国家自然科学基金(30400211)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部“211”工程更多>>
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- 高渗状态下肾脏COX2表达的基因调控
- 2006年
- 目的本研究旨在阐明核转录因子C/EBPβ和NFκB是否协同作用影响高渗状态下COX2的基因表达。方法体外培养肾髓间质细胞(RMICs),通过病毒转导或质粒转染技术将体外构建的COX2基因突变载体转入培养细胞,经高渗培养不同时间后,采用免疫印迹、荧光素酶报告基因活性检测等方法观察培养细胞COX2蛋白表达及活性的改变,同时应用染色质免疫沉淀分析法观察COX2基因与C/EBPβ、NFκB结合能力的改变。结果免疫印迹显示,高渗刺激能明显提高对照组COX2蛋白表达,应用突变序列IκBm阻断NFκB活性后COX2表达明显下降,应用突变序列C/EBP-βP20阻断C/EBPβ亦能显著降低COX2表达,但同时运用突变序列C/EBP-βP20和IκBm无法使COX2表达进一步下降。然而,将野生型、含NFκB或C/EBPβ结合位点突变的COX2启动子萤火虫荧光素酶报告基因的重组质粒转染至RMICs,高渗培养24h后显示:高渗刺激能显著增加野生型组COX2荧光素酶的活性,NFκB位点突变无法阻断该作用,而C/EBPβ结合位点突变却能完全抑制COX2高活性。进一步应用染色质免疫沉淀分析研究显示,高渗刺激能显著增加NFκB(P65)或C/EBPβ与COX2基因的结合,并呈时间依赖性;NFκB结合位点突变不能消除高渗诱导的NFκB(P65)与COX2基因的结合增强,但在NFκB和C/EBPβ结合位点同时突变组该作用被阻断。结论在NFκB活化COX2基因转录过程中需要另一个核转录因子C/EBPβ的参与,C/EBPβ途径在高渗诱导肾脏内髓间质细胞表达COX2过程中具有重要作用。
- 卢燕雯陈靖顾勇林善锬
- 关键词：环加氧酶-2核转录因子ΚB
- 高盐饮食对自发性高血压大鼠肾髓质环氧化酶2表达的影响被引量：2
- 2007年
- 目的观察自发性高血压大鼠（SHR）肾髓质环氧化酶2（COX2）的表达以及不同盐负荷状态下COX2的变化。方法6周龄SHR大鼠及其对照Wistar-Kyoto（WKY）大鼠各12只，随机分为低盐组和高盐组（WKY-LS组，WKY-HS组，SHR-LS组，SHR-HS组），分别给予高盐（含8％NaCl）或低盐（含O．04％NaCl）饮食3d。观察基础状态及不同盐负荷前后大鼠尾动脉血压、24h尿量（UV）、尿钠（UNa）以及COX2代谢物6k．PGFlα排泄情况。应用免疫组化和Western印迹的方法检测肾髓质COX2蛋白表达。结果给予不同盐负荷3d后，SHR-Hs组血压显著升高[（12．59±5．13）比（11．94±3．76）mmHg，P〈0．05]。基础状态及不同盐负荷状态下，SHR大鼠24hUV、UNa排泄与WKY大鼠相比均显著下降（P均〈O．05）。与各自基础状态相比，低盐饮食后两种大鼠的UV和UNa排泄显著降低；高盐饮食后则显著增加（P均〈O．05）。SHR和WKY大鼠尿COX2代谢物6k-PGFlα的排泄对盐负荷的反应也类似，高盐组均较低盐组显著增加（P〈0．05），但同样盐负荷状态下两组之间差异无统计学意义。基础状态下及低盐饮食SHR与WKY大鼠肾髓质COX2表达差异无统计学意义；给予高盐饮食后WKY大鼠肾髓质COX2表达增加2．06倍，SHR大鼠增加1．87倍，但两种大鼠之间差异无统计学意义。结论SHR大鼠肾脏水盐排泄功能受损，高盐饮食后血压进一步升高，水钠潴留，同时伴有肾髓质COX2表达升高，但不同盐负荷对SHR大鼠肾髓质COX2表达的影响与WKY大鼠相同。提示肾髓质COX2参与了水盐代谢的调节，且在SHR大鼠中表达正常，但并非该动物模型高血压形成及水钠潴留的关键因素。
- 王少清陈靖尤莉张力胤陶琳张敏敏周江华郝传明顾勇
- 关键词：高血压近交SHR环氧化酶2钠潴留
