苏州大学附属儿童医院儿科医学研究所
- 作品数：31 被引量：68H指数：5
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- 热惊厥幼龄大鼠脑内Fos和热休克蛋白-70及锌离子转运体3mRNA表达的研究被引量：8
- 2008年
- 目的探讨热应激（Heatstress，HS）和热惊厥（Febrileconvulsions，FC）对脑内FOS蛋白、热休克蛋白70（Heatstressprotein-70，HSP-70）和锌离子转运体3（Zinctransporter3，ZnT3）表达的影响。方法清洁级21日龄雄性SD大鼠，体重（52—62）g，由浙江大学医学实验动物中心提供。36只大鼠随机分为正常对照组（8只）和热应激组（28只）。28只热应激处理大鼠中15只达到5级（设为热性惊厥组，Febrileconvulsiongroup，FC），10只未出现惊厥（设为单纯热应激组．Heatst艄group，HS），3只达到2级惊厥，弃用。采用热水浴诱导21日龄大鼠FC模型，应用免疫组织化学技术对Hs和FC大鼠Fos、HSP-70免疫反应性在不同脑区的表达进行分析，原位杂交检测ZnT3表达。计量资料以均数±标准差（x^-±s）表示，首先作正态性W检验和方差齐性检验，符合正态性分布和总体方差相等时，采用方差分析。P〈0．05认为差异具有统计学意义。结果FC组大鼠大脑皮层各区和海马各区Fos阳性细胞数明显高于HS组大鼠（P〈0．01）。HS组和对照组未见HSP-70-IR阳性细胞，而FC组则于大脑皮层、海马、杏仁核、丘脑及下丘脑见大量HSP-70-IR阳性细胞，呈弥漫性分布。FC组海马区域可见明显ZnT3mRNA表达，而HS组和对照组无明显表达。结论FC组海马及大脑皮层各区FOS高表达，表明FC组大鼠脑神经元呈过度兴奋状态，为神经元的早期轻微损伤提供了依据。FC组出现HSP-70迅速表达，而HS组表达阴性，提示FC可能导致神经细胞在很早的时间内发生损伤变性。FC组海马ZnT3mRNA明显表达提示FC组海马区域存在异常增高的锌离子转运。
- 倪宏水泉祥
- 关键词：热性惊厥FOS热休克蛋白70
- 热应激和热惊厥幼龄大鼠丘脑内CCK蛋白表达研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨热应激(Heat Stress,HS)和热惊厥(Febrile Convulsions,FC)对丘脑胆囊收缩素蛋白(Chole-cystokinin,CCK)表达的影响。方法采用热水浴诱导21日龄大鼠FC模型,应用免疫组织化学技术对HS和FC大鼠CCK免疫反应性在丘脑区的表达进行分析。结果(1)对照组和HS组丘脑偶见零星表达。而FC组则于丘脑及下丘脑见大量CCK-IR阳性细胞,呈弥漫性分布,无明显核团分布特征;(2)FC组大鼠丘脑CCK-IR阳性细胞数明显高于HS和对照组大鼠(P<0.01)。HS和对照两组丘脑CCK-IR阳性细胞数无显著性差异(P>0.05)。结论CCK在FC组丘脑明显表达,表明CCK参与丘脑等前脑结构对惊厥活动的中枢调控。
- 陈大庆倪宏水泉祥李上淼丁振尧
- 关键词：热性惊厥热应激胆囊收缩素
- 干细胞丝素膜修复兔阴茎白膜缺损
- 2014年
