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江苏省自然科学基金(BK2007092)

作品数:6 被引量:7H指数:1
相关作者:许文荣钱晖朱伟王兴忠阴晴更多>>
相关机构:江苏大学江苏大学附属医院苏州大学附属第三医院更多>>
发文基金:江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏省医学领军人才基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 6篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 6篇医药卫生

主题

  • 7篇细胞
  • 6篇干细胞
  • 5篇间质
  • 4篇人脐带间质干...
  • 4篇脐带
  • 4篇脐带间质干细...
  • 4篇基因
  • 2篇转染
  • 2篇腺病
  • 2篇腺病毒
  • 2篇腺病毒载体
  • 2篇间质干细胞
  • 2篇分化
  • 2篇白血
  • 2篇白血病
  • 2篇病毒载体
  • 1篇心肌
  • 1篇心肌样细胞
  • 1篇融合基因
  • 1篇生物学

机构

  • 7篇江苏大学
  • 4篇江苏大学附属...
  • 1篇苏州大学附属...
  • 1篇江苏大学附属...

作者

  • 6篇朱伟
  • 6篇许文荣
  • 5篇钱晖
  • 3篇阴晴
  • 3篇周洪兴
  • 3篇司煜安
  • 3篇王兴忠
  • 3篇周忠海
  • 3篇徐静
  • 2篇毛飞
  • 2篇张蕾蕾
  • 2篇乔纯
  • 2篇李继刚
  • 2篇陈圆
  • 1篇赵亚娟
  • 1篇钱茜
  • 1篇许晓蒙
  • 1篇邱国强
  • 1篇严永敏
  • 1篇孙靖

传媒

  • 3篇临床检验杂志
  • 3篇江苏大学学报...
  • 1篇华东六省一市...

