郑州大学生物工程系
- 作品数：832 被引量：3,431H指数：25
- 相关作者：韩绍印刘伟李杰闫红霞凌华更多>>
- 相关机构：河南工业大学生物工程学院河南师范大学生命科学学院河南农业大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 中华蜜蜂与意大利蜜蜂雄蜂胚胎发育差异蛋白质组与磷酸化蛋白质组分析
- 【目的】雄蜂对蜂群具有重要的遗传贡献,本研究通过对中华蜜蜂（中蜂）和意大利蜜蜂（意蜂）雄蜂胚胎发育期3个日龄进行差异蛋白质组和磷酸化蛋白质组的分析,以探明中、意蜂雄蜂胚胎的发育特征以及深刻认识雄蜂胚胎发育生物学,这将为蜜...
- 周天娥房宇冯毛韩宾张兰李荣丽李建科
- 关键词：中华蜜蜂意大利蜜蜂蛋白质组磷酸化蛋白质组
- 文献传递
- 冻存对细胞因子诱导的杀伤细胞免疫表型及细胞内因子表达的影响被引量：6
- 2014年
- 目的:探讨冻存对外周血来源的细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)免疫表型及细胞内因子表达的影响。方法:采集10例癌症患者的外周血,采用Ficoll两步法分离外周血单个核细胞,用细胞因子诱导培养得CIK。收集冻存3个月后复苏4、24、72 h的CIK,采用流式细胞术及胞内染色法检测细胞穿孔素、颗粒酶B及干扰素-γ的表达水平,采用AnnexinV/PI双染法检测细胞活性。以未冻存的新鲜CIK作对照。结果:冻存前及复苏4 h后CIK颗粒酶B及干扰素-γ表达水平差异无统计学意义(t=1.029、0.237,P>0.05)。冻存前及复苏4、24、72 h后CIK穿孔素表达水平分别为(35.97±7.12)%、(10.00±6.04)%、(17.60±3.92)%和(35.20±6.23)%,差异有统计学意义(F=47.480,P<0.001),冻存后CIK穿孔素表达水平显著降低,随着复苏时间的延长,穿孔素表达水平逐渐恢复正常。复苏4、24、72 h后CIK活细胞比例逐渐增多(P<0.05),复苏72 h后活细胞比例接近100%,细胞活性恢复正常。结论:冻存可能使CIK细胞亚型发生改变。
- 王菲王丽萍张震岳冬丽段秀芳张斌张毅
- 关键词：冻存免疫表型
- 肾癌树突状细胞疫苗的体外活性研究被引量：3
- 2009年
- 目的探讨负载人肾癌细胞抗原肽制备树突状细胞（DC）疫苗体外杀伤肾癌细胞的作用。方法利用细胞膜酸洗脱法获得人肾透明细胞癌细胞株7860细胞表面抗原肽。外周血单个核细胞在体外经人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子，白细胞介素4和脂多糖诱导获得成熟的DC，并负载分离到的抗原肽制备DC疫苗。利用疫苗体外诱导出特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）作为实验组。同时设置4个对照组，对照组1用未负载抗原肽的DC和单个核细胞混合培养，对照组2用单个核细胞进行培养，对照组3用抗原肽与单个核细胞混合培养，对照组4用未负载抗原肽的DC单独培养。4个对照组也加入同实验组相同的各种因子进行培养。^51Cr释放法检测特异性CTL的杀伤活性。结果疫苗诱导的特异性CTL对肾癌细胞的杀伤活性为（31．93±5．05）％，与对照组（5．88±2．26）％、（8．03±6．70）％、（9．70±2．09）％、（9．35±3．58）％相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论负载抗原肽的DC疫苗体外试验有高效的抗肾癌细胞活性。
- 樊长晖乔保平文建国祁园明阮翘
- 关键词：肾肿瘤疫苗树突细胞
- 结核分枝杆菌CFP21抗原的HLA-A*0201/*03限制性细胞毒T淋巴细胞表位预测
