结果成功扩增了ADAM9启动子区1676bp目的片段，构建了ADAM9启动子报告基因质粒pGL．ADAM9，瞬时转染入细胞内。17β-雌二醇处理SK_N．SH细胞后，ADAM9启动子转录活性上升至31．250＋1．328，较处理前的15．471＋1．256增加约2倍，差异有统计学意义（P〈0．05）。HEK293细胞内，ADAM9启动子转录活性上升至13．499＋0．866，较处理前的8．513＋1．356增加约1．6倍，差异有统计学意义（氏0．05）。HeLa细胞中没有观察到1713．雌二醇对ADAM9启动子转录活性的影响。结论17B．雌二醇能上调人ADAM9启动子的表达水平，是ADAM9基因表达的激活剂。
- 丛琳沈彬满晓
- 关键词：阿尔茨海默病17Β-雌二醇
- 5α-双氢睾酮对解聚素金属蛋白酶9表达水平的影响
- 2013年
- 目的研究5α-双氢睾酮(5α-DHT)对解聚素金属蛋白酶9(ADAM9)表达水平的影响。方法应用盐析法提取人类基因组DNA,扩增ADAM9基因启动子区目的片断,构建表达ADAM9启动子的报告基因质粒。应用脂质体转染法,分别转染入人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)、人前列腺癌细胞(LNCaP)和人宫颈癌上皮细胞(HeLa)内。5α-DHT处理各组细胞后,检测ADAM9启动子转录效率。结果我们扩增了ADAM9启动子区1676bp目的片断,构建了ADAM9启动子报告基因质粒pGL-ADAM9,将其瞬时转染入上述细胞内。5α-DHT干预细胞后,ADAM9启动子转录活性与非处理组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论上述三种细胞中,5α-DHT对ADAM9启动子表达水平无显著影响。
- 沈彬杜怡峰相媛媛丛琳
- 关键词：阿尔茨海默病启动子
