天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室
- 作品数：82 被引量：473H指数：11
- 相关作者：朱雅琴田恬佟巍胡骁杨震更多>>
- 相关机构：武警医学院武警后勤学院天津医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学轻工技术与工程生物学更多>>
- 土槿乙酸抑制接触性超敏反应的药效学研究及机制探讨被引量：4
- 2014年
- 目的观察中药土槿皮主要活性成分土槿乙酸(pseudolaric acid B,PB)免疫调节作用的药效学,初步探究其可能的分子机制。方法以二硝基氟苯(2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB)诱导小鼠接触性超敏反应(contact hypersensitivity,CHS)模型,口服不同剂量PB进行干预,检测小鼠耳肿胀度,计算脾脏指数,并以苏木精-伊红染色观察小鼠耳部皮肤炎性细胞浸润情况,综合评价PB免疫抑制作用的药效学。随后,进一步以Western blot方法检测PB对CHS小鼠Akt磷酸化活性及对PPARγ蛋白表达的影响,通过荧光素酶报告基因分析PPARγ的转录激活。结果结果显示,不同剂量PB能够明显抑制CHS小鼠耳肿胀,降低脾脏指数,减轻耳部皮肤炎症程度,其免疫抑制作用机制可能与促进PPARγ表达及其转录激活、下调Akt信号通路有关。结论 PB可能通过调节PPARγ相关的Akt信号通路发挥免疫调节作用,为研制用于炎症免疫性疾病的新型免疫调节剂奠定了基础。
- 李覃董小青王翼腾刘晓光王伟周欣陈虹
- 关键词：土槿乙酸接触性超敏反应药效学炎症PPARΓPPARΓ
- HPLC-荧光法测定青海产蕨麻根中α-生育酚的含量被引量：1
- 2017年
- 【目的】测定青海产的高海拔植物蕨麻根中α-生育酚的含量。【方法】样品经KOH皂化后,采用正己烷和乙酸乙酯混合溶剂提取,以甲醇-乙腈(30:70,v/v)为流动相,经HPLC-荧光法测定α-生育酚含量。【结果】α-生育酚在1~16μg/ml质量浓度范围内呈良好的线性关系,日内相对标准偏差为1.18%~1.45%,日间相对标准偏差为1.40%~1.87%,日内重现性RSD为2.71%,日间重现性RSD为3.84%,方法回收率为90.08%~92.25%。青海产蕨麻中α-生育酚含量为81.25~84.47μg/g。【结论】建立的HPLC-荧光分析方法测定蕨麻根中α-生育酚的含量,方法灵敏、准确,提取效率高。
- 李鹏飞谢龙崔颖李灵芝
- 关键词：Α-生育酚皂化高效液相色谱法
- 白细胞介素6诱导卵巢上皮性癌细胞对化疗药物产生耐药的机制研究被引量：9
- 2010年
- 目的 探讨白细胞介素6（IL-6）诱导卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞对化疗药物产生耐药的机制及相关信号传导通路.方法 应用外源性重组IL-6短期处理或将正义IL-6基因（ssIL-6）稳定转染至A2780细胞（不表达IL-6但表达其受体、对顺铂和紫杉醇敏感）,同时将反义IL-6基因（asIL-6）稳定转染至SKOV3细胞（高表达IL-6及其受体、对顺铂和紫杉醇耐药）,应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法、逆转录PCR（RT-PCR）技术及蛋白印迹法（western blot）观察IL-6是否影响卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性,并对可能的信号传导通路进行研究.