国家科技重大专项(2009ZX09103-696)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 相关作者：边六交妙亮冀胥徐立华张迪更多>>
- 相关机构：西北大学西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 可溶型非融合血管生长抑制因子Kringle 5基因工程菌发酵培养和诱导表达条件的优化被引量：1
- 2012年
- 在实验室试管培养条件下优化了基因工程菌E.coli BL21(DE3)pET15b/K5发酵产可溶型非融合血管生长抑制因子Kringle 5的培养基和诱导表达条件。经菌体干重测定和SDS-PAGE检测,确定最佳培养基(g.L-1)为:胰蛋白胨10.0,酵母提取物5.0,NaCl 10.0,葡萄糖6.0,NH4Cl 2.6,NaH2PO45.0,Na2HPO46.0;优化的诱导表达条件为:诱导剂浓度0.01mmol.L-1,诱导时间6h,诱导温度37℃,摇床转速220r.min-1。在优化的培养基和诱导表达条件下,菌体干重为1.8g.L-1,Kringle 5表达量为360mg.L-1,占总蛋白含量的20%,与基础LB培养基相比,Krin-gle 5表达量提高了1.18倍。
- 马晓娟蔚萍妙亮边六交
- 关键词：发酵培养基基因工程菌
- β2-肾上腺素受体色谱固定相制备新方法及三子养亲汤靶向活性成分筛选
- 呼吸系统疾病是重大慢性非传染性疾病,具有发病率高、药物依赖性大和反复发作等特点,迫切需要新技术和新方法,研发高效创新药物,以实现该类疾病的有效防治。中药作为呼吸系统疾病的主要防治手段,其活性成分筛选一直是中药创新药物研发...
- 王静
- 关键词：活性成分筛选三子养亲汤
- 人纤溶酶原K5联合化疗和放疗对小鼠S180实体瘤的抑制作用被引量：1
- 2014年
- 目的观察人纤溶酶原K5联合化学及放射治疗对小鼠S180实体瘤的抑制作用。方法将小鼠随机分为7组,阴性对照组、化疗组/放疗组、艾迪组+化疗组/甘氨双唑钠+放疗组、化疗/放疗+K5大剂量组、化疗/放疗+K5中剂量组、化疗/放疗+K5小剂量组及K5中剂量组,连续给药10d,观测肿瘤的大小,计算抑瘤率。结果 K5联合化学治疗可以明显增强其抑制肿瘤生长的效果,并有一定的剂量依赖性,而K5联合放射治疗可以增强其抑制肿瘤生长的效果。结论 K5可能为一种新型的治疗肿瘤的药物,但是K5与化学及放射联合治疗的具体机制尚待进一步研究。
- 张迪边六交张李婷封卫毅
- 关键词：S180实体瘤血管生成
- 可溶型三聚体血管生长抑制因子Kringle 5的克隆,表达,纯化及活性研究被引量：3
- 2011年
- 血管生长抑制因子Kringle 5是目前发现的抑制血管内皮细胞增殖和肿瘤生长的活性最强的纤溶酶原片段,特异性高而毒副作用小,在肿瘤的治疗方面具有潜在的巨大价值和广阔的应用前景。根据K5基因的序列设计PCR引物,通过PCR从已有的克隆载体扩增出人纤维蛋白溶酶原的K5部分基因,将K5基因克隆入原核表达载体pET15b,经序列测定,成功构建了pET15b-K5非融合表达载体。将重组载体导入大肠杆菌中IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白主要以可溶形式存在于菌体中,破碎后上清通过阳离子交换层析,纯化获得纯度大于95%的目标蛋白,脱盐后对分子量测定推测形成了三聚体。通过鸡胚绒毛尿囊膜法证明蛋白产物对鸡胚绒毛尿囊膜血管增生有一定的抑制作用。
- 妙亮徐立华冀胥边六交
- 关键词：KRINGLE克隆
