西藏农牧学院动物科学学院
- 作品数：535 被引量：1,217H指数：14
- 相关作者：李瑜鑫查果李龙李德胜田飞鹏更多>>
- 相关机构：华中农业大学动物医学院中国农业大学动物科技学院西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金西藏自治区自然科学基金国家肉牛牦牛产业技术体系项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 红景天提取物对高原缺氧条件下肉鸡法氏囊疫苗免疫作用的影响被引量：1
- 2019年
- 试验旨在研究红景天提取物对高原缺氧条件下肉鸡接种法氏囊疫苗和绵羊红细胞后产生的特异性抗体水平的影响。随机选取100只1日龄健康AA肉仔鸡,随机分为5组。其中,对照组只饲喂基础日粮,其余4组分别在基础日粮中添加0.10%、0.15%、0.20%和0.40%红景天水提物干粉。每个组取半数鸡只于13日龄腹腔注射接种绵羊红细胞,另一半鸡只于20日龄口服接种法氏囊疫苗。研究发现,免疫接种法氏囊疫苗后2 d和19 d,相比于对照组,0.20%和0.40%红景天处理组显著提高了法氏囊疫苗抗体水平(P<0.05)。在腹腔注射绵羊红细胞后5 d、8 d和12 d时,相比对照组,0.20%和0.40%红景天处理组显著提高了绵羊红细胞抗体水平(P<0.05)。该试验表明红景天提取物可以提高高海拔缺氧条件下肉鸡特异性抗体水平,因此其可能作为高海拔缺氧条件下肉鸡日粮的一种免疫调节性添加剂。
- 李龙仇薪鑫刘锁珠闫红军
- 关键词：红景天提取物缺氧肉鸡抗体
- 非洲猪瘟病毒PCR检测方法的建立被引量：6
- 2021年
- 非洲猪瘟给全球养猪业造成了严重危害,需要建立更加敏感的PCR检测方法。根据非洲猪瘟病毒(ASFV)的VP72基因序列,设计PCR引物,建立了ASFV PCR检测方法。以合成的VP72基因片段为阳性对照,进行敏感性试验和特异性试验。同时与世界动物卫生组织(OIE)推荐的PCR引物进行对比试验。结果显示,建立的方法可用于ASFV检测,且对其他病毒检测时无交叉反应,特异性良好;敏感性可达到10-8,比OIE推荐的方法高10倍,为ASFV检测提供了一种新的PCR方法。
- 李云灿胡剑武赵俊龙李家奎
- 关键词：非洲猪瘟病毒聚合酶链反应
- 藏羚羊和藏野驴粪便真菌多样性比较研究被引量：2
- 2021年
- 为探究西藏地区反刍动物(藏羚羊)和单胃草食动物(藏野驴)粪便中真菌群落结构,本研究采用ITS1区高通量测序方法分析西藏羌塘国家自然保护区藏羚羊和藏野驴新鲜粪便中真菌的多样性。结果表明:从5头藏羚羊新鲜粪便中共鉴定出5个门、15个纲、32个目、45个科和56个属的真菌;从5头藏野驴新鲜粪便中共鉴定出3个门、10个纲、18个目、18个科和20个属的真菌。子囊菌门Ascomycota为优势门,相对多度占所有真菌门数的82.70%;寡囊盘菌属Thelebolus、Naganishia和亚隔孢壳属Didymella为优势属,3个属的相对多度依次占所有真菌属数的43.91%、7.38%和7.03%。藏羚羊和藏野驴粪便真菌菌群存在明显差异,其中34个属的多度在两种野生动物新鲜粪便中有显著差异,这说明动物的种类会影响其粪便中真菌多样性。
- 商振达孔庆辉谭占坤商鹏王宏辉刘锁珠
- 关键词：藏羚羊藏野驴
- 猪轮状病毒NJ2012株VP8基因序列分析及原核表达被引量：2
- 2020年
- 为深入研究猪轮状病毒VP8蛋白的结构和功能,以及研制新型猪轮状病毒疫苗,利用生物信息学软件DNAStar对本研究室保存的1株A组G9P7型猪轮状病毒NJ2012的VP8基因序列进行核苷酸和氨基酸同源性分析;设计并合成1对引物,采用RT-PCR方法扩增VP8蛋白编码基因,用限制性核酸内切酶对目的片段与pET28a(+)原核表达载体进行双酶切,构建了重组原核表达载体,用IPTG诱导表达,并进行Western blot验证。结果显示:NJ2012毒株的VP8基因序列与参考毒株序列的核苷酸同源性为53.9%~99.2%,氨基酸同源性为42.1%~97.5%;VP8基因克隆成功,经测序与目的基因完全一致;经鉴定,构建的重组原核表达质粒pET28a-VP8能够在DE3宿主菌中表达,该蛋白以包涵体形式存在;Western blot结果显示该蛋白可与抗His-tag鼠单克隆抗体发生特异性反应。本研究实现了VP8蛋白在原核系统中稳定表达,为调查该蛋白的免疫原性及研制安全、高效的猪轮状病毒亚单位疫苗提供了参考。
