国家自然科学基金(30570783)
- 作品数:4 被引量:5H指数:1
- 相关作者:陈方平唐华容张帆柳林欣宋奎更多>>
- 相关机构:中南大学广东省中山市人民医院更多>>
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- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D对白血病细胞黏附和侵袭功能的影响
- 2011年
- 目的:探讨糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)对髓性白血病细胞黏附和侵袭功能及GPI锚定蛋白uPAR表达的影响。方法:二氮杂菲下调细胞的GPI-PLD酶活性;黏附和体外穿膜实验检测细胞的黏附、侵袭性;流式细胞术检测细胞膜uPAR表达;RT-PCR和Westernblot法检测THP-1细胞中GPI-PLD的表达水平。结果:二氮杂菲处理4h后,THP-1细胞的黏附率和膜uPAR的表达明显上调,差异有显著性;而细胞GPI-PLD的表达并无明显改变。结论:GPI-PLD可能参与THP-1细胞的黏附和侵袭,其机制可能与对uPAR表达的调节有关。
- 宋奎许晓军陈方平
- 关键词:白血病细胞
- 糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的表达与白血病细胞黏附和侵袭性的关系
- 2011年
- 目的比较髓性白血病细胞K562、HL-60和THP-1黏附、迁移能力以及糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(GPI-PLD)的表达,探讨GPI-PLD表达与不同白血病细胞黏附性、迁移性的关系。方法采用黏附实验和体外穿膜实验比较3种不同白血病细胞的黏附性和侵袭性;半定量RT-PCR检测这些白血病细胞GPI-PLD和uPAR mRNA的表达水平;免疫印迹法检测细胞GPI-PLD的表达;流式细胞术检测细胞膜uPAR的表达。结果 THP-1细胞中GPI-PLD和uPAR的mRNA及蛋白质表达水平均明显高于K562和HL-60细胞。THP-1细胞对Fn的黏附率显著高于K562、HL-60细胞;THP-1与HL-60细胞体外穿膜侵袭能力显著高于K562细胞。结论 THP-1细胞较K562和HL-60细胞具有较高的黏附和侵袭能力,与其GPI-PLD和锚定蛋白uPAR表达有关。
- 宋奎许晓军陈方平
- 关键词:GPI-PLD白血病细胞迁移
- 一种微小染色质免疫共沉淀方法的建立
- 2009年
- 染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation assay,ChIP)是目前研究蛋白与DNA相互作用的强有力的技术之一。然而传统的ChIP实验方法的最大缺陷是要求大量的细胞数,这限制了它应用于少量细胞数的样品。在传统ChIP实验的基础上综合国外文献建立了一种能在少量细胞样品中进行的染色质免疫共沉淀实验,称之为微小染色质免疫共沉淀(miniChIP)。并通过对诱导前后的MEL细胞中表达的β珠蛋白基因簇组蛋白H4乙酰化(acH4)的研究,证实了其可靠性和特异性。结果显示:高敏位点HS2和活跃基因β-maj的启动子区域存在一定的组蛋白H4乙酰化水平,DMSO诱导后显著增加,而不活跃基因Ey的启动子区域则检测到极低水平的组蛋白H4乙酰化,且诱导后无明显变化。
- 唐华容谭倩陈方平谭三勤张帆柳林欣