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皖南医学院中心实验室: 作品数：16 被引量：41H指数：4; 相关作者：杨丽芬方向更多>>; 相关机构：华侨大学生物医学学院更多>>; 发文基金：安徽省自然科学基金国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>; 相关领域：医药卫生文化科学化学工程政治法律更多>>

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华侨大学生物医学学院

黄芪甲苷对血管紧张素Ⅱ诱导肾小球系膜细胞增殖及炎症因子表达的影响被引量：7: 2018年; 目的:研究黄芪甲苷(As-Ⅳ)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖及炎症因子表达的影响。方法:采用10^(-6)mol/L的AngⅡ刺激GMCs增殖,同时分别加入25,50,100μmol/L的As-Ⅳ对GMCs作用48 h,运用MTT法检测各组细胞增殖状况;流式细胞术观察GMCs中细胞内活性氧(ROS)水平变化;ELISA法检测细胞上清液中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量; Western blot法检测细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白的表达。结果:与AngⅡ刺激组相比,As-Ⅳ干预显著抑制GMCs细胞增殖,减少细胞内ROS水平,抑制MCP-1及TGF-β1的表达。结论:As-Ⅳ对于AngⅡ诱导GMCs的增殖具有抑制作用,且能降低相关炎症因子的表达。; 熊莉吕梦娟窦德宇马玉红; 关键词：肾小球系膜细胞黄芪甲苷单核细胞趋化蛋白-1

溶酶体膜蛋白sidt2介导肝脏细胞的凋亡:不通过抑制自噬溶酶体途径: 2023年; 目的研究溶酶体膜蛋白Sidt2敲除后在肝脏细胞中调控凋亡的途径。方法利用Crispr-Cas9技术构建Sidt2敲除的人肝脏(HL7702)细胞模型,检测Sidt2和自噬关键蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ、P62蛋白水平,MDC染色观察自噬体形成情况,通过EdU和流式细胞实验观察Sidt2对肝脏细胞增殖活性和凋亡的影响,并且使用0、10、25、50、100、200μmol/L的氯喹(CQ)摸索肝脏细胞CQ饱和浓度,检测对其自噬流的影响,以及使用CQ进一步探索影响肝脏细胞的增殖活性其凋亡水平的机制。结果成功构建HL7702细胞Sidt2+/+组及Sidt2-/-组。Sidt2基因缺失可导致肝脏细胞增殖被抑制和凋亡水平的增加,自噬关键蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ和P62在蛋白水平上的表达均增加且自噬体含量增加(P<0.05)。结果显示50μmol/LCQ作用下肝脏细胞自噬达到饱和状态,50μmol/L CQ使Sidt2基因缺失时LC3B和P62的表达均增加(P<0.05),且CQ进一步降低肝脏细胞活性,并促进其凋亡水平(P<0.05)。结论在离体水平上,Sidt2基因剔除后,HL7702细胞可表现自噬通路的异常,并且不通过抑制自噬溶酶体途径介导和调控凋亡。; 许家豪耿梦雅刘海军裴文俊顾静漆梦湘章尧章尧宋迎迎刘苗苗吕坤余翠何春玲王李卓高家林; 关键词：凋亡自噬增殖

精斑鉴别技术进展被引量：5: 2016年; 斑痕类型鉴别是法医物证检验的重要步骤之一,精斑中所含有的DNA和RNA的鉴定可以提供识别犯罪嫌疑人的个性证据,因此精斑的确认对案件属性和犯罪事实具有至关重要的作用。精斑识别的传统方法注重检测其中特异性的功能蛋白或者含量高的蛋白,如碱性磷酸酶、前列腺特异性抗原等。尽管这些标志物特异性相对较强,但蛋白质稳定性差,灵敏度低,检测结果易带主观性倾向等,限制了传统方法的检出率。为了克服这些限制,拉曼光谱法、质谱检测蛋白标志物、精子适体技术、特异性m RNA和micro RNA的检测、组织差异DNA甲基化等新技术相继出现,这些方法为微量、甚至陈旧性等疑难检材的个性鉴定开辟了新的途径。; 文迎果余浩林俊生; 关键词：适体蛋白标志物质谱 DNA甲基化

