山东省自然科学基金(Y2004C33)
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- 辣根过氧化物酶同工酶C基因在巴斯德毕赤酵母中的克隆与鉴定
- 2005年
- 目的:克隆辣根过氧化物酶同工酶C基因,为此基因的表达作准备。方法:用PCR方法从辣根的总DNA中扩增得到一种辣根过氧化物酶同工酶C基因HRPC2,通过PCR的方法去除内含子后连接到pMD18-T载体上,测序证明正确后,用限制性内切酶切下目的基因,插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建成重组质粒pC2EX9K。再将辣根过氧化物酶同工酶C基因在毕赤酵母中进行克隆、鉴定。结果:重组质粒pC2EX9K转化毕赤酵母后,经PCR鉴定,证明形成了目的基因的克隆。结论:应用毕赤酵母作为受体菌,pPIC9K为载体,成功克隆了HRPC2。
- 邵金辉朱有名韩金祥
- 关键词：辣根过氧化物酶基因聚合酶链反应克隆巴斯德毕赤酵母
- 辣根过氧化物酶同功酶C3基因在毕赤酵母中的克隆与分析
- 2005年
- 目的克隆辣根过氧化物酶同功酶C3(HRPC3)基因,为此基因的表达做准备。方法用PCR方法从辣根的基因组DNA中扩增得到一种辣根过氧化物酶同功酶C3基因,将PCR产物连接到pMD18-T载体上。测序证明正确后,再以带有EcoRI和NotI酶切位点的引物进行PCR,然后将目的基因切下,插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建成重组pPIC9K质粒,用电转化转入毕赤酵母。提取转化子的基因组DNA,用PCR进行鉴定是否含有HRPC3基因。结果重组pPIC9K质粒转化毕赤酵母后,经PCR鉴定,证明形成了目的基因的克隆。结论应用毕赤酵母作为受体菌,pPIC9K为载体,成功克隆了HRPC3。
- 邵金辉朱有名韩金祥
- 关键词：辣根过氧化物酶聚合酶链反应克隆巴斯德毕赤酵母
- 辣根过氧化物酶同功酶C3基因在毕赤酵母中的表达
- 目的克隆与表达辣根过氧化物酶同功酶C3基因。方法用PCR方法从辣根的总DNA中,扩增得到一种辣根过氧化物酶同功酶C基因HRPC3,将PCR产物连接到pMD18-T载体上,测序证明正确后,再将目的基因正确插入到巴斯德毕赤酵...
- 邵金辉朱有名韩金祥吴围屏吴坚美
- 关键词：辣根过氧化物酶基因聚合酶链反应巴斯德毕赤酵母
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