北京协和医学院药物研究所新药作用机制研究与药效评价北京市重点实验室
- 作品数：44 被引量：195H指数：8
- 相关作者：刘耕陶王宏旭史记刘力力许建更多>>
- 相关机构：天津医科大学肿瘤医院国家肿瘤临床医学研究中心天津医科大学肿瘤医院赤峰学院医学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠脂肪性肝病超声影像学检测方法的建立被引量：2
- 2014年
- 本文探讨了小鼠肝脂堆积程度的超声影像学半定量检测方法。选取正常C57BL/6J小鼠、高脂饮食诱导的轻度脂肪肝HFD小鼠模型和高热能饮食诱导的中重度脂肪肝KKAy小鼠模型,分别应用肝脏病理学分析和肝组织甘油三酯含量评价动物肝脏的脂质堆积程度。用小动物超声成像系统测定肝组织内与超声波传播同方向的一定距离间2处区域的超声波回声强度,并计算回声衰减系数a值。采用Spearman等级相关分析方法对动物肝脏甘油三酯含量和回声衰减系数a值进行相关性分析。结果显示:与CON组相比,HFD小鼠和KKAy小鼠均具有明显的肝脏脂质堆积,且KKAy小鼠的病变程度较HFD小鼠明显加重。超声波检测结果显示,与CON组相比,HFD小鼠、KKAy小鼠的回声衰减系数a值依次递增。小鼠的肝脏回声衰减系数a值与其肝脏甘油三酯含量具有明显的正相关性,相关系数r=0.744(P<0.01)。本研究表明,肝脏回声衰减系数法可以用来客观评价小鼠肝脏脂质堆积程度。该方法简便易行且具有无创性,可用于监测小鼠肝脏脂肪性病变过程及其药物治疗效果。
- 李莫涵张晓琳叶菲
- 关键词：脂肪性肝病超声影像学
- 不同种类的脂肪酸对肝细胞脂质堆积的研究
- 2021年
- 目的:比较不同种类的脂肪酸对人肝癌细胞(HepG2)脂质堆积的影响。方法:HepG2细胞随机分为对照组(Con)、棕榈酸组(PA)、油酸组(OA)、亚油酸组(LA)和亚麻酸组(ALA)。培养24 h后,以MTT法比较不同种类脂肪酸对肝细胞存活率的影响;同一浓度下,以油红O染色法比较,各组细胞内脂滴生成情况拍照并测量吸光度;以酶学法检测各组细胞内甘油三酯含量比较不同种类脂肪酸对肝细胞脂质堆积的影响。结果:确定了每种脂肪酸诱导的浓度为50μmol/L,同一浓度下,随着PA、OA、LA、ALA各组脂肪酸的不饱和度依次增加,PA、OA、LA、ALA各组细胞内脂滴依次增多,细胞内TG含量依次升高。与对照组相比,PA无统计学差异,OA存在显著性差异(P<0.05),而LA和ALA分别存在极显著性差异(P<0.001)。且对每种脂肪酸诱导的肝细胞脂质堆积程度进行统计学分析,均存在显著性差异(P<0.05)。结论:同一条件下,不同种类的脂肪酸对肝细胞活力和脂质堆积程度的影响不同,提示可能与脂肪酸的不饱和度有关,不饱和度越高的脂肪酸对细胞脂质堆积作用越明显。
- 尹震张晓琳田金英姜楠李雪晨叶菲
- 关键词：脂肪酸肝细胞细胞活力
- 灵芝三萜类化合物的体外抗肿瘤活性研究被引量：25
- 2017年
- 目的研究灵芝三萜类化合物在不同肿瘤细胞上的抗肿瘤活性。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测3种灵芝三萜化合物对5种肿瘤细胞的抑制能力,绘制抑制曲线,并计算IC50,反映化合物的细胞毒活性。结果体外实验显示,3种灵芝三萜类化合物单体对5种肿瘤细胞表现出不同程度的抑制作用,其中灵芝酸Y的抑制作用比较强,对肺癌细胞H460的IC50为22.4μmol/L,其次是7-oxo-ganoderic acid Z2,IC50为43.1μmol/L。3种化合物灵芝酸Y、7-oxo-ganodericacid Z2和ganoderon B对其他被测细胞株未显示活性或活性很弱。结论灵芝酸Y对肺癌细胞H460显示了较强的抑制活性,7-oxo-ganoderic Z2对肺癌细胞H460显示了一定的抑制活性,且抑制作用具有剂量依赖性。灵芝酸Y和7-oxo-ganoderic Z2的抗肺癌作用有待于进一步深入研究。
- 闫征王宏旭刘莉莹杜国华陈若芸
- 关键词：三萜类化合物抗肿瘤四甲基偶氮唑盐
- 化合物WS090152治疗小鼠单纯性脂肪肝的实验研究被引量：2
- 2016年
