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树鼩原代肝细胞分离培养条件优化: 2013年; 目的:通过优化树鼩原代肝细胞的分离及体外培养条件,获得能够在体外进行长期稳定培养的树鼩原代肝细胞。方法:优化肝脏灌流液、酶消化液及细胞离心速度等原代肝细胞分离条件,培养细胞密度和培养基配方等原代肝细胞培养条件,用台盼蓝染色细胞计数法、MTT检测法及EDU标记法评价所分离、培养树鼩原代肝细胞的数量、活力及生长状态。结果:添加葡萄糖的D-Hank’s液作为灌流液,含有0.005 mol/L CaCl2及12 ×104 units/L胶原酶IV的D-Hank’s液作为消化液,37℃消化15~20分钟,所获得细胞梯度离心洗涤三次,可获得最高得率及活力的原代肝细胞。在Williams’ ME基础培养基中添加生长因子(10 ng/ml),葡萄糖(0.25%)、ITS-X(1 ×multiple)、1%青链霉素及2% DMSO时可以维持树鼩原代肝细胞体外稳定增殖生长达42天。结论:树鼩原代肝细胞分离与体外培养条件的优化,可大大提高细胞得率,延长细胞稳定增殖生长时间,有助于以树鼩为模型研究肝细胞生理代谢特性及嗜肝病毒感染机制。; 薛兰洁冯悦徐明孙晓梅张华堂代解杰夏雪山; 关键词：树鼩原代肝细胞

二株不同基因型树鼩呼肠孤病毒的分离和鉴定被引量：3: 2015年; 目的从腹泻树鼩的粪便样本中分离和鉴定病毒。方法树鼩腹泻粪便样本分别接种Vero、LLCMK2和KMB17细胞,经连续传代,观察记录细胞病变,并对培养上清进行透射电镜检查、病毒RNA-PAGE电泳分析、轮状病毒鉴别筛查、S1全长基因片段扩增和生物信息学分析。结果树鼩腹泻粪便样品在KMB17、Vero和LLC-MK2细胞上经连续3代次传代后,均能产生细胞病变。经电镜检查、病毒RNA-PAGE电泳分析和轮状病毒鉴别筛查,推测其为呼肠孤病毒。病毒基因组全长S1基因扩增、序列测定和分析结果表明,KMB17培养上清中获得的病毒与I型原型株T1L同源性最高,核苷酸和氨基酸同源性分别为85%和90%,因此该病毒定义为呼肠孤病毒I型。而LLC-MK2和Vero细胞上清中的病毒S1基因与III型原型株T3D核苷酸和氨基酸同源性分别为85%和92%,因此为呼肠孤病毒III型。结论对今后树鼩和其他宿主呼肠孤病毒的分离鉴定有一定的指导意义。; 刘建生陶玉芬李晓菲李超李晓飞孙晓梅代解杰刘红旗; 关键词：树鼩基因型 S1基因血清型

野生树鼩肠道蠕虫感染调查及分析被引量：5: 2015年; 目的调查野生树鼩(Tupaia belangeri Chinensis)感染肠道蠕虫的主要种类并进行鉴定,为今后树鼩寄生虫检测提供形态学参考,为实验树鼩寄生虫控制提供依据。方法采集203只野外来源的树鼩新鲜粪便,虫卵采用常规粪便直接涂片以及孵化后显微镜观察;绦虫采用压片、固定染色,以及线虫经透明后体视镜观察,虫卵与成虫相对应鉴定。结果野生树鼩肠道蠕虫的总感染率为75.86%,主要感染种类有3种,经鉴定为长膜壳绦虫、奇口线虫和粪类圆线虫,感染率分别为27.67%,30.06%和51.52%。三种蠕虫的混合感染率为4.55%。两种线虫虫卵在树鼩粪便中多为含胚胎形态。结论野生树鼩肠道蠕虫的感染率较高。对野外引入的新种源必须隔离检疫,进行针对性的药物治疗,才能有效地控制肠道寄生虫病的传播。; 孙晓梅仝品芬匡德宣陈玲霞王文广陆彩霞代解杰; 关键词：树鼩肠道蠕虫粪类圆线虫

IL28B基因在HCV感染中的作用和应用前景被引量：5: 2013年; 丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是造成慢性肝炎、肝硬化乃至肝癌的主要原因之一,严重威胁人类健康。宿主因素可影响HCV的感染、治疗效果和自然清除率。近期,欧美多个研究组对自愈和经过治疗的慢性丙型肝炎患者进行了全基因组关联分析(Genome-wide association study,GWAS),证明IL28B基因(编码IFN-λ3)的单核苷酸多态位点(Single nucleotide polymorphism,SNP)影响HCV患者的治疗效果和自然清除率。IFN-λ3通过与其异源二聚受体IFN-λR1·IL-10R2结合进行信号传导,上调干扰素刺激基因的表达,进而发挥抗病毒、抑制肿瘤细胞生长以及免疫调节等生物学功能,有望成为一种新型抗HCV药物。虽然IL28B基因SNP影响病毒清除的机制尚未清楚,但其关联分析结果可作为HCV患者临床治疗的辅助指导,对HCV患者进行IL28B基因遗传易感和功能研究将有助于该病的预防和治疗。; 马柯张阿梅夏雪山; 关键词：丙型肝炎

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