国家教育部博士点基金(200605330210)
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 相关作者：胡建安黄云武越熊敏如王静更多>>
- 相关机构：中南大学湖南省劳动卫生职业病防治所富阳市疾病预防控制中心更多>>
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- 脂氧合酶介导的苯并(a)芘活化及所致DNA损伤
- 目的初步探讨细胞内5-LOX对苯并(a)芘的代谢活化情况,试图为脂氧合酶(LOX)作为外源化学物氧化代谢的替代途径提供进一步依据。方法在体外酶系统用分光光度法检测LOX介导的苯并(a)芘氧化产物,用高效液相色谱测DNA加...
- 陈昌可胡建安黄云武越熊敏如
- 关键词：5-脂氧合酶苯并(A)芘细胞毒性DNA损伤
- 文献传递
- 脂氧合酶介导的苯并（a）芘活化及DNA损伤被引量：1
- 2013年
- 目的 探讨细胞内5-脂氧合酶（5-LOX）对苯并（a）芘（B[a]P）的代谢活化及DNA损伤的影响,为脂氧合酶（LOX）作为外源化学物氧化代谢的替代途径提供进一步依据.方法 体外酶系统实验：B（a）P在含有大豆脂氧合酶（SLO）的酶体系中反应,用分光光度法检测其氧化产物;酶系统中加入DNA,用高效液相色谱仪检测其DNA加合物.细胞实验：人支气管上皮细胞（HBE）染毒24 h,B[a]P剂量分别为4、8、16、32、64、128 μmol/L,抑制剂（AA-861）、萘普生和α-萘黄酮分别为0.1、1、10 μmol/L,用免疫印迹法（western-blot）法检测各组5-LOX蛋白表达情况;用流式细胞计数及单细胞凝胶电泳实验检测各组的细胞毒性及DNA损伤情况;同时,检测特异性5-LOX抑制剂（AA-861）及其他特异性酶抑制剂（萘普生和α-萘黄酮）对5-LOX蛋白表达和对DNA损伤的影响.结果 在过氧化氢（H2O2）参与下,SLO可以协同氧化B[a]P,氧化生成B[a]P-7,8-环氧化物,在一定范围内呈剂量效应关系.GTP能够抑制SLO介导的B[a]P氧化,其IC50为0.46 mg/L.SLO介导B[a]P活化后,生成新的产物,出现一明显新增峰,但本次在体外未能检测到与DNA形成加合物.随着B[a]P染毒浓度的增加,HBE细胞存活率逐渐下降,AA-861和萘普生抑制后,细胞存活率上升,差异均有统计学意义（P＜0.05）.B[a]P可以使HBE内5-LOX蛋白表达增加,且表达量随B[a]P浓度增加而增加,5-LOX抑制剂AA-861对5-LOX蛋白表达基本无影响;流式细胞计数及单细胞凝胶电泳实验显示,各B[a]P染毒组DNA损伤指标随着B[a]P浓度增加而加重,与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.与64 μmol/L B[a]P组比较,加入抑制剂AA-861、萘普生和α-萘黄酮后DNA损伤程度逐渐减轻,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 在HBE内,B[a]P可能主要通过5-LOX介导的协同氧化,形成亲电子物质与DNA结合,使HBE产生DNA损伤,AA-861可以明显抑制该反应.
- 陈昌可黄云武越王静胡建安
- 关键词：5-脂氧合酶细胞毒性DNA损伤
- RNA干扰在氧化代谢酶功能研究中的应用进展
- RNA干扰(RNAi)是真核细胞内某些双链RNA能高效、特异地结合并降解互补mRNA,阻断其基因的表达,介导序列特异的基因沉默,导致细胞出现特定基因表达缺失的表型。RNAi技术作为抑制策略具有特异性、选择性和高效性等优点...