- 常新见周金柱范宝超郭容利朱琳赵永祥牛家强何孔旺李彬
- 关键词：猪轮状病毒蛋白纯化原核表达
- 西藏谢通门县山羊球虫感染情况调查被引量：2
- 2017年
- 为了解西藏谢通门县山羊球虫的感染情况,采用饱和蔗糖溶液漂浮法,对该地区采集的260份山羊新鲜粪便样品进行了显微镜检查,并对球虫种类进行了形态学鉴定。结果:该地区山羊球虫总感染率为81.15%(211/260),共感染12种山羊艾美耳球虫(Eimeria),其中艾丽艾美耳球虫(E.alijevi)和苍白艾美耳球虫(E.pallida)的感染率分别为52.7%(137/260)和50.8%(132/260),为优势虫种。山羊感染球虫多呈混合感染,混合感染率为61.7%(129/209),并首次在西藏地区发现了斑点、柯察、苍白艾美耳球虫。依据本次调查山羊球虫的结果和艾美耳球虫孢子化卵囊特征,制订了山羊球虫检索表。结论:西藏谢通门县山羊球虫的感染情况较为严重,建议积极做好防控措施,减少球虫感染。
- 常艳凯毋亚运郑双健王璐李东方李家奎李家奎张龙现张素梅
- 关键词：球虫感染山羊
- 西藏部分地区牦牛源肺炎克雷伯菌的分离、鉴定、毒力及耐药基因分析被引量：5
- 2021年
- 利用细菌分离纯化、生化鉴定、分子生物学及WHO推荐的K-B纸片法等研究方法,对从西藏不同地区采集的103份牦牛鼻拭子样品进行肺炎克雷伯菌的分离鉴定,对分离鉴定的疑似菌株进一步进行16S rDNA测序及系统发育分析,荚膜血清学分型、毒力基因和耐药表型及耐药基因检测。结果显示,从西藏林芝市、那曲市分离鉴定出8株牦牛源克雷伯菌,分离率为7.76%;挑取其中2株进行测序,结果显示与重庆牛源KM096433和北京土壤源JQ003560聚为一簇,亲缘关系最近;8株西藏牦牛源克雷伯菌荚膜血清型均为K20型;此外,8株菌株均检测到3种毒力基因mrkD、fimH和wabG,检出率为100%;blaTEM、sul3、tetA和tetA耐药基因检出率分别为100%,100%,75%和75%,其余耐药基因均未检出;药敏试验结果显示,8株菌株对青霉素和氨苄西林耐药率达100%,其次是克拉霉素、四环素和多西环素耐药率达75%,而对喹诺酮类药物,如:环丙沙星、氧氟沙星和诺氟沙星强敏感;致病性试验中对照组全部存活,处理组小鼠病死率为80%(4/5),病变主要表现为脾脏肿大。本试验对西藏地区牦牛源肺炎克雷伯菌的流行情况、毒力基因和耐药性进行分析,对牦牛源肺炎克雷伯菌的防制具有重要的指导意义。
- 贡嘎格桑卓玛左伟罗润波索朗斯珠
- 关键词：肺炎克雷伯菌毒力基因耐药基因西藏牦牛
- 不同处理方法对紫穗槐种子萌发特性的影响
- 2020年
- 为了探明紫穗槐种子萌发生长的适宜处理条件,试验以高速公路护坡常用植物紫穗槐(Amorphafruticosa)种子为主要材料,采用化学处理(10%H2SO4和20%H2SO4、10%NaOH和20%NaOH分别浸种12,24,36 h)和变温[5℃(12 h)/15℃(12 h)、5℃(12 h)/20℃(12 h)、10℃(12 h)/25℃(12 h)]处理方法,分别以水浸种和恒温25℃为对照,测定发芽率、发芽势、发芽指数、发芽时滞、萌发持续时间、发芽率达到50%的时间(T50)和发芽率达到90%的时间(T90)及幼苗成活率指标。结果表明:紫穗槐种子萌发生长明显受不同处理方法的影响。化学处理时,与稀H2SO4和稀NaOH溶液处理相比,水浸种12 h条件下紫穗槐种子的萌发特性较好,发芽率、发芽势、发芽指数均最高,且最短时间内发芽率达到90%。变温处理时,5℃(12 h)/20℃(12 h)条件下,紫穗槐种子发芽率(93.09%)、发芽势(73.14%)和发芽指数(12.71)均达到处理间的最高值,其次为对照恒温25℃条件。5℃(12 h)/20℃(12 h)和水浸种12 h时幼苗成活率均达100%。说明紫穗槐种子适宜萌发生长的条件为5℃(12 h)/20℃(12 h)和水浸种12 h处理。
- 包赛很那郭云雷苗彦军
- 关键词：种子处理种子萌发成活率萌发特性
- 猪肺炎支原体纤毛黏附因子P97和F7-CTB对O型口蹄疫灭活疫苗的免疫增强作用被引量：4
- 2019年