- 本研究旨在探讨化合物WS090152(分子式C_(28)H_(35)NO_4Cl_4)改善小鼠脂肪肝的作用及其作用机制。以高脂饲料诱导C57BL/6J小鼠形成单纯性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver,NAFL)模型,灌胃给予小分子化合物WS090152(50 mg·kg^(-1)·d^(-1))。以肝脏甘油三酯(triglyceride,TG)含量及病理分析评价肝脏脂质堆积程度;以体重、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)和血清TG含量评价全身脂代谢情况;以正糖钳实验葡萄糖输注速率(glucose infusion rate,GIR)评价小鼠的胰岛素敏感性;以Western blot法分析肝组织的蛋白表达;以对基因重组人蛋白酪氨酸磷酸酶1B(human protein tyrosine phosphatase 1B,hPTP1B)活性及对动物肝脏PTP1B蛋白表达的影响评价其对分子靶点PTP1B的作用。结果显示,化合物WS090152能够降低NAFL小鼠肝TG含量(P<0.05)、改善脂肪肝的病理变化(P<0.001),增加机体胰岛素敏感性(P<0.01),降低血TC(P<0.01)和血TG(P<0.05)水平;显著抑制基因重组hPTP1B酶活性(IC_(50)=0.34μmol·L^(-1)),下调模型小鼠肝脏PTP1B的表达(P<0.05),上调其下游胰岛素受体(insulin receptor,IR)和AKT的磷酸化的水平;降低肝脏内脂质合成相关的因子固醇调节元件结合蛋白1c(lipogenesis-related proteins-1c,SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)和乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-Co A carboxylase,ACC)的表达。提示化合物WS090152可能通过抑制分子靶点PTP1B,增加胰岛素敏感性、降低肝脏脂质合成,从而发挥治疗NAFL的作用。
- 周莹李秀丽易琴张晓琳田金英王冬梅吴松叶菲
- 关键词：单纯性脂肪肝蛋白酪氨酸磷酸酶1B胰岛素抵抗
- ThiS可能作为一个原核翻译后修饰分子通过二硫键结合细胞蛋白(英文)
- 2014年
- 泛素及其相关蛋白是真核细胞中广泛存在的结构高度保守的一类小分子蛋白,参与蛋白翻译后修饰.尽管在少数原核种属含有Pupylation这样的翻译后修饰,在原核细胞中尚未发现通用的泛素样修饰系统.ThiS是原核细胞广泛存在的泛素样小蛋白分子,它作为硫转运蛋白参与辅助因子的合成.当与靶蛋白融合重组表达时,ThiS可降低靶蛋白在大肠杆菌中的稳定性.本研究旨在探讨ThiS是否可能在原核细胞中参与翻译后修饰.ThiS在大肠杆菌中重组表达时,它可与细胞蛋白游离巯基发生共价结合,但与真核细胞泛素修饰不同,ThiS是通过12位半胱氨酸的游离巯基与蛋白形成二硫键,而不是通过C端活化的硫代羧基的转化过程发生共价结合.在细胞内,氧化应激可诱导ThiS与蛋白的共价结合.结果提示,ThiS在大肠杆菌中与细胞蛋白的结合,可能与真核细胞泛素化修饰在功能上存在进化联系;原核细胞中这种ThiS的结合形式可能代表一种古老的原核泛素样修饰方式.
- 许建刘力力闫征王楠
- 关键词：原核生物翻译后修饰二硫键氧化应激
- 噁二唑类黄嘌呤氧化酶抑制剂的设计合成及活性评价被引量：2
- 2016年
- 黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)是治疗高尿酸血症及痛风的重要靶标。本文基于已上市的非嘌呤类XO抑制剂非布索坦(febuxostat)和托匹司他(topiroxostat),采用分子拼接和电子等排原理,设计合成了14个噁二唑类化合物并评价了它们对黄嘌呤氧化酶的抑制作用,其中5个化合物在10μmol·L^(-1)浓度下具有明显的体外酶抑制活性。
- 严定安张蕾田金英叶菲肖志艳
- 关键词：黄嘌呤氧化酶高尿酸血症噁二唑衍生物
- 天麻提取物N^6-羟苄腺嘌呤核苷对小鼠肌张力、运动协调能力及体温的影响被引量：2
- 2012年
- 目的观察天麻提取物N6-羟苄腺嘌呤核苷(NHBA)对小鼠肌张力、运动协调能力及体温的影响。方法 ICR小鼠随机分为溶剂对照组、地西泮3 mg/kg组,以及NHBA 5和15 mg/kg组,分别经腹腔注射给药。应用转棒实验观察NHBA对小鼠运动协调能力的影响,应用悬挂实验观察NHBA对小鼠肌张力的影响,测定肛温观察NHBA对小鼠体温的影响,采用高效液相色谱-电化学检测法测定SD大鼠脑组织内单胺类神经递质含量。结果 NHBA 5和15 mg/kg对小鼠的肌张力无明显影响;在5 mg/kg剂量下,NHBA明显降低小鼠体温,给药100 min后体温恢复正常,对小鼠的运动协调能力无明显影响;在15 mg/kg剂量下,NHBA明显影响小鼠的运动协调能力,给药后140 min此作用消失。神经递质测定结果表明,NHBA 5 mg/kg可明显降低大鼠下丘脑、脑干单胺类神经递质去甲肾上腺素(NA)的含量。结论 NHBA具有降低小鼠体温、影响小鼠运动协调能力的作用,其对小鼠肌张力无明显影响。NHBA降低脑内促觉醒神经递质NA水平可能是其发挥中枢抑制作用的机制之一。
