海南省自然科学基金(310068)
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 相关作者：张家明孙雪飘弓淑芬黄猛许亚良更多>>
- 相关机构：中国热带农业科学院海南大学更多>>
- 发文基金：海南省自然科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 橡胶树内生沙雷氏菌脂肪酶基因SmLipase1的克隆和表达分析被引量：1
- 2019年
- 脂肪酶在洗涤剂、食品、纸浆以及生物柴油等多个工业领域被广泛应用。不同的应用领域对脂肪酶的酶学特性有不同的要求,因此挖掘脂肪酶基因资源具有重要意义。本研究报道从橡胶树内生菌Serratiamarcescens ITBB5-1中克隆得到一个脂肪酶基因,命名为Sm Lipase1,编码662个氨基酸,pI 4.82,能分泌脂肪酶到培养基中。构建重组表达载体pET22b-Sm Lipase-1,转化大肠杆菌菌株BL21(DE3)。本研究表明该转基因菌株能高效表达脂肪酶,并在平板培养基上形成较大的透明圈,转基因菌株发酵培养所获得的培养液酶活性达到26 U/mL。此外,该酶还具有催化油脂与甲醇反应生产脂肪酸甲酯的活性,在生物柴油领域具有一定的开发价值。
- 颜彦马帅孙雪飘弓淑芬张家明
- 关键词：脂肪酶橡胶树内生菌转酯化
- 紫萍营养繁殖过程的解剖观察被引量：1
- 2016年
- 以采自海南陵水的紫萍(Spirodela polyrhiza DW2501-4)为材料,观察紫萍的营养繁殖过程。紫萍DW2501-4培养在0.5倍Hoagland′s液体培养基中,先不断长出新的叶状体,随着营养物质的减少,长出休眠体进入休眠状态。休眠体经过4℃处理7 d后,可在含1%蔗糖的Hoagland′s固体培养基中重新萌发。为了进一步观察叶状体、类休眠体和休眠体的组织结构差异,以及休眠体萌发过程中组织结构的变化,制作了石蜡切片。观察结果显示:紫萍叶状体有数条叶脉,细胞中含少量的淀粉粒,表皮层以下有分层的气室,通常分上下两层,上层气室比下层气室小。类休眠体也有数条叶脉和少量气室,细胞中有较多淀粉粒。休眠体的细胞差异不明显,几乎没有气室,细胞内有大量的淀粉粒,部分细胞含有单宁;随着休眠体萌发,细胞中淀粉粒不断变小,同时分生组织分化出根和新的叶状体。
- 李兰芝张家明
- 关键词：营养繁殖叶状体石蜡切片
- 转基因大肠杆菌中β-胡萝卜素HPLC测定方法分析被引量：1
- 2012年
- 采用高效液相色谱法(HPLC)测定转基因大肠杆菌中β-胡萝卜素的含量。转基因大肠杆菌通过液体发酵后冷冻干燥,以丙酮/环己烷(1/1)组成的溶剂提取β-胡萝卜素,HPLC的流动相为乙腈与四氢呋喃梯度洗脱系统时,样品中的β-胡萝卜素得到很好的分离。当β-胡萝卜素的进样量在0.7～2.1μg范围时,其进样量与峰面积之间有良好的线性关系(R2=0.9997)。验证结果表明,该方法测定结果准确,能用来测定转基因大肠杆菌中β-胡萝卜素的含量。
- 吴晓鹏弓淑芬徐雪荣杨子贤严国明
- 关键词：高效液相色谱Β-胡萝卜素
- 一种高效提取普通小球藻叶绿体DNA的新方法被引量：2
- 2014年
- 本文采用尿素-月桂酰肌氨酸钠(urea-sarkosyl)法,用于分离带有坚硬细胞壁小球藻的高纯度叶绿体DNA(cpDNA)。将对数生长期的小球藻收集后置于冰上研磨,percoll密度梯度离心收集叶绿体层,显微观察表明叶绿体经梯度离心后形态完整。采用尿素-月桂酰肌氨酸钠法、蛋白酶K消化及酚/氯仿/异戊醇抽提,获得了高纯度的cpDNA。检测结果显示,cpDNA分子长度为22 kb,A260:A280值为1.87±0.01,产率达(2.52±0.01)μg·g-1(DW);cpDNA编码的16S rDNA扩增呈阳性,而由细胞核编码的18S rDNA扩增呈阴性。表明cpDNA纯度高,没有受到核基因组DNA的污染,符合小球藻cpDNA高通量测序的要求。同时,该方法也适合提取具有相似细胞壁成分的其他微藻的基因组DNA和cpDNA。
- 许夏冰谭德冠孙雪飘弓淑芬张家明
- 关键词：普通小球藻叶绿体DNA尿素月桂酰肌氨酸钠
- 水杨酸诱导膨胀浮萍(Lemna gibba SH0204)开花被引量：6
- 2015年
- 用水杨酸(SA)诱导膨胀浮萍开花,结果显示,在液体1/2Hoagland培养基中加入适当浓度的SA对开花有显著促进作用,SA浓度为20μmol·L-1时开花率最高,达到39.37%。SA在诱导开花的同时,明显抑制叶状体的生长,在浓度为80μmol·L-1时,叶状体死亡率达到94.38%。此外,本研究尝试在固体1/2Hoagland培养基上诱导膨胀浮萍开花,结果表明,固体培养基比液体培养基更有利于诱导开花,SA浓度为20μmol·L-1时,开花率超过45%,死亡率显著降低。在固体培养基上,方便对开花植株进行跟踪和操作,因此,用固体培养基诱导开花比液体培养基更有应用价值。光学和电子显微镜的观察结果显示,花粉粒呈近圆球形,表面有网状带刺纹饰。
- 黄猛许亚良Kanjana Khaeso孙雪飘张家明
- 关键词：水杨酸开花诱导花粉粒
