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广东省科委资助项目(2008B0315)
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2009
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反向斑点杂交技术快速鉴定泌尿生殖道致病性支原体的研究
2009年
目的建立PCR反向斑点杂交方法(PCR—RDB)快速鉴定泌尿生殖道常见致病性支原体。方法以4种支原体[微小脲原体(Up)、解脲脲原体(Uu)、生殖支原体(Mg)、人型支原体(Mh)]的16SrRNA基因为靶序列设计通用引物和探针,将4种特异的寡核苷酸探针固定于尼龙膜上。利用巢式PCR扩增Up、Uu、Mg和Mh,扩增产物变性后与各特异性探针进行杂交、显色并分析结果,并对检测体系的敏感性、特异性进行测试。同时检测分析60例临床拭子标本。结果4种特异性探针只与相应的支原体DNA杂交,与其他病原体无交叉反应,其敏感性是1CFU。60例临床拭子标本PCR—RDB方法共筛选出支原体阳性19例,其中3例为支原体混合感染的标本(Up+Uu2例,Uu+Mg1例)。结论该方法可快速、敏感、准确地鉴定引起泌尿生殖道感染的致病性支原体。
薛秀娟
郑和平
李国明
黄进梅
曾维英
薛耀华
吴兴中
关键词:
支原体属
寡核苷酸探针
聚合酶链反应
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