新乡学院生命科学技术学院生物技术研究中心
- 作品数：10 被引量：10H指数：2
- 相关机构：河南科技学院动物科学学院郑州大学生命科学学院河南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划河南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- PD-1/PD-Ls通路的特性及在动物疾病中的研究进展被引量：1
- 2020年
- 程序性死亡因子1(programmed cell death-1,PD-1)是非常重要的免疫抑制性受体分子之一,其配体为PD-L1和PD-L2(PD-Ls)。PD-1/PD-Ls通路传递负免疫信号,导致机体免疫功能衰竭或免疫抑制,是慢性或持续性病毒感染、肿瘤性疾病和自身性免疫疾病的重要致病机制之一,阻断PD-1/PD-Ls通路可以逆转或恢复衰竭淋巴细胞的免疫功能。因此,开展PD-1/PD-Ls通路在相关疾病中的致病机制研究,对其防控和治疗均具有重要的意义。现综述PD-1/PD-Ls通路的特性及其在猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒病和猪瘟、牛白血病和牛边缘无浆体病、鸡马立克病、鸡疱疹病毒Ⅱ型和鸡传染性法氏囊病、犬利什曼原虫病和犬肿瘤性疾病等相关疾病中的研究进展与效应机制,以期为相关疾病的治疗和防控提供新的治疗靶点和策略。
- 岳锋周娟娟章金刚王选年
- 关键词：PD-1PD-L1PD-L2
- 鸡PD-1单克隆抗体的制备及生物学功能研究被引量：2
- 2018年
- 试验旨在筛选并制备鸡PD-1单克隆抗体,对该单克隆抗体的免疫学特性、结合活性及其对鸡PD-1/PDL1信号通路激活的阻断作用进行初步研究。运用杂交瘤细胞融合技术筛选杂交瘤细胞株,采用ELISA方法、Ig抗体亚型鉴定试剂盒、Western blotting鉴定抗体的免疫学特性,利用间接免疫荧光技术及流式细胞术检测筛选单抗与鸡PBMCs的结合情况,应用该单抗与IBDV感染7d后的鸡PBMC细胞作用,利用实时荧光定量PCR技术检测IL-2、IL-6和IFN-γ等细胞因子的表达情况。结果显示,试验获得1株特异、稳定分泌鸡PD-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为PD-1-D05。该单克隆抗体的亚型属于IgG1,杂交瘤细胞培养上清和腹水的效价分别为1∶211和1∶2.048×105。ELISA和Western blotting检测结果表明,PD-1-D05单抗能与免疫原发生特异性反应,与pET-28a(+)、Rosetta菌株蛋白提取液上清及无关蛋白无交叉反应。间接免疫荧光及流式细胞术检测结果显示,PD-1-D05单克隆抗体能与鸡PBMC特异性结合,且IBDV感染7d后的PBMC经单抗处理后,IL-2表达量显著升高(P<0.05),IFN-γ转录水平显著下降(P<0.05),IL-6表达水平较IBDV攻毒组细胞虽有所下降,但并无统计学差异(P>0.05)。结果表明,试验成功筛选并制备了能够稳定分泌鸡PD-1单克隆抗体的细胞株,所获得的PD-1单克隆抗体具有良好的免疫学特性,该单抗能够特异性识别鸡PD-1分子并与鸡PBMC细胞特异结合,并在一定程度上恢复由于IBDV感染导致的PD-1/PD-L1信号通路激活引发的免疫调节相关细胞因子IL-2、IFN-γ的异常表达。
- 王玲玲孙国鹏徐若楠何海汛闫占鹏王亚平邢瑞林任鹏举李鹏张艳芳朱艳平岳锋王选年
- 关键词：PD-1单克隆抗体生物学功能
- 西马特罗完全抗原的合成和多克隆抗体的制备
- 西马特罗(Cimaterol,CIM)也叫做喜马特洛,塞曼特罗。属于β-受体激动剂的一种,临床上可以治疗支气管炎等疾病,但过量服用会引起人体中毒。西马特罗属于苯胺型β-受体激动剂中的一种。极性中等,k Pa值在9.5左右...
- 司艳芳岳锋李鹏郭东光朱艳平王选年
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP4蛋白原核表达与鉴定
- <正>猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respi...