- 王静胡建安
- 关键词：RNA干扰细胞色素P450酶系统脂氧合酶
- 文献传递
- 氧化代谢酶对化学致癌物的活化与致癌作用
- 2010年
- 许多化学致癌物需要经代谢活化形成能与DNA等生物大分子作用的终致癌物,才能发挥致癌效应。癌症的发生是多基因参与多阶段发展的复杂过程。终致癌物可在癌症形成的各个阶段引起DNA损伤并启动基因突变。除细胞色素P450和前列腺素合成酶是参与致癌物活化最常见的途径外,脂氧合酶也与这些化学物的致癌作用有关。
- 杨凤胡建安
- 关键词：脂氧合酶化学致癌物代谢活化致癌作用
- 人支气管上皮细胞5-脂氧合酶介导4-氨基联苯的活化及DNA损伤被引量：2
- 2011年
- 目的探讨人支气管上皮(HBE)细胞内5-脂氧合酶(5-LOX)对4-氨基联苯(4-ABP)的氧化活化及所致DNA损伤,为LOX作为前致癌物氧化活化的代谢途径提供依据。方法①体外酶系统实验:4-ABP在含有大豆脂氧合酶(SLO)的体外酶体系中反应,用分光光度法检测体系中反应产物生成。②细胞实验:4-ABP 100～800μmol.L-1染毒HBE细胞,MTT法检测HBE细胞存活率;Western印迹法检测5-LOX蛋白表达;单细胞凝胶电泳检测DNA损伤。同时,检测特异性5-LOX抑制剂AA861对5-LOX蛋白表达和多种酶抑制剂对细胞存活率和DNA损伤的影响。结果在过氧化氢参与下,SLO可以协同氧化4-ABP,LOX抑制剂去甲二氢愈创木酸可抑制该协同氧化作用。4-ABP可以使HBE细胞内5-LOX蛋白表达增加,AA861对5-LOX蛋白表达没有影响;4-ABP 400μmol.L-1可以使HBE细胞产生明显的DNA损伤,彗星细胞的阳性率达47.7%(P<0.01),AA861和萘普生可以抑制该浓度4-ABP所致的DNA损伤,最大保护率分别为58.1%和21.7%。结论 4-ABP上调HBE的5-LOX蛋白表达。5-LOX可能通过介导4-ABP协同氧化,导致DNA损伤,这可能是4-ABP致癌的机制之一。
- 朱宏翔胡建安黄云武越熊敏如
- 关键词：药物协同作用DNA损伤
- 人支气管上皮细胞5-脂氧合酶表达与联苯胺的活化及细胞毒性的研究被引量：1
- 2009年
- 目的研究人支气管上皮（HBE）细胞内5-脂氧合酶（5-LOX）对联苯胺（BZD）的氧化代谢，为LOX作为细胞色素P450氧化代谢外源化合物的替代途径提供进一步的依据。方法体外酶系统实验：BZD在含有大豆脂氧合酶（SLO）的酶体系中反应，用分光光度法检测体系中反应产物。细胞实验：HBE细胞染毒24h（BZO剂量分别为100、200、500μmol／L，AA861剂量分别为0．3、3．0、30．0μmol／L），用Western-blot检测5-LOX蛋白表达；用单细胞凝胶电泳检测DNA损伤。同时，检测特异性5-LOX抑制剂（AA861）对5-LOX蛋白表达和对DNA损伤的影响。结果在过氧化氢参与下，SLO可以介导BZD氧化生成二亚胺联苯胺。最大反应速度（Vmax）值为1．42nmol／（min·nmol）SLO，BZD的米氏常数（Km）值为1．48mmol/L。LOX抑制剂去甲二氢愈创木酸可抑制该协同氧化作用。BZD可以使HBE细胞5-LOX蛋白表达增加，AA861对5-LOX蛋白表达无影响；BZO可以使HBE细胞产生明显的DNA损伤，AA861可以明显抑制BZD所致的DNA损伤，且有剂量-效应关系。结论5-LOX在HBE细胞内的蛋白表达可以受BZD的影响。HBE细胞的5-LOX可能通过介导BZD协同氧化，产生亲电子自由基，而与DNA结合，使HBE细胞产生DNA损伤，这可能是BZD致癌的机制之一；AA861可以明显抑制这种作用。
- 谭庆平胡建安黄云武越熊敏如
- 关键词：5-脂氧合酶上皮细胞DNA损伤
- RNA干扰在氧化代谢酶功能研究中的应用进展
- 2012年
- RNA干扰(RNAi)是真核细胞内某些双链RNA能高效、特异地结合并降解互补mRNA,阻断其基因的表达,介导序列特异的基因沉默,导致细胞出现特定基因表达缺失的表型。RNAi技术作为抑制策略具有特异性、选择性和高效性等优点,被用于特异性的沉默细胞色素P450酶、脂氧合酶、环氧化酶和单胺氧化酶等氧化代谢酶的基因,探讨这些酶对内、外源化学物的生物转化作用及其与某些疾病发生、发展和治疗的关系,发现了一些代谢酶的新功能,获得了对动脉粥样硬化、多囊卵巢综合征、肾病综合征以及多种癌症等疾病发生机制新的认识以及防治的新方法和新线索。
- 王静胡建安
- 关键词：RNA干扰细胞色素P450酶系统脂氧合酶