- 2012年
- 目的:探寻结核分枝杆菌CFP21抗原的同时针对HLA-A*0201/*03型别的广谱细胞毒T淋巴细胞(CTL)表位。方法:对结核分枝杆菌CFP21抗原的HLA-A*0201候选肽,利用在线数据库预测HLA-A*03限制性的天然表位肽,通过氨基酸置换适当修饰获得对应的改造肽。通过T2A3细胞结合力实验筛选候选肽,用于细胞毒活性实验。结果:在线数据库预测共获得4条母体肽和3条改造肽。结合力实验显示,改造肽p134-1Y2L、p134-1Y2L9L和母体肽p134与HLA-A*03分子均具有较高的结合力。改造肽p134-1Y2L9L和母体肽p134均能诱导CTL反应,但p134诱导出的CTL对靶细胞具有更强的杀伤效应。结论:p134(AVADHVAAV)是同时针对HLA-A*0201/*03型别的广谱CTL表位。
- 翟文杰翟明霞吕虹祁元明高艳锋
- 关键词：结核分枝杆菌表位
- 香青属(Anaphalis)植物的叶片形态和解剖结构特征的比较研究
- 2008年
- 对香青属Anaphalis所有两亚属、两组以及8个系,共19个种1个变种的叶片形态进行了研究.结果表明,香青属属下不同亚属和不同系之间叶片形态特征具有一定差异,而叶形、叶缘和叶脉特征在种间存在交叉;拟鼠麴亚属的单型种粘毛香青的维管束特征不同于香青亚属;在香青亚属中,球苞组3个系代表种的叶片木质化程度比珠光组4个系代表植物为高;珠光组的香青系和球苞组代表植物叶片的维管束两侧至表皮细胞之间,具有厚壁细胞或厚角细胞.
- 张燕梅朱世新李家美李秋波谷志云
- 关键词：叶片
- Survivin和Ki67在食管鳞癌组织中的表达及意义被引量：3
- 2009年
- 目的探讨Survivin和Ki67蛋白表达在食管鳞癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组化SP法检测40例食管鳞癌患者癌组织中Survivin和Ki67蛋白表达情况,并分析其与临床特征的关系以及二者的相关性。结果食管鳞癌患者癌组织中Survivin和Ki67蛋白的阳性表达率分别为72.5%和75.0%。两种蛋白表达与肿瘤组织分化程度、浸润程度相关,而与性别、年龄、淋巴结转移情况无关。二者表达呈显著正相关(r=0.420,P<0.05)。结论Survivin和Ki67蛋白与食管鳞癌组织的分化和恶性进展有关,Survivin在抑制细胞凋亡的同时可能促进了细胞增殖。
- 程道博郭欢汲振余殷景远赵立群
- 关键词：食管鳞癌SURVIVIN蛋白KI67蛋白
- 甘蓝型油菜二酰甘油酰基转移酶基因微藻真核表达载体的构建
- 2012年
- 目的:构建二酰甘油酰基转移酶(DGAT)的微藻真核表达载体。方法:采用RT-PCR从甘蓝型油菜中扩增得到DGAT1和DGAT22个基因cDNA编码区序列,分别连接到载体pMD18-TSimple上,经测序及与已知的DGAT1和DGAT2序列比对,将鉴定正确的基因用于微藻真核表达载体pSV40DGAT1/CaMVBar和pSV40DGAT2/CaMVBar的构建。结果:克隆到的甘蓝型油菜DGAT1和DGAT22个基因长度分别为1512和1026bp,同源性分别为99%和98%,构建了微藻真核表达载体pSV40DGAT1/CaMVBar和pSV40DGAT2/CaMVBar。结论:2个微藻真核表达载体构建成功。
- 张楠楠潘卫东郑国庭李靓崔玉琳秦松薛乐勋
- 关键词：甘蓝型油菜微藻真核表达载体
- 人羊膜脐带源性间充质干细胞对大鼠肝硬化的治疗作用被引量：3
- 2012年