- 目的研究脂肪间充质干细胞（adipose mesenchymal stem cells，ADMSCs）复合丝素膜在修复阴茎白膜缺损时纤维组织的重塑效果。方法选择雄性新西兰大白兔56只建立白膜缺损模型，按随机数字表法分为四组：A组为丝素膜修补组，B组为ADMSCs丝素膜修补组，C组为睾丸鞘膜修补组，D组为对照组，每组14只。术后6，12周行组织学HE染色、天狼星红染色、Hart染色和巨噬细胞免疫荧光染色检查，观察各组修复情况。结果术后12周HE染色显示，D组新生纤维组织排列紊乱，A、B、C组新生纤维组织排列整齐。天狼星红染色显示，Ⅰ型、Ⅲ型胶原纤维面积（以像素表示）A组为98780±4190，51177±5464；B组为94855±9010，50815±3895；C组为99860±6015，50948±6595；D组为79386±2237，85278±2645；其中A、B、C组胶原纤维以Ⅰ型为主，三组间差异无统计学意义，而D组Ⅰ型胶原纤维少于其他三组（P〈0．01），Ⅲ型胶原纤维多于其他三组（P〈0．01）。Hart染色显示，A、B、C和D组弹性纤维面积（以像素表示）分别为2805±90，2849±84，3068±485和1961±96，B、C组差异无统计学意义，A组显著少于B、C组（P〈0．01），D组显著少于其他各组（P〈0．01）。术后6周巨噬细胞阳性数A、B、C和D组分别为4．10±0，87，3．80±0，78，3．70±0．94和6．80±1．63，A、B、C组均显著低于D组（P〈0．01），A、B、C组差异无统计学意义。结论ADMSCs丝素膜在修复兔阴茎白膜缺损时能达到与自体组织修复基本同等的效果。
- 张亚周云连学刚苗小芬王睿刘琳
- 关键词：间质干细胞丝素蛋白
- 发育期大鼠青霉素点燃后大脑皮质自噬标记蛋白LC-3表达及E-64d干预效应的研究
- 2012年
- 目的研究发育期大鼠反复惊厥后大脑皮层中自噬标记蛋白LC-3的表达,以及E-64d对其表达的影响。方法生后21 d的SD大鼠随机分成惊厥组、对照组、干预组3组,每组24只。惊厥组大鼠隔日腹腔注射青霉素(4.8×106U/kg),连续6次,诱导惊厥发作;对照组大鼠予同等剂量的生理盐水腹腔注射;干预组大鼠于腹腔注射青霉素诱导惊厥发作前,腹腔注射E-64d(4μg)。惊厥组和干预组大鼠于末次惊厥后3 h、12 h、24 h和出生51 d处死并取其大脑皮质,对照组大鼠也在相应时间点取大脑皮质。采用蛋白质免疫印迹技术(Western-blot)分别检测大鼠大脑皮质中自噬标记蛋白LC-3的表达。结果惊厥组大鼠于末次惊厥后3 h、12 h、24 h大脑皮层LC3II/LC3I较对照组升高,差异有统计学意义(t=2.091～10.353,P均<0.05);干预组与惊厥组大鼠比较,LC3II/LC3I降低,差异有统计学意义(t=2.911～5.980,P均<0.05)。在出生51 d时,三组大鼠间差异无统计学意义(P均>0.05)。结论大鼠惊厥急性期LC-3蛋白明显上调,自噬途径被激活,而E-64d参与了自噬途径的调控。
- 张乐玲倪宏闫建珍
- 关键词：惊厥发育期
- 运动训练对发育期反复惊厥所致认知损伤及海马GABA-Aα3和CCK表达的远期影响
- 背景介绍:发育期反复或长程惊厥(癫痫持续状态)是导致儿童期运动发育落后(残障,脑性瘫痪)和智力障碍的主要病因之一。新近研究表明运动训练能够改善脑损伤所造成的认知功能下降,促进损伤脑的功能恢复。我们课题组在国内率先开展了运...