结果 （1）外源性重组IL-6处理A2780细胞后,对顺铂和紫杉醇的耐药倍数分别为6.25和7.31倍;ssIL-6转染A2780细胞后（内源性过表达IL-6）,IL-6低、中、高表达细胞对顺铂的耐药倍数分别为7.13、7.47和8.34倍,对紫杉醇的耐药倍数分别为7.61、8.27和10.70倍;而asIL-6转染SKOV3细胞后（抑制内源性IL-6表达）,IL-6中、高抑制表达细胞对顺铂的耐药倍数分别为0.15和0.10倍,对紫杉醇的耐药倍数分别为0.10和0.08倍,可恢复SKOV3细胞对顺铂和紫杉醇的敏感性.（2）外源性IL-6作用后,上调了A2780细胞中耐药相关基因MDR1和GST-π以及凋亡抑制基因bcl-2、bcl-xL和XIAP mRNA和蛋白的表达;与此相一致,ssIL-6转染的A2780细胞中MDR1、GST-π及bcl-2、bcl-xL、XIAP mRNA和蛋白的表达水平增加,而asIL-6转染的SKOV3细胞则明显降低.（3）有丝分裂原活化的蛋白激酶-细胞外信号调节激酶（MEK）抑制剂--PD98059和磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）抑制剂--wortmannin能分别阻断IL-6诱导的卵巢癌细胞细胞外信号调节激酶（ERK）和蛋白激酶B（Akt）的活化作用,且两者均能阻断IL-6诱导的卵巢癌细胞对顺铂和紫杉醇产生的耐药,细胞生长明显减少.结论 IL-6诱导的卵巢癌细胞化疗耐药很可能与其上调卵巢癌细胞耐药相关基因MDR1、GST-
- 王越李灵芝叶路牛秀珑刘昕朱雅琴孙维甲梁彦军
- 关键词：卵巢肿瘤肿瘤白细胞介素6信号传导
- IL-8调节卵巢癌细胞VEGF表达、体外黏附与侵袭特性的机制研究被引量：6
- 2013年
- 目的探讨IL-8对卵巢癌细胞VEGF表达水平、体外黏附和侵袭特性的影响及相关分子机制。方法在原工作基础上,利用前期构建的过表达IL-8的人卵巢癌A2780细胞株和抑制表达IL-8的人卵巢癌SKOV3细胞株,分别应用半定量RT-PCR法、Western blot技术、细胞体外黏附实验、Transwell小室体外侵袭实验及明胶酶谱法等观察IL-8对卵巢癌细胞VEGF表达、黏附和侵袭特性的影响,并对其作用机制和可能的信号通路进行研究。结果与对照组相比,过表达IL-8可增强卵巢癌细胞VEGF的基因转录和蛋白表达水平,促进细胞的体外黏附和侵袭能力(P<0.001);抑制IL-8表达,细胞的VEGF表达水平和黏附、侵袭能力均减弱。进一步研究发现,IL-8的促细胞黏附和侵袭活性,与激活PI3K/Akt和Raf/MEK/ERK信号通路、增强MMP-2和MMP-9的活性和表达水平密切相关。结论 IL-8可促进卵巢癌细胞VEGF表达,增强细胞的黏附侵袭能力;IL-8及其相关信号分子有望成为抑制肿瘤转移、延缓病程进展的新靶点。
- 牛秀珑邢杰张晓雷李宗旻张朝亚王越
- 关键词：IL-8卵巢癌细胞VEGF细胞黏附细胞侵袭
- 急性高原缺氧大鼠肺组织损伤及其机制研究被引量：4
- 2013年
- 【目的】通过建立低压缺氧模型,模拟急性高原缺氧损伤,观察不同缺氧时间点大鼠肺组织损伤情况。【方法】选取清洁级雌性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、缺氧6、12及24 h组。利用数控低压缺氧舱,建立急性高原缺氧损伤模型,通过HE染色观察大鼠肺组织形态学改变,利用干湿比重法检测肺组织含水量,采用生化手段检测血清乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)及过氧化氢酶(catalase,CAT)活性,应用Western blotting技术检测肺组织水通道蛋白(aquaporin,AQP)1/4的表达情况。【结果】HE染色:正常对照组可见多边形或圆形薄壁囊泡,边界清楚,肺泡上皮细胞间为薄壁肺泡隔,隔内可见毛细血管断面,各低压缺氧组肺泡上皮细胞明显肿大,肺泡壁增厚,肺间隔内毛细血管扩张;与正常对照组相比,各缺氧组大鼠肺含水量显著升高(P<0.01),且随缺氧时间的延长而逐渐增高;与正常对照组相比,各缺氧组大鼠血清LDH活性显著升高(P<0.01),CAT活性显著下降(P<0.05或P<0.01);与正常对照组相比,各缺氧组大鼠肺组织中AQP1/4蛋白表达量均明显升高(P<0.01),且随缺氧时间的延长而逐渐增高。【结论】急性高原缺氧可造成实验大鼠肺水肿,且损伤程度与缺氧时间密切相关,其机制可能为上调水通道蛋白(AQP)1/4的表达所致。
