上海组织工程研究与开发中心
- 作品数：146 被引量：593H指数：15
- 相关作者：刘伟杨光辉尹烁赵莉孙剑更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院华东理工大学上海第二医科大学附属第九人民医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术理学更多>>
- 组织工程血管体外构建方法及装置
- 本发明公开了一种组织工程血管体外构建方法及所采用的装置。本发明应用生物力学因素，刺激血管平滑肌细胞的增生，促进细胞的定向排布，增加平滑肌细胞的收缩特性和增加细胞—材料复合物中胶原含量及细胞中肌动蛋白重链的表达，并通过切应...
- 曹谊林李宏刘阳刘伟崔磊
- 文献传递
- 低温保存对人骨髓基质干细胞在脱钙骨上体外增殖及成骨能力的影响被引量：5
- 2006年
- 目的研究低温保存对人骨髓基质干细胞(BMSCs)在脱钙骨(DBM)上生长特性及成骨能力的影响。方法取3例志愿者骨髓(3～5mL),密度梯度离心、差速贴壁法获得BMSCs。第3代BMSCs在-196℃下保存24h,37℃复苏,测定细胞成活率。低温保存前、后的BMSCs分别用成骨诱导液诱导培养,至90%融合时,收集细胞接种在DBM支架上,并测定细胞在DBM上的粘附率。DiI荧光染料标记BMSCs,例置相差显微镜、荧光显微镜和SEM观察低温保存前、后的BMSCs在DBM上的生长及基质分泌情况,MTT法测定细胞在DBM上的增殖活性。通过测定碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素(OCN)含量观察细胞在DBM上的成骨能力。结果复苏细胞的存活率为(90．24±0．02)%。低温保存前、后的BMSCs在DBM上的粘附率分别为(97．25±1．17)%和(97．00±1．09)%。倒置相差显微镜及SEM观察显示低温保存前、后的BMSCs在DBM上粘附、生长良好,有大量细胞外基质分泌、沉积。低温保存前、后的BMSCs在DBM上MTT吸光度值和ALP活性的检测结果差异无显著性意义(P＞0．05)；体外培养12d时,MTT吸光度值及ALP活性同时达到峰值。低温保存前、后的BMSCs在DBM上分泌OCN的量差异无显著性意义(P＞0．05),OCN含量随着培养时间延长而不断上升,在观察期(16d)内未出现平台期。结论低温保存对人BMSCs在DBM上的体外增殖、粘附及成骨能力影响差异无显著性意义,低温保存的人BMSCs可作为组织工程骨的种子细胞。
- 刘广鹏舒朝锋尹烁李宇琳崔磊曹谊林
- 关键词：骨髓基质干细胞脱钙骨
- 乳液冷冻干燥法制备明胶多孔支架及其性能研究被引量：3
- 2006年
- 目的采用乳液冷冻干燥法制备用于组织修复的明胶多孔支架材料,考察主要制备参数对支架材料性能的影响,为进一步制备满足细胞培养和临床应用的支架材料提供依据。方法采用乳液冷冻干燥法,将明胶溶液与有机醇混合制成乳液,预冻,冷冻干燥得到支架材料,考察其性能。结果制备过程中,乳液的固含量,预冻温度对支架材料的微观结构、表观密度、含水量和孔隙率有较大影响。结论采用乳液冷冻干燥法可以成功的制备明胶多孔支架材料,通过控制反应条件和参数可以调整支架孔隙结构和性能,从而得到满足需要的支架材料。
- 李喆赵莉崔磊曹谊林
- 关键词：乳液冷冻干燥法明胶溶液多孔支架材料性能研究表观密度
- 人胚胎平滑肌细胞的三维培养观察被引量：2
- 2002年
- 目的 体外培养人胚动脉平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecells ,VSMCs) ,并观察人胚VSMCs在经过改性的乳酸与羟基乙酸共聚物 (polylaticacid -polyglycolicacid ,PLGA)上的三维培养情况 ,观察细胞在PLGA上的生长情况。方法 成功培养人胚VSMCs后 ,将其与PLGA(膜材和三维材料 )进行三维培养 ,通过倒置显微镜、扫描电镜和MTT法观察细胞的生长情况。结果 体外培养的人胚VSMCs生长旺盛 ,且其与改性后的PLGA具有良好的相容性 ,细胞在PLGA上生长良好。结论 改性后的PLGA与体外培养的人胚VSMCs有良好的相容性 ,为构建结构和功能与在体胆管下段胆管相似的胆管组织 。
- 谢舜峰许建衡严江商庆新
- 关键词：人胚胎平滑肌细胞PLGA支架细胞培养
- 软骨形态发生蛋白1诱导真皮成纤维细胞向软骨细胞表型分化的影响因素被引量：16
- 2005年