年份

  • 1篇2011
  • 1篇2010
  • 5篇2008
6 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
TNFα-Tumstatin融合基因腺病毒载体的构建及其在人脐带间质干细胞中的表达被引量:1
2008年
目的:构建携带绿色荧光蛋白的TNFα-Tumstatin融合基因腺病毒表达载体,转染人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)。方法:设计含有GM-CSF信号肽序列和BglⅡ及HindⅢ酶切位点的引物,PCR扩增TNFα-Tumstatin,将扩增产物亚克隆到穿梭质粒pAdTrack-CMV上,重组穿梭质粒经PmeⅠ线性化后转化含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183中同源重组。筛选获得含有融合基因的重组腺病毒质粒,酶切鉴定并测序。重组病毒质粒用PacⅠ酶切线性化后转染293A细胞,经过包装、扩增后感染hUCMSCs并检测细胞内融合基因的表达。结果:重组腺病毒质粒经PCR和PacⅠ酶切鉴定,证实含有TNFα-Tumstatin融合基因,测序结果和设计片段的序列一致。重组腺病毒感染的hUCMSCs表达绿色荧光蛋白和融合基因。结论:成功构建了TNFα-Tumstatin融合基因的腺病毒表达载体,能高效率感染hUCMSCs,为进一步研究融合基因修饰的hUCMSCs抗肿瘤效应奠定了基础。
周忠海许文荣朱伟乔纯王兴忠陈圆司煜安徐静周洪兴张蕾蕾李继刚钱晖
关键词:腺病毒载体融合基因细胞转染
脐带间质干细胞心肌样分化中干细胞标志物的表达
2011年
目的:探讨人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hucMSCs)在体外特定条件下是否可以定向分化为心肌样细胞及干细胞标志物的表达变化。方法:采用脐带组织块贴壁培养方法分离人脐带间质干细胞,用第2代hucMSC进行体外心肌细胞诱导分化;采用RT-PCR、透射电镜等鉴定心肌细胞,流式细胞术、实时荧光定量PCR及蛋白质印迹分析干细胞相关基因及蛋白表达。结果:RT-PCR显示诱导组细胞转录心肌钙蛋白T、β-肌球蛋白重链、心房利钠多肽水平增加;在透射电镜下,诱导后细胞具有条索状肌丝结构;流式细胞仪检测未见细胞表面标志改变;而实时荧光定量PCR及蛋白质印迹显示干细胞相关基因及蛋白Nanog、Oct4、Sox2、Sall4在5-氮胞苷(5-azacytidine,5-Aza)诱导后的hucMSCs中表达显著下降。结论:人脐带间质干细胞体外经5-氮胞苷诱导可定向分化为心肌样细胞,其分化可能与干细胞相关基因及蛋白表达下调有关,为深入研究hucMSCs心肌分化机制奠定了实验基础。
钱茜徐哲史云燕沈俐孙靖张徐毛飞朱伟钱晖许文荣
关键词:人脐带间质干细胞心肌样细胞分化干细胞标志物
髓系白血病干细胞培养及其特征鉴定被引量:1
2008年
目的对急性髓系白血病(AML)骨髓单个核细胞进行体外培养,获得白血病干细胞并进行特征鉴定。方法体外培养AML患者的骨髓单个核细胞,观察其形态学特征、长期存活及增殖特性,用染色体分析和流式细胞分析技术研究其核型和细胞表面标志,用RT-PCR技术分析其nucleostemin、Bmi-1、ABCG2、prominin1、OCT4、Nanog等干细胞相关基因的表达。结果培养的白血病细胞呈集落样悬浮生长,在体外能存活12个月以上并保持增殖特性。染色体核型呈亚四倍体。表达上述干细胞相关基因。细胞表面表达CD38、CD29、CD44和HLA-DR,弱表达CD19和CD71,不表达CD34、CD13、CD2和CD105。结论经培养获得的白血病细胞,具备肿瘤干细胞的一些特征,提示为白血病干细胞。
周忠海许文荣王兴忠邱国强谢晓宝周洪兴钱晖阴晴朱伟徐静司煜安
关键词:白血病干细胞基因表达
慢病毒转染大鼠骨髓间质干细胞条件优化及其性质研究
目的 建立慢病毒载体稳定转染大鼠骨髓间质干细胞的方法并研究转染后细胞性质.方法 采用基于HIV-1的VSV-G假膜化的慢病毒载体转染大鼠骨髓来源的间质干细胞;研究不同转染条件包括感染复数、感染方式、感染次数对转染效率的影...
张徐朱伟王梅曹慧玲徐学静钱晖许文荣
关键词:间质干细胞基因治疗慢病毒转染
hHGF腺病毒载体的构建及其在人脐带间质干细胞中的表达
2010年
目的:构建人重组肝细胞生长因子(human hepatocyte growth factor,hHGF)基因腺病毒载体(Ad-HGF),转染人脐带间质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hucMSCs),为转基因治疗提供实验基础。方法:设计含有SalⅠ及XbaⅠ酶切位点的引物,PCR扩增hHGF,将扩增产物克隆到带有绿色荧光蛋白(green fluorescenceprotein,GFP)标记的pAdTrack-CMV穿梭质粒上。重组穿梭质粒经PmeⅠ线性化后,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183中同源重组,筛选获得含有hHGF的重组腺病毒质粒,PCR、酶切鉴定并测序。重组病毒质粒用PacⅠ酶切线性化,脂质体转染293A细胞,经3轮扩增,制备高效表达的AdGFP/HGF,并转染hucMSCs。结果:重组腺病毒质粒经PCR和SalⅠ,XbaⅠ酶切鉴定,证实含有HGF基因,测序结果和设计片段的序列一致。荧光显微镜下发现293A细胞发光率几乎为100%,感染的hucMSCs亦可表达绿色荧光蛋白。结论:成功构建了hHGF腺病毒表达载体,并获得高滴度的病毒,能高效感染hucMSCs,为后续研究奠定了基础。
陈圆李汉华赵亚娟吴晓丹王梅许晓蒙谢颖许文荣
关键词:肝细胞生长因子人脐带间质干细胞腺病毒载体
白血病细胞、多种肿瘤细胞及胃癌组织中pokemon基因的定量检测被引量:1
2008年
目的建立检测pokemon基因表达的实时荧光定量PCR的方法,用以研究pokemon在白血病细胞、多种肿瘤细胞株及胃癌组织中的表达水平。方法通过RT-PCR、T-A克隆、real-time PCR等方法精确测定并比较pokemon基因在白血病细胞、人结肠癌细胞株(SW480)、人胃癌细胞株(SGC)、人肺癌细胞株(LTEP)、人髓系白血病细胞株(U937)、人前列腺癌细胞株(PC3)、人宫颈癌细胞株(HELA)、人内皮细胞株(UEVC-304)、健康人外周血单个核细胞(PBMC)、胃癌组织中的表达水平。绘制pokemon基因real-time PCR的标准曲线。结果急性淋巴细胞白血病(ALL)中pokemon的表达显著高于急性粒细胞白血病(AML)和慢性粒细胞白血病(CML)及健康人PBMC(P<0.05);SW480中的表达量明显高于SGC、LTEP、U937、PC3、HELA和UEVC-304(P<0.05);胃癌组织表达量高于胃癌旁组织,阳性率为5/7。结论建立的测定pokemon基因表达的real-timePCR方法稳定、准确,pokemon基因可以作为某些肿瘤的一个新的靶点,其表达水平的检测可作为判断某些肿瘤发生的参考指标。
徐静许文荣钱晖朱伟李继刚周洪兴周忠海阴晴司煜安张蕾蕾
关键词:POKEMON肿瘤实时定量PCR白血病
人脐带间质干细胞的分离纯化及生物学特性鉴定被引量:4
2008年
Objective To isolate mesenchymal stem cells(MSCs)from human umbilical cord and investigate the basic biological characteristics.Methods Human umbilical cord mesenchymal stem cells(hUCMSCs)were separated from culture of tissue adherence and the biological characteristics,including morphologic appearance,surface antigens,growth curve,cell cycle,cytogenetic features,differentiation potential and gene expression,were investigated.Results After two weeks of incubation,fibroblast-like cells appeared to be dominant.During the second passage the cells presented a homogeneous population of spindle fibroblast-like cells.Flow cytometry analysis revealed that CD29,CD44,CD95,CD105 and HLA-I were expressed on the surface of cells,but there was no expression of hematopoietic lineage markers,e.g.,CD34,CD38,CD71 and HLA-DR.Chromosomal analysis showed the cells kept normal karyotype.The cell cycle at the third passage showed the percentage of G0/G1,G2/M and S phase were 88.86%,5.69% and 5.45% respectively.The assays in vitro demonstrated the cells exhibited multipotential differentiation into osteogenic and adipogenic cells.Both BMI-1 and nucleostemin genes,expressed in adult MSCs from bone marrow,were also expressed in hUCMSCs.Conclusion Here we show the umbilical cords may be a novel alternative source of human MSCs for experimental and clinical applications,which almost have the same biological characteristics of human adult MSCs.
乔纯许文荣朱伟胡嘉波钱晖阴晴杨欢王兴忠严永敏毛飞陈永昌
关键词:间质干细胞脐带分化
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