- 祁玉婷郭鹏李建宇高宏生李灵芝
- 关键词：高原缺氧水通道蛋白1水通道蛋白4
- 延肾口服液延缓肾间质纤维化进展的实验研究被引量：3
- 2011年
- 目的探讨肥大细胞（MC）在延肾口服液延缓肾间质纤维化（RIF）进程中的作用。方法将75只雄性SD大鼠按随机数字表法均分为假手术组、模型组、贝那普利组及延肾口服液高、低剂量组5组。采用单侧输尿管梗阻（UUO）致大鼠RIF模型。术前1d治疗组开始灌胃贝那普利3．5ml／d及延肾口服液2．8ml／d、1．4ml／d。术后42d留取血、尿标本行肌酐、尿素氮测定。取肾组织行苏木素-伊红（HE）染色，观察肾间质病理改变；行甲苯胺蓝染色和免疫组化染色，检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）、转化生长因子-β（TGF—β）及类胰蛋白酶表达；透射电镜下观察MC超微结构改变。结果光镜下观察贝那普利组和延肾高、低剂量组RIF程度轻于模型组。与模型组相比，贝那普利组和延肾高、低剂量组MC数量显著减少（12．00±1．33、8．00±0．65、22．00±3．34比29．00±0．57，P〈0．05或P〈0．01）；MC体积较大，无颗粒脱出。肾组织α—SMA、TGF-β、类胰蛋白酶表达水平较模型组显著降低（α—SMA：1．82±0．94、1．61±0．16、2．04±0．26比3．41±0．10；TGF-β：1．72±0．14、1．63±0．47、2．16±0．11比3．23±0．43；类胰蛋白酶：0．43±0．50、0．52±0．47、0．85±0．50比1．47±0．27，P〈0．05或P〈0．01），量效关系较好。贝那普利组和延肾高、低剂量组血尿素氮（BUN）、尿肌酐（UCr）和尿尿素氮（uUN）均较模型组显著降低（均P〈0．05）；各组间血肌酐（SCr）比较差异均无统计学意义（均P〉0．05）。RIF程度与MC数量呈正相关（r=0．780，P〈0．05），TGF—β阳性MC与类胰蛋白酶阳性MC呈正相关（r=0．887，P〈0．05）。结论延肾口服液延缓RIF的作用与其抑制MC趋化、脱颗粒有关。
- 孙楠孙奕朱冬燕毛凌燕杨静张永亮王景明
- 关键词：肾间质纤维化肥大细胞转化生长因子-Β平滑肌肌动蛋白类胰蛋白酶
- 新型骨靶向雌激素大黄酸—雌酮抗骨质疏松活性研究被引量：4
- 2010年
- 【目的】研究新型雌激素衍生物大黄酸-雌酮{新型骨靶向雌激素3-羟基-雌甾-1,3,5(10)-三烯-17酮-3-[N4-(1,8-二羟基-9,10-蒽醌-3-甲酰基)哌嗪基-N1-乙基]醚,代号LC}对去卵巢大鼠骨密度及子宫内膜增殖的影响,探讨其抗骨质疏松活性及其对子宫的副作用。【方法】采用去卵巢大鼠模型,每天给予大黄酸-雌酮4μmol/kg(H-LC组)或0.8μmol/kg(L-LC组),6个月后测定大鼠骨密度(BMD)、骨矿含量(BMC)及子宫重量、子宫直径、子宫内膜厚度变化,并与模型组(OVX组),雌酚酮组(E组)比较。【结果】与OVX组相比,E组BMD及BMC增加,子宫相对重量及子宫直径均显著增加。L-LC组BMD、BMC及H-LC组BMC显著增加,达到E组水平,子宫相对重量及子宫直径虽高于OVX组,但显著低于E组。【结论】大黄酸-雌酮具有雌激素样的抗骨质疏松活性,但大大降低了对子宫的刺激性。