预实验-以科研促教学在实验诊断学实践教学中的具体应用被引量：3: 2017年; 预实验是科研工作中重要的环节。实验诊断学是实践性很强的一门学科,实践教学是其重要组成部分。为了培养学生对科研的兴趣,我们将预实验具体应用到实践教学中,促使学生对科研思路和方法有初步认识,为以后的科研工作打下基础。本文以"白细胞分类计数"实验为例,强调科研中预实验的重要性以及科研思路在实践教学中的不可或缺性。; 马玉红熊莉胡荣华余浩宋默涵黄亚纬杨解人; 关键词：实践教学预实验白细胞分类计数

牛蒡根挥发油超临界CO2萃取的工艺研究: 目的：对超临界CO2流体萃取牛蒡根挥发油的工艺条件进行研究.方法：通过单因素试验研究萃取温度、萃取压力、萃取时间对萃取率的影响,并采用正交试验设计优化工艺条件.结果：最佳萃取条件为萃取温度45℃、萃取压力25 MPa、萃...; 窦德宇柳春燕杨丽芬; 关键词：超临界CO2流体萃取牛蒡根挥发油

生物化学实验课开展线上教学的应用思考被引量：2: 2020年; 生物化学实验课程是串联理论知识和科研能力的关键课程,在培养复合型医学人才中愈发重要。本文针对疫情防控下,生物化学实验课程的线上教学无法广泛开展的状况,分析其线上教学的难度,初步探讨它展开线上教学的可行性,并展望未来实验课程在线上教学方面的前景和需要解决的问题。; 吕梦娟窦德宇; 关键词：生物化学实验课程线上教学

调节TGF-β1/Smad信号通路对内质网应激状态下肝癌HepG2细胞凋亡的影响被引量：4: 2021年; 目的:探讨TGF-β1/Smad信号通路对内质网应激(ERS)状态下肝癌HepG2细胞凋亡的影响机制。方法:首先建立内质网应激模型:以3μmol/L的衣霉素(TM)处理人肝癌HepG2细胞株24 h,诱导细胞发生ERS。实验分为6组,每组3个复孔,实验重复3次,6组分别为:Untreated组(未处理组)、TM组(3μmol/L TM处理组)、TM+NC组(3μmol/L TM+si-TGF-β1阴性对照组)、TM+si-TGF-β1组(3μmol/L TM+si-TGF-β1组)、TM+pEX-3组(3μmol/L TM+质粒对照组)及TM+TGF-β1 pEX-3组(3μmol/L TM+TGF-β1过表达质粒组),利用脂质体的方法将TGF-β1小干扰RNA(si-TGF-β1)及TGF-β1过表达质粒(TGF-β1 pEX-3)转染入HepG2细胞,转染24 h后,利用RT-qPCR和Western blot检测各组HepG2细胞TGF-β1/Smad信号通路相关因子TGF-β1、p-Smad2表达的情况;CCK-8和流式细胞术分别检测各组HepG2细胞增殖抑制率和凋亡率变化情况。结果:与Untreated组相比,TM组细胞的TGF-β1及p-Smad2的表达明显降低(P<0.05);与TM组相比,TM+si-TGF-β1组细胞的TGF-β1及p-Smad2的表达和细胞的增殖抑制率、凋亡率显著降低(P<0.01),而TM+TGF-β1 pEX-3组细胞的TGF-β1及p-Smad2的表达和细胞增殖抑制率、凋亡率显著升高(P<0.01)。结论:TGF-β1/Smad信号通路在肝癌HepG2细胞发生ERS后受到抑制,当该通路被激活后,ERS状态下肝癌HepG2细胞的凋亡率显著升高。; 黄亚纬熊莉窦德宇吕梦娟马玉红; 关键词：肝癌HEPG2细胞 TGF-Β1/SMAD信号通路凋亡