- 目的:比较人脐带间充质干细胞(human amniotic membrane-derived mesenchymal stem cells,hAM-MSCs)和人羊膜间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)对模型大鼠肝硬化的治疗效果.方法:分离培养hAM-MSCs和hUC-MSCs,流式检测CD29、CD44和CD34.CCl4诱导大鼠肝硬化模型,在第8周时,杀死5只大鼠做病理检测以确诊为肝硬化.30只成模大鼠随机分为脐带干细胞组(n=10)、羊膜干细胞组(n=10)和对照组(n=10),分别注入hAM-MSCs、hUC-MSCs2mL(细胞数量2×106)和等量生理盐水.细胞移植前和移植4wk后,检测大鼠肝功能;肝组织HE染色、Masson染色;免疫组织化学法检测α-SMA在肝脏中的表达.结果:2种细胞表达CD29、CD44,不表达CD34.移植后,与对照组相比,脐带干细胞组和羊膜干细胞组ALT和AST明显降低(204.6±16.4,195.6±21.2vs539.8±36.2;180.1±25.2,167.5±19.0vs337.4±23.4,P<0.05);胶原沉积减少;组织病理学评分有显著性差异(P<0.05);肝脏α-SMA表达量减少(130.6±3.0,127.0±2.6vs152.2±5.4,P<0.05).脐带干细胞组和羊膜干细胞组的肝功能、肝组织病理学评分及肝脏α-SMA表达量均无明显差异.结论:hAM-MSCs和hUC-MSCs能有效改善肝硬化大鼠模型的肝功能和肝硬化程度,两者治疗效果无明显差异.
- 高琳琳关方霞郑鹏远杨波迟连凯梁硕邹润钦刘志强
- 关键词：人脐带间充质干细胞人羊膜间充质干细胞肝硬化
- 大白菜InDel-PCR反应体系的优化被引量：10
- 2012年
- 采用CTAB法提取大白菜基因组DNA,利用单因素试验对InDel-PCR反应体系中的dNTPs浓度、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶用量、模板DNA用量、引物浓度、退火温度、三温循环时间等7个因素进行筛选和优化。结果表明,适用于大白菜InDel-PCR分析的最佳扩增条件为(20μL):dNTPs 0.1mmol/L、Mg2+1.5mmol/L、Taq DNA聚合酶0.4U、模板DNA 105ng、引物浓度0.4μmol/L、退火温度50℃、三温循环时间30s-30s-45s。该体系可用于大白菜遗传多样性分析及遗传图谱构建。
- 梁爽原玉香张晓伟薛银鸽姚秋菊蒋武生田保明张强赵艳艳
- 关键词：大白菜INDELPCR
- 杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活和毒性检测被引量：2
- 2012年
- 目的:构建杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHH)的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-SAHH,并检测其对酵母细胞的毒性和自激活作用。方法:应用RT-PCR扩增杜氏盐藻的SAHHcDNA,测序分析后与酵母双杂交诱饵载体pGBKT7连接,构建诱饵载体pGBKT7-SAHH。用PEG/LiAc法将诱饵载体转入AH109和Y187酵母中,通过表型筛选检测诱饵蛋白对酵母有无毒性和自激活作用。结果:成功构建了诱饵载体pGBKT7-SAHH并成功转化到酵母细胞AH109和Y187中,表达的融合蛋白对宿主酵母细胞无毒性。在AH109和Y187酵母细胞中诱饵载体均未激活报告基因HIS3和ADE2,但是激活了报告基因MEL1。结论:诱饵载体pGBKT7-SAHH可用酵母双杂交方法筛选与SAHH相互作用的蛋白。
- 柴丹丹李庆华阎赟梦毛丽红李靓朱立强薛乐勋
- 关键词：酵母双杂交诱饵载体自激活杜氏盐藻