- 旨在研究猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,简称Mhp)纤毛黏附因子P97以及F7鞭毛蛋白(flagellin,简称F)-霍乱毒素B亚基(cholera toxin B subunit,简称CTB)2种重组蛋白对口蹄疫(foot-and-mouth disease,简称FMD)灭活疫苗的免疫增强作用。通过体外表达获得pCold-F7-CTB、pET32a-P97-R12种重组蛋白,用间接酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,简称ELISA)方法检测pCold-F7-CTB蛋白的生物学活性,将重组蛋白分别与口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,简称FMDV)灭活抗原、口蹄疫灭活疫苗混合制备,皮下或腹腔接种Balb/c小鼠,共免疫2次,间隔3周。分别于免疫前、免疫后21、35、49d采血,49d后无菌摘取脾脏。采用阻断ELISA的方法检测小鼠血清口蹄疫O型病毒免疫球蛋白(IgG)抗体滴度,用流式细胞术检测脾淋巴细胞亚型比例,以评估免疫效力。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,简称SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western Blot)分析结果表明,2种重组蛋白成功表达。用GMl(神经节苷脂)-ELISA方法验证pCold-F7-CTB的生物学活性,发现融合蛋白F7-CTB保留了与GMl的结合能力。小鼠免疫试验结果表明,经皮下注射接种后,单独口蹄疫病毒灭活抗原组没有产生明显的抗体水平,而F7-CTB免疫增强剂组比单独口蹄疫病毒灭活抗原组的IgG滴度更高。在试验中发现,当重组蛋白与口蹄疫灭活疫苗联合使用时,血清中的IgG滴度明显增高,CD3^+CD8^+T淋巴细胞比值上升;P97和F7-CTB混合使用对口蹄疫灭活疫苗的免疫增强效果最佳。可以初步得出,免疫增强剂P97和F7-CTB具有协同作用,皮下注射可显著提高FMD的特异性IgG水平,CD3^+CD8^+T淋巴细胞比值升高,显示其具有良好的应用前景。
- 郭芸芸张雪寒刘茂军王警牛家强何孔旺
- 关键词：口蹄疫免疫增强剂
- 猪ELOVL6基因多态性与表达差异分析被引量：1
- 2020年
- 为探究ELOVL6基因在猪肌肉生长、脂肪沉积等性状的分子调控机制中所发挥的作用,本实验对藏猪、滇南小耳猪、大约克猪的背脂、背最长肌和肝脏组织的ELOVL6基因进行了RT-qPCR检测,并对ELOVL6基因Intron 3区域进行了多态性分析。结果表明:ELOVL6基因在3个猪种背脂和背最长肌中的趋势完全一致,即藏猪>滇南小耳猪>大约克猪,两两之间差异极显著;在肝脏组织中,藏猪、滇南小耳猪与大约克猪ELOVL6基因的表达量与在背脂和背最长肌中一致,但藏猪与滇南小耳猪差异不显著。在ELOVL6基因Intron3区域,’G^99954A、’T^99793C、’C^99650T3个位点存在连锁突变,且国内脂肪型藏猪、滇南小耳猪均与外来瘦肉型大约克猪呈极显著差异,而藏猪与滇南小耳猪差异不显著。综上可知,ELOVL6基因’G^99954A、’G^99793A、’G^99650A位点的多态性与mRNA表达差异性显著相关,推测这3个连锁突变位点可能是调控ELOVL6基因表达的关键功能位点,为下一步开发肉质性状的遗传标记及利用分子标记实现优质猪肉的选育提供参考。
- 段梦琪张健张健吴绿草郭新颖蔡如玉祁雨田商鹏强巴央宗
- 关键词：MRNA表达
- 藏北“小气候环境条件下”人工草地建植被引量：4
- 2017年
- 2015年和2016年在藏北那曲县仁毛7村、那曲镇胖玛村和罗玛镇曲普村采用7种单播饲草模式和6种混播组合模式进行"小气候环境条件下"人工草地建植,共实施了120户1.3 hm^2。以期选择出适合藏北"小气候环境条件下"人工草地种植的最佳模式,为藏北牧区牧民利用"小气候环境条件下"进行人工草地建植和实现畜牧业可持续发展提供科学参考依据和理论指导。研究表明,在藏北"小气候环境条件下"种植的饲草料作物生长旺盛,产草量高,生长周期延长,"燕麦+青稞"混播模式下植株高度在1 m左右,平均鲜草量高达48 291.5 kg/hm^2,可有效缓解藏北地区冷季牧草短缺的问题,且藏北"小气候环境条件下"人工草地建植技术简单,值得推广。
- 魏学红张卫红孙磊赵玉红王向涛王明涛
- 关键词：小气候环境人工草地