- 倪宏
- 关键词：惊厥CCK
- 文献传递
- 泡泡浴水疗对新生期大鼠反复惊厥性脑损伤保护作用的探讨被引量：3
- 2011年
- 目的探讨泡泡浴水疗对新生期大鼠反复惊厥性脑损伤是否具有保护作用。方法出生6d（P6）的健康SD大鼠随机分为4组各15只，惊厥组（RS组）和惊厥水疗组（HRS组）在P6吸入三氟乙醚诱导惊厥发作，持续30min，连续6d，对照组（CON组）和对照水疗组（HCON组）同样操作但不吸入三氟乙醚。于末次惊厥后第2天对HCON及HRS组采用泡泡浴进行干预，连续28d。观测各组大鼠体格发育及神经行为表现，PS0时通过免疫印迹技术检测大脑皮质可塑性相关基因-1（Plasticity relatedgene1，PRG-1）、抗凋亡基因Bcl-2蛋白的表达。结果1-惊厥后RS组大鼠各日龄体质量较CON组显著降低（P〈0．05）；水疗后HRS组体质量较RS组显著增高（P〈0．05）。各组生理发育现象（竖耳、门齿萌出、睁眼）出现时间无显著差异。2．旷场行为实验：RS组旷场得分较CON组明显降低（P〈0．05），HRS组旷场得分较Rs组明显升高（P〈0．05）。泡泡浴可增强反复惊厥大鼠的兴奋性和探索能力[P26开场得分：CON组为（45．78±18．31）分，HCON组为（59．78±25．61）分，RS组为（27．78±16．83）分，HRS组为（53．15±22．43）分，P〈0．01]。3．4组大鼠大脑皮质PRG-1、Bcl-2蛋白表达存在显著差异（F=3．477／7．36，P〈0．05）。其中RS组PRG．1（1．149±0．191）表达升高、Bel-2（1．040±0．116）表达降低，与CON组（PRG-1为0．910±0．162，Bcl-2为1．259±0．157）比较均差异有显著性（P〈0．05）；HRS组Bcl-2（1．57±0．333）表达水平较RS组明显升高（P〈0．05）。结论新生期大鼠反复惊厥导致生长发育延迟、神经行为损伤，惊厥后早期进行泡泡浴干预对神经损伤有修复作用，大脑皮质PRG-1、Bcl-2参与发育期惊厥性脑损伤病理生理机制。
- 王洁英倪宏
- 关键词：惊厥神经行为BCL-2
- 新生期大鼠反复惊厥后海马LC-3的表达及干预
- 目的研究新生期大鼠反复惊厥后海马中LC-3的表达及3 MA对表达的干预作用。方法生后6 d的SD大鼠随机分成3组,每组24只,惊厥组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作5次,每次间隔30 min,连续9 d;对照组同样操作但不吸...
- 倪宏巩勇陶陆阳
- 关键词：惊厥自噬
- 文献传递
- Cathepsin B抑制剂对发育期惊厥大鼠海马自噬相关蛋白表达的调节被引量：3
- 2011年
- 目的探讨新生期大鼠反复惊厥后海马自噬、凋亡相关蛋白Beclin-1，Cathepsin B和Bcl-2的表达及溶酶体蛋白酶抑制剂CBI对表达的干预作用。方法实验在苏州大学神经科学研究所进行。日龄6d的Sprague-Dawley大鼠90只随机（随机数字法）分为3组，每组30只：对照组、反复惊厥组及CBI组。反复惊厥组（RS）每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作5次，每次间隔30min，连续9d；对照组同样操作但不吸人三氟乙醚；CBI组于惊厥前腹腔注射cathepsin B（2μL，0．5μg／μL），同样方法吸人三氟乙醚诱导惊厥发作。各组分别于末次惊厥后1．5h，3h，6h，24h和生后35d5个时间点[（n=6／（每点，每组）]取海马组织，采用免疫印迹技术检测自噬相关蛋白Becfin-1，Cathepsin B和Bcl-2的表达，采用方差分析进行统计。结果对照组和CBI组同一时间点Beclin-1，Cathepsin B和Bcl-2的表达差异无统计学意义，惊厥组（1．5h，3h，6h，24h）海马组织中Beclin-1和Cathepsin B的表达明显高于对照组和CBI组同一时间点的Beclin-1表达（F值分别为Beclin-1：7．44，6．58，5．43，9．69，P〈0．05；CathepsinB：4．62，2．02，3．49，4．86）；而惊厥组（1．5h，3h，6h，24h）Bcl-2的表达则明显低于对照组和CBI组同一时间点Bcl-2的表达（F值分别为4．34，3．79，4．88，4．42，P〈0．05）。结论发育期大鼠反复惊厥后海马神经元自噬信号通路激活，同时抗凋亡基因Bcl-2蛋白水平显著下调，表明自噬信号途径与凋亡途径共同激活，协调参与发育期大鼠惊厥急性期兴奋毒性脑损伤的病理生理机制。