- 目的探讨软骨形态发生蛋白1(CDMP1)生长因子体外诱导真皮成纤维细胞向成软骨细胞表型分化的影响因素。方法取包皮环切术后丢弃的真皮组织共3例,分离成纤维细胞体外培养扩增,以含10%胎牛血清的F12培养液加入CDMP1(终浓度为100ng/ml)进行诱导,未加CDMP1的作为对照。观察细胞多次传代后(P2、P5、P10)细胞表型分化情况;调整CDMP1浓度分别为10、30、100、300ng/ml,观察诱导后软骨细胞表型的变化;单层培养与微团块培养成纤维细胞分别体外诱导7、14d,逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测细胞诱导前后骨形态发生蛋白受体(BMPR)、Ⅱ、Ⅳ、Ⅹ型胶原表达;Western印迹检测细胞诱导前后Ⅱ型胶原、SOX9、蛋白聚糖的表达;流式细胞术检测表面标志CD29、CD105、CD106、CD166及细胞诱导后Ⅰ、Ⅱ型胶原表达。结果细胞多次传代后(P5、P10)仍可表达特异软骨基质Ⅱ型胶原与蛋白聚糖,Ⅱ型胶原阳性细胞率与P2诱导后差异无统计学意义(P>0.05)。CDMP1浓度为10、30ng/ml诱导7、14d,均未见Ⅱ型胶原与蛋白聚糖表达;CDMP1浓度为100、300ng/ml时,Ⅱ型胶原与蛋白聚糖表达强度差异无统计学意义。单层培养成纤维细胞诱导14d后,软骨基质表达消失;微团块三维培养诱导14d,软骨基质仍保持表达。RTPCR检测诱导后ActRI/ALK2,BMPRIA/ALK3,BMPRIB/ALK6基因表达明显增强。结论在CDMP1生长因子诱导下,人真皮成纤维细胞体外扩增后可保持向成软骨细胞表型分化能力,细胞分化与CDMP1浓度、细胞三维培养条件及BMPR介导有关。
- 崔磊尹烁邓辰亮李宇琳杨光辉陈富国刘伟刘德莉曹谊林
- 关键词：软骨细胞成纤维细胞骨形态发生蛋白质类真皮成纤维细胞成软骨细胞流式细胞术检测逆转录-聚合酶链反应
- 多参数复合分选表皮干细胞的初步实验研究被引量：4
- 2006年
- 目的探索多参数分选,以获得高纯度表皮干细胞(humanepidermalstemcells,hESCs)方法的可行性。方法收集3岁～6岁健康幼儿包皮,以DispaseⅡ和Tropsin分离、收集原代表皮细胞(5例),利用流式细胞仪(FACS)分别进行多种参数分选,即:CD49f+/CD71-表型的细胞分选;直径小于10微米的细胞分选。以及多参数复合分选,即:CD49f+/CD71-且细胞直径小于10微米细胞。对各组分选细胞及未分选细胞进行克隆形成率、细胞最大扩增能力、克隆形成面积的检测比较。计算各种分选方法所对应的细胞回收率。结果单参数分选的两组细胞之间在克隆形成率、细胞最大扩增能力、克隆形成面积三方面无统计学差异(p>0.05)。多参数分选得到的细胞与通过单参数分选的两组细胞均存在统计学差异(p<0.05)。结论利用多参数分选,能获得纯度更高的干细胞表型的表皮细胞。
- 邓辰亮王佳鸣崔磊杨光辉刘伟曹谊林
- 关键词：细胞分选表皮干细胞克隆形成率表皮细胞单参数细胞表型
- 诱导成纤维细胞形成软骨细胞的方法
- 本发明公开了一种制备软骨细胞的方法，包括步骤：(a)在适合生长的条件下，将成纤维细胞在含软骨源性形态发生蛋白的成纤维细胞培养液中培养3－30天，从而使成纤维细胞诱导形成软骨细胞；(b)从培养物中分离出软骨细胞。实验研究证...
- 崔磊曹谊林刘伟尹烁
- 文献传递
- 软骨生长板基因调控机制的研究进展被引量：1
- 2006年
- 刘广鹏崔磊曹谊林
- 关键词：生长板纤维细胞生长因子基因调控机制软骨内成骨新骨生成全身因素
- 静电纺丝的主要参数对PLGA纤维支架形貌和纤维直径的影响被引量：16
- 2007年
- 目的以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为材料,采用静电纺丝方法制备纤维支架,考察制备参数对纤维支架结构及纤维直径的影响规律。方法以四氢呋喃(THF)和N,N-二甲基甲酰胺(DMF)的混合液为溶剂,调节PLGA溶液浓度、流量及电场强度分别制备了具有不同表面形貌的纤维支架。通过扫描电镜(SEM)观察了纺丝溶液的浓度、流量及电场强度对纤维形貌和直径的影响。同时在制备的PLGA纤维支架上接种了人的真皮成纤维细胞,并对细胞在PLGA支架上的黏附和增殖情况进行了研究,从而来评价支架材料的细胞相容性。结论结果表明,随着纺丝溶液浓度的增加,纤维直径逐渐增大,纤维直径的分布也随之增大。随着流量的增加,纤维直径略有增大。随着电场强度的增大,纤维直径没有明显的变化。但是电压和浓度的增大有助于减少珠丝的产生。体外细胞培养实验证明,制备的PLGA纤维支架能支持细胞正常的黏附和增殖活动。
- 何晨光高永娟赵莉崔磊曹谊林
- 关键词：静电纺丝PLGA纤维支架
- 壳聚糖-明胶-透明质酸薄膜的制备及其性能的研究被引量：13
- 2005年
- 本实验采用表面修饰法和共混法两种不同的方法将透明质酸引入壳聚糖- 明胶体系,制备了壳聚糖- 明胶-透明质酸复合薄膜,考察了薄膜的表面形貌、亲水性和力学性能等理化性能以及生物相容性。实验结果表明,壳聚糖- 明胶- 透明质酸薄膜具有良好的亲水性,而共混法和表面修饰法制备的薄膜在力学性能上各有所长。体外细胞培养结果表明,成纤维细胞在共混法制备的薄膜上的黏附和生长情况要明显好于表面修饰法制备的薄膜。
- 刘海峰尹玉姬毛津淑姚康德杨光辉崔磊曹谊林
- 关键词：透明质酸表面修饰共混成纤维细胞