- 张岭金鑫李灵芝张永亮唐存贵王越
- 关键词：去卵巢大鼠雌酚酮
- 蕨麻正丁醇部位对EAHY926内皮细胞缺氧损伤的保护作用被引量：8
- 2012年
- 【目的】探讨蕨麻正丁醇部位对内皮细胞缺氧损伤的保护作用。【方法】采用人脐静脉内皮细胞株(EAHY926)建立缺氧损伤实验模型,通过MTT法测定各实验组细胞代谢率;比色法测定乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和NO浓度;放射免疫法测定内皮素-1(endothelin-1,ET-1)的活性。【结果】3.00 mg/ml、1.50 mg/ml和0.75 mg/ml蕨麻正丁醇部位均能显著减少缺氧损伤内皮细胞LDH的外漏量,并可显著提高细胞内SOD活性,增加NO分泌、减少ET-1的生成。【结论】蕨麻正丁醇部位对内皮细胞缺氧损伤具有显著的保护作用,其机制之一可能是清除缺氧导致的内皮细胞自由基堆积,减少ET-1的释放,增加NO分泌,从而减轻内皮细胞损伤。
- 龚海英张岭李灵芝李广策吕琪李建宇陈莉
- 关键词：内皮细胞缺氧一氧化氮内皮素-1
- 灯盏乙素苄酯衍生物对乳鼠心肌细胞缺血损伤的影响及其抗凋亡作用机制(英文)被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨灯盏乙素苄酯衍生物对乳鼠心肌细胞缺血损伤的保护作用及其抗凋亡机制。方法:体外原代培养SD乳鼠的心肌细胞,将搏动状态良好且生长密度无明显差异的心肌细胞随机分为5组:正常对照组、缺血模型组、灯盏乙素苄酯衍生物组(高、中、低剂量分别为100、50、25μmol/L,缺血造模前加入干预药物)。通过氧糖剥夺模型体外模拟心肌缺血损伤,缺血6h后,通过MTT法测定各组细胞代谢活力,采用生化手段检测各实验组培养基中乳酸脱氢酶活性,采用Hoechst-碘化丙啶双染色法观察各组心肌细胞核的形态改变,采用流式细胞术测定各组心肌细胞凋亡率,通过逆转录聚合酶链反应技术检测各组细胞的细胞色素c和caspase-3在mRNA水平的表达,通过蛋白质印迹技术检测各组细胞的细胞色素c和caspase-3在蛋白水平的表达。结果:与正常对照组相比,缺血后模型组心肌细胞的代谢活力显著下降(P<0.01)。与模型组相比,灯盏乙素苄酯衍生物可明显减轻缺血损伤心肌细胞代谢活力的丧失(高剂量P<0.01,中剂量P<0.05);各剂量灯盏乙素苄酯衍生物可显著减少缺血损伤心肌细胞乳酸脱氢酶的外漏量(P<0.01);形态学方面,灯盏乙素苄酯衍生物可有效减轻缺血损伤心肌细胞的染色质凝集、细胞核固缩等凋亡形态学改变;灯盏乙素苄酯衍生物能明显降低缺血损伤心肌细胞的凋亡百分率(P<0.01);灯盏乙素苄酯衍生物可显著抑制缺血损伤心肌细胞的细胞色素c和caspase-3在mRNA及蛋白水平的表达(P<0.01)。结论:灯盏乙素苄酯衍生物对体外培养心肌细胞的缺血损伤具有显著的保护作用。这种保护作用的机制可能是通过抑制细胞色素c释放和caspase-3活化从而阻断细胞凋亡的途径而实现的。
- 代皓顾军李灵芝杨丽梅刘辉李建宇
- 关键词：灯盏细辛缺血
- 一种高成活率培养大鼠原代心肌细胞的方法被引量：1
- 2014年
- 【目的】探讨原代心肌细胞培养的条件和方法。【方法】取新生1～3d的SD大鼠心室肌，O．25％胰蛋自酶-0．02％EDTA消化后，培养于DMEM—F12培养液中，用差速贴壁法和化学抑制法相结合去除非心肌细胞。倒置显微镜下观察形态学变化，透射电镜观察细胞超微结构。【结果】培养的心肌细胞平均存活率（96．33±6．73）％，培养第4天细胞搏动率达（95．3±9.2）％，并出现单层同步搏动，具有典型的心肌细胞形态特征。【结论】本研究的心肌细胞培养方法操作简便，成活率高，是一种较为理想的原代心肌细胞培养方法。
- 龚海英梁林李灵芝张永亮李建宇
- 关键词：心肌细胞原代培养