- 王亚平； 李鹏； 任鹏举； 王玲玲； 申一兰； 闫占鹏； 张秋雨； 王选年；
- 文献传递
- PD-1基因的表达调控分子机制研究进展被引量：3
- 2020年
- 程序性死亡因子-1(PD-1)作为调节或平衡机体外周和中枢免疫功能的重要分子,其在不同的抗原刺激、炎症环境、细胞种类及分化阶段的表达受复杂、多样的分子机制调控。为深入理解PD-1表达调控的分子机制,本文分别从顺式作用元件、转录调控因子及相关信号通路、表观遗传因素、转录后调控等几个方面,将已有关于PD-1表达调控分子机制的相关研究进展进行综述,以期为更精确、有效的免疫检查点疗法或治疗方案的设计提供新的信息和思路。
- 徐若楠孙国鹏何海汛王选年(指导)
- 关键词：PD-1顺式作用元件转录调控因子转录后调控
- 抗猪PD-1单克隆抗体的制备与其生物学特性鉴定
- 2017年
- 制备猪程序性死亡因子-1(PD-1)单克隆抗体,鉴定其生物学特性。以表达纯化的猪程序性死亡因子-1(Programmed death-1,PD-1)胞外区重组蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,用细胞杂交瘤技术将免疫BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS0细胞融合,经多次克隆化培养,筛选分泌特异性抗猪PD-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结果:获得1株可稳定分泌抗猪PD-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株2B5,Ig亚型为Ig G1,细胞上清和腹水效价分别为1∶1×212和1∶2.048×105,酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和Western-Blot结果表明,该株单抗能特异性识别重组猪PD-1胞外区蛋白,流式细胞术结果表明,该单抗可以结合猪外周血单核细胞上PD-1蛋白。结论:成功制备了1株分泌抗猪PD-1单抗的杂交瘤细胞株2B5,为研究猪PD-1/PD-L1通路在猪传染性疾病中的致病机制提供了有力的检测工具。
- 岳锋杨健周娟娟朱艳平李鹏孙国鹏张艳芳王选年
- 关键词：PD-1胞外区单克隆抗体效价
- 鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白与幽门螺杆菌铁蛋白基因融合PCR扩增及其真核表达载体的构建被引量：2
- 2019年
- 为获得高活性的鸡传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)VP2蛋白的重组蛋白,本试验对IBDV VP2蛋白基因与能进行自我组装的幽门螺杆菌(Hp)铁蛋白基因进行融合PCR扩增,获得其融合基因。根据成熟VP2蛋白基因cDNA序列和Hp铁蛋白基因的碱基序列,设计合成2对引物,应用融合PCR技术扩增获得融合基因片段VP2-Fe。将目的基因克隆至pMD18-T载体筛选阳性重组克隆质粒,然后将目的基因亚克隆至真核表达载体pPICZaC后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选获得阳性表达质粒。结果显示,通过两轮PCR扩增出长度为1 824 bp的融合基因VP2-Fe,亚克隆至pMD18-T载体,测序结果显示,融合基因无任何碱基的突变,筛选的阳性质粒命名为pMD-VP2-Fe。双酶切回收目的基因大小为1 824 bp,亚克隆至pPICZaC,PCR和双酶切鉴定出现预期大小的片段,将获得的阳性表达质粒命名为pPICZaC-VP2-Fe。本研究为后期利用真核表达载体获得其融合重组蛋白奠定基础。
- 朱艳平何勇刘佳刘佳常乐凯李润芷岳锋吴玉苹李鹏孙国鹏张艳芳王选年
- 关键词：幽门螺杆菌铁蛋白融合PCR
- 猪白介素21基因的克隆与鉴定
- 白细胞介素21(Interleukin-21,IL-21)属于IL-2家族的成员,其受体广泛表达于多种免疫细胞表面。当病毒感染过程中自身分泌的IL-21量不足时,可以通过外源注入重组IL-21基因,与IL-21的受体结合...
- 刘佳朱艳平岳锋李鹏郭东光张艳芳孙国鹏王选年
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征新型疫苗的研究进展被引量：2
- 2018年
- 猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的母猪繁殖障碍和新生仔猪呼吸道症状的病毒性传染病,给全球的生猪养殖者造成了巨大的经济损失,严重危害我国养猪业的健康发展。目前接种疫苗仍是预防PRRS的最重要措施之一,但由于PRRSV变异株的不断出现,PRRSV的快速进化或重组,导致其遗传多样性增加,传统的疫苗已经不能满足需求。因此,迫切需要开发更安全、可靠、高效和针对性强的PRRS疫苗。文章主要对重组亚单位疫苗、DNA疫苗、活载体疫苗、基因缺失疫苗和合成肽疫苗等新型基因工程疫苗的研究进展作一综述,以期为我国PRRS的防控提供理论参考。
- 王亚平李鹏任鹏举闫占鹏张秋雨武乐祎王选年
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征重组亚单位疫苗DNA疫苗活载体疫苗基因缺失疫苗合成肽疫苗
- 阻断PD-1/PD-L1对IBDV引起的T细胞免疫抑制的恢复作用研究
- <正>研究目的:PD-1:PD-L1通路在T细胞免疫反应中传递着免疫耐受和免疫抑制信号,控制着细胞因子和抗体的产生、CTL的增殖活化及对自身抗原的耐受。本研究将PD-1:PD-L1通路引入到鸡IBDV感染引起免疫抑制机理...
- 孙国鹏； 徐若楠； 河海汛； 陈威； 王玲玲； 王选年；
- 文献传递