原花青素对体外阿尔茨海默病的预防作用被引量：5: 2014年; 目的:研究原花青素(PC)对体外阿尔茨海默病模型(AD)的预防作用。方法:H2O2100μmol/L诱导PC12细胞损伤18 h复制体外阿尔茨海默病模型,原花青素80 mg/L、40 mg/L、20 mg/L、Tempol 800μmol/L于造模前30 min预处理后,双抗体一步夹心法酶联吸附实验(ELISA)检测细胞上清液中硫氧还蛋白(Trx)含量;黄嘌呤氧化酶法检测细胞中的总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力;硫代巴比妥酸盐法测定细胞上清液的丙二醛(MDA)。结果:H2O2100μmol/L诱导PC12细胞损伤后,细胞内Trx浓度和T-SOD活力显著降低,MDA含量显著升高(P<0.01);原花青素各剂量组可增高Trx浓度和T-SOD活力,降低MDA含量(P<0.01,P<0.05)。结论:原花青素能减轻H2O2引起PC12细胞的氧化应激损伤。; 马玉红窦德宇柳春燕武其文; 关键词：原花青素 PC12细胞硫氧还蛋白总超氧化物歧化酶丙二醛

溶酶体膜蛋白Sidt2缺失导致肝脏细胞自噬受损被引量：1: 2021年; 目的研究溶酶体膜蛋白Sidt2缺失后对肝脏自噬的影响。方法利用Crispr-Cas9技术构建Sidt2敲除的人肝脏(HL7702)细胞模型,对自噬关键蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、P62及自噬相关蛋白Atg5、Atg7、Atg12进行蛋白水平检测,同时使用免疫荧光方法对LC3B及P62进行共定位,检测自噬小体对P62货物蛋白的识别与封存以及自噬溶酶体的降解。对LC3B及LAMP1进行免疫荧光共定位,检测自噬小体与溶酶体融合过程。使用LysoTracker对酸性溶酶体进行示踪。结果成功构建HL7702细胞Sidt2^(+/+)组及Sidt2^(-/-)组,HL7702细胞Sidt2^(-/-)组较Sidt2^(+/+)组相比,自噬关键蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ及P62表达均增多(P<0.01),免疫荧光结果显示LC3B及P62亦明显增多(P<0.001),同时自噬相关蛋白Atg5、Atg7、Atg12表达减少(P<0.05)。LC3B与P62共定位降低,LC3B与LAMP1共定位降低,酸性溶酶体数量减少(P<0.05)。结论Sidt2基因的缺失导致人肝脏细胞自噬小体对P62货物蛋白的识别和封存障碍,同时酸性溶酶体数量减少、自噬小体与溶酶体融合障碍导致自噬溶酶体途径受阻,最终导致LC3B与P62发生堆积,肝脏细胞自噬受损。; 耿梦雅王李卓章尧章尧漆梦湘杨梦许家豪梁洋洋吕坤何春玲高家林; 关键词：溶酶体

超临界CO_2萃取牛蒡片挥发油及气相色谱-质谱联用分析被引量：1: 2012年; 目的:探讨超临界CO2萃取牛蒡片挥发油的可行性并检测其化学成分。方法:采用超临界CO2萃取得到牛蒡片挥发油,并用气相色谱-质谱联用(GC-MS)对其化学成分进行分析。结果:挥发油的萃取率为0.84%,从挥发油中分离出41个峰,鉴定出其中31种化合物。结论:超临界CO2萃取可作为一种有效提取牛蒡片挥发油的方法,其挥发油为多种类型化合物的混合物。; 窦德宇刘炎柳春燕杨丽芬陈靠山; 关键词：超临界CO2萃取气相色谱-质谱联用

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