清华大学医学院生物科学与技术系
- 作品数：4 被引量：27H指数：2
- 相关作者：任永明张弛更多>>
- 相关机构：中国科学院西北高原生物研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划清华-裕元医学科学研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 松果菊苷通过下调p53的表达抑制人成纤维细胞的衰老(英文)被引量：1
- 2011年
- 松果菊苷是一种从肉苁蓉中分离得到的苯乙醇苷类化合物,前期研究结果表明其有延缓人成纤维细胞衰老的作用。为了阐明松果菊苷抗衰老的机制,我们对相关基因p53,p16,p21及Rb的mRNA及蛋白水平的表达进行了检测,结果表明用松果菊苷处理后,衰老的人成纤维细胞(MRC-5)p53的表达被下调,且呈剂量依赖方式。进一步的研究显示可能和SIRT1白的上调有关。分子对接模拟结果显示松果菊苷的作用可能优于另一公认的抗衰老剂白藜芦醇。松果菊苷可能是一种潜在的可以调控细胞衰老的化合物。
- 朱慧成聪张弛王钊
- 关键词：松果菊苷细胞衰老P53SIRT1
- 高原鼠兔HIF-1α基因真核表达载体的构建及细胞表达和定位被引量：2
- 2009年
- 利用PCR从克隆质粒PMD18-T-pHIF-1α中扩增鼠兔HIF-1α;构建重组质粒pcDNA3.0/6Xmyc-p HIF-1α,用重组质粒转染HEK-293T,HeLa和COS-7细胞,通过免疫印迹分析,检测HIF-1α表达蛋白在细胞中的分布。EcoRI和XhoⅠ酶切鉴定和序列分析表明,构建的pcDNA3.0/6Xmyc-pHIF-1α真核表达载体序列正确;HIF-1α在真核细胞中能够正确表达,且其表达产物主要存在于细胞核中。
- 李红阁赵新全常智杰任永明王德鹏
- 关键词：高原鼠兔HIF-1Α基因真核表达载体
- 高原鼠兔低氧诱导因子-1α蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备
- 2009年
- 高原鼠兔生活在青藏高原海拔3000～5000m的区域,具有极强的低温、低氧耐受能力。低氧诱导因子-1(HIF-1)是一种由HIF-1α和HIF-1β组成的异源二聚体转录因子,在生物体的低氧适应性调节中起着关键作用。低氧主要通过调节HIF-1α蛋白水平来影响HIF-1α的转录活性。本研究用DNA重组技术将高原鼠兔HIF-1α(pHIF-1α)(538/822)编码基因序列亚克隆至原核表达载体PGEX-4T-1中,并在大肠杆菌BL21菌株中进行高效诱导表达,获得可溶性表达产物。将纯化后的GST-pHIF-1α(538/822)融合蛋白作为免疫原免疫家兔制备多克隆抗体。免疫印迹结果表明,制备的抗体能够识别高原鼠兔HIF-1α蛋白。进一步利用亲和纯化的方法对此多克隆抗体进行了纯化。免疫印迹和免疫染色的结果表明,纯化的抗体可以用于检测外源以及内源的高原鼠兔HIF-1α蛋白的表达和定位,为后续的研究提供了重要的实验材料。
- 李红阁赵新全常智杰任芳丽
- 关键词：高原鼠兔低氧诱导因子-1Α原核表达多克隆抗体免疫印迹免疫染色
- 反复冻融配合超声振荡洗涤制备猪脱细胞真皮基质被引量：24
- 2007年
- 目的:改进猪脱细胞真皮基质制备方法,并与传统制备方法进行比较,为临床大面积烧伤患者治疗提供更安全、更廉价的异体皮源。方法:实验于2003-10/2007-03在北京积水潭医院烧伤研究所完成。①实验材料:实验动物为3月龄清洁中华香猪,由北京积水潭医院动物室提供。实验符合动物伦理学标准。②实验方法:取25kg实验室环境养殖的健康中华香猪,麻醉处死去毛后取躯干部位全层皮肤,仔细剃除毛发,去除脂肪。采用反复冻融,配合超声振荡和化学去污剂处理的复合方法,获得脱细胞猪真皮基质。③实验评估:利用常规病理检查和电子显微镜检查其有无明显细胞碎片残留,测试其机械强度、亲水性和细胞毒性,通过动物埋藏实验确定其组织相容性,并以戊二醛交联的脱细胞异体皮,戊二醛交联的脱细胞猪皮,以及新鲜人皮作对照,结果:①常规病理检查可见真皮结构完整,无明显破坏;上皮细胞清除彻底,无明显细胞碎片残留,电子显微镜检查见脱细胞猪皮的胶原结构完整,未发现破坏痕迹,无明显细胞残留。②各组中脱细胞猪皮基质的极限应力强度和新鲜人皮接近,无明显统计学差别(P>0.05);戊二醛交联的脱细胞猪皮强度最低,戊二醛交联的脱细胞异体皮的强度最高,且与新鲜人皮相比也有明显统计学差别(P<0.01)。③戊二醛交联的脱细胞异体皮亲水性最强,其余三者相似。④脱细胞猪皮基质浸提液中细胞生长旺盛,7d后脱细胞猪皮基质两次测试相对增殖度值分别为:182,169。按照6级分级标准,脱细胞猪皮基质毒性级别为0级,在国家标准允许范围内。⑤脱细胞猪皮基质植入1,3周,边界不清,炎性反应与吸收均不明显,新生血管与成纤维细胞长入,植入12周,植入物与组织融为一体,新生血管与成纤维细胞填充真皮支架。结论:所制备的猪脱细胞真皮基质产品真皮基质完整,细胞毒性低,物�
- 张国安宁方刚钟京鸣于东宁赵南明
- 关键词：脱细胞真皮基质