- 倪宏闫建珍张乐玲
- 关键词：惊厥BECLIN-1CATHEPSIN自噬CBI
- 新生期惊厥对大鼠海马NR1和GABAARα1表达的长期影响
- 2008年
- 目的研究新生期惊厥对大鼠海马N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体1（NR1）和γ-氨基丁酸A受体α1亚单位（GABAARα1）表达的长期影响，以期揭示发育期惊厥导致成年大鼠惊厥阈降低的机制。方法生后6d的Wistar大鼠48只采用完全随机法分成三氟乙醚吸入惊厥组和对照组，每组各24只，惊厥组再细分为单次惊厥组（诱导惊厥一次，持续30min）和反复惊厥组（每天诱导惊厥一次，持续30min，连续6d），对照组同样操作但不吸入三氟乙醚。分别于惊厥后第7天和第75天取大鼠海马。匀浆提取膜蛋白，应用免疫印记法测定NR1、GABAARα1蛋白表达。结果单次惊厥组和反复惊厥组75d的海马NR1表达无显著变化，而反复惊厥组7d的海马NR1表达较对照组显著增加（P〈0.05）。同时，与对照组相比，GABAARα1亚单位在单次惊厥组第75天以及反复惊厥组的表达均有统计学意义（P〈0．05）。结论新生期大鼠反复或单次长程惊厥持续状态能够对海马NR1和GABAARα1表达产生远期影响，这种改变可能在发育期惊厥导致的脑兴奋性提高和惊厥阈降低中起重要作用。
- 倪宏姜玉武陶陆阳王静敏吴希如
- 关键词：惊厥性脑损伤
- 生酮饮食对新生期反复惊厥大鼠神经行为的影响及机制被引量：4
- 2013年
- 目的观察生酮饮食（KD）对三氟乙醚所致新生期反复惊厥大鼠神经行为损伤的影响和载脂蛋白E（ApoE）表达的变化。方法48只日龄8d（P8，下同）的sD大鼠依据随机数字表法随机分为对照组（NS组）和惊厥组（Rs组），每组各24只。于P9RS组大鼠吸入三氟乙醚诱导惊厥发作，反复诱导惊厥持续30min，每日1次，同样方法连续诱导8d；NS组同样操作但不吸入三氟乙醚。于P28每组大鼠依据随机数字表法再随机分为两组，即单纯对照组（NS＋ND组）、对照加生酮饮食组（NS＋KD组）、单纯惊厥组（RS＋ND组）、惊厥加生酮饮食组（RS＋KD组），每组各12只。于P42进行神经发育指标监测。于P58每组各随机取6只大鼠断头取大脑皮层组织，采用免疫印迹技术（Westernblot）检测ApoE的表达。结果P42各组大鼠神经发育指标结果显示：平面翻正实验中，NS＋ND组平面翻正时间[（1．04-0．14）s]与RS＋ND组[（0．75±0．32）s]相比差异有统计学意义（P〈0．05），RS＋KD组平面翻正时间与Rs＋ND组相比差异无统计学意义（P〉0．05）；负向趋地反应实验中，NS＋KD组、RS＋ND组负向趋地反应时间[（3．17±0．58）s，（6．754-0．75）s]与NS＋ND组[（1．58±0．52）S]相比差异均有统计学意义护〈0．05），RS＋KD组负向趋地反应时间[（4．58±0．52）s]与Rs＋ND组[（6．75±0．75）s]相比差异有统计学意义（P〈0．05）；悬崖回避实验中，NS＋ND组、RS＋KD组悬崖回避时间[（5．754-2．90）s，（9．50±4．36）S]与RS＋ND组[（14．004-4．79）s]相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。Westernblot结果显示：RS＋ND组ApoE在大脑皮层的表达（1．26士0．30）与NS＋ND组（0．78±0．12）相比差异有统计学意义（P〈0．01），且与RS＋KD组（0．894-0．10）相比差异也有统计学意义（P〈0．05）。结论生酮饮食能够改善新生期反复惊厥所致的
- 田甜赵东敬郭兴青孙奇徐丹凤倪宏
- 关键词：生酮饮食神经行为载脂蛋白E