- 张莹石建功刘耕陶张建军
- 关键词：天麻肌张力体温单胺类神经递质
- 丝状病毒进入抑制剂的细胞水平评价体系的建立被引量：1
- 2015年
- 埃博拉病毒属于丝状病毒家族,可引起人类恶性传染病。本文旨在建立可用于高通量筛选评价丝状病毒进入抑制剂的细胞水平重组病毒模型。基于重组病毒技术,共建立了三株丝状重组病毒模型,分别是扎伊尔型埃博拉重组病毒、苏丹型埃博拉重组病毒和马尔堡重组病毒。该模型以丝状病毒表面唯一负责病毒进入的糖蛋白为病毒表面蛋白,包裹带有荧光素酶报告基因的HIV内核,组装为丝状重组病毒颗粒。当病毒感染细胞后,病毒感染程度可通过检测细胞中荧光素酶活性获得。此模型靶点明确,安全性好,当进行丝状病毒进入抑制剂筛选时,可通过与水泡性口膜炎重组病毒联用判断化合物的特异性。应用此模型对文献报道的丝状病毒进入抑制剂进行评价,数据与文献报道相符,模型构建成功。丝状重组病毒进入模型的建立对于抗丝状病毒药物的快速筛选和研发有重要意义。
- 陈勍郭颖
- 关键词：埃博拉进入抑制剂重组病毒
- 性激素类药物阻断丝状病毒进入宿主细胞的活性研究
- 2015年
- 本研究应用丝状假病毒模型筛选了1 600个已上市药物,旨在发现具有阻断丝状病毒感染活性的药物。首先应用扎伊尔型埃博拉病毒包膜糖蛋白(Zaire Ebola virus glycoprotein,ZEBOV-GP)包装HIV-1核心的假病毒(ZEBOV-GP/HIV)感染细胞,并在感染前加入受试药物,通过检测被感染细胞中报告基因表达水平评价病毒的感染程度。研究发现,12个性激素类药物可抑制ZEBOV-GP/HIV感染,其中IC50<1μmol·L^(-1)的药物有3个,分别是枸橼酸托瑞米芬(IC50:0.19±0.02μmol·L^(-1))、枸橼酸他莫昔芬(IC50:0.32±0.01μmol·L^(-1))和枸橼酸克罗米芬(IC50:0.53±0.02μmol·L^(-1))。IC50介于1~10μmol·L^(-1)的药物有7个,分别是雌二醇苯甲酸酯(IC50:1.83±5.69μmol·L^(-1))、盐酸雷洛昔芬(IC50:3.48±0.07μmol·L^(-1))、马烯雌酮(IC50:4.00±9.94μmol·L^(-1))、雌二醇(IC50:5.26±9.92μmol·L^(-1))、炔雌醚(IC50:6.36±5.37μmol·L^(-1))、雌激素酮(IC50:6.87±0.03μmol·L^(-1))及非那雄胺(IC50:9.94±0.45μmol·L^(-1))。此外,己烷雌酚(IC50:14.20±0.55μmol·L^(-1))和醋酸氯地孕酮(IC50:24.60±0.36μmol·L^(-1))也有弱活性。其中枸橼酸托瑞米芬、枸橼酸他莫昔芬、枸橼酸克罗米芬、盐酸雷洛昔芬及炔雌醚对丝状假病毒苏丹型埃博拉病毒(SEBOV-GP/HIV)和马尔堡病毒(MARV-GP/HIV)也有抑制作用。
- 王丽丽陈勍周丽娜郭颖
- 关键词：糖蛋白假病毒性激素类药物
- 精氨酸对牛胰核糖核酸酶氧化复性的时相性抑制作用被引量：2
- 2014年
- 精氨酸常在重组蛋白的体外复性中,作为一种小分子添加剂用于抑制蛋白聚集。精氨酸对蛋白复性折叠过程本身的影响尚不清楚。首次以不易聚集的牛胰核糖核酸酶为研究对象,通过飞行质谱检测氧化复性中间体的变化,通过酶学活性检测蛋白活性的恢复过程,观察了精氨酸对氧化复性的直接影响。发现不同浓度精氨酸对牛胰核糖核酸酶的氧化复性有直接的抑制作用。特别在0.5 mol/L浓度时,精氨酸对牛胰核糖核酸酶氧化复性的抑制作用具有独特的时相依赖性:早期复性可持续至4 h,其活性恢复达30%后,晚期复性基本终止。这种抑制特征与脲的抑制作用有明显的不同,精氨酸没有完全抑制关键结构中间体的形成。结果说明,牛胰核糖核酸酶的氧化复性,除经关键结构中间体的主要通路外,还可能存在一个潜在复性通路,它是其氧化复性后期的关键限速通路。该复性通路可以被0.5 mol/L精氨酸完全阻断。
- 冯崔香邓丽刚闫征杜国华王楠
- 关键词：精氨酸氧化复性中间体
