中国人民解放军疾病预防控制中心
- 作品数：324 被引量：1,087H指数：13
- 相关作者：唐晓敏刘东峰董罡张利军更多>>
- 相关机构：中国医科大学军事科学院安徽医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学自动化与计算机技术生物学更多>>
- 基于CRISPR的埃博拉病毒核酸检测方法的建立被引量：5
- 2021年
- 目的建立一种基于CRISPR-Cas13a的埃博拉病毒快速、现场核酸检测方法。方法根据埃博拉病毒基因组保守区序列设计合成特异性RT-RAA引物及crRNA,采用荧光法CRISPR检测技术筛选灵敏度高的crRNA;利用"消线法"CRISPR试纸读取CRISPR检测结果;通过检测梯度稀释的埃博拉病毒核酸及其他病原体核酸评价该方法的灵敏度及特异性。结果从5条靶向埃博拉病毒NP基因保守序列的crRNA中筛选出1条检测灵敏度高的crRNA。利用该crRNA建立了基于"消线法"试纸的CRISPR-Cas13a埃博拉病毒核酸检测方法,其灵敏度为1拷贝/μL,与荧光法CRISPR和RT-qPCR法一致,优于普通RT-PCR法(101拷贝/μl)和RT-RAA扩增法(102拷贝/μl)。采用该方法检测7种其他病原体核酸,结果均为阴性。结论建立的试纸法CRISPR埃博拉病毒核酸检测方法快速、灵敏、特异,且无需专业核酸检测设备,为实现痕量埃博拉病毒核酸的现场检测提供了新方法。
- 王彦贺董雪杨明娟李浩孙岩松
- 关键词：埃博拉病毒CRISPR核酸检测
- 纳米孔测序技术在环境微生物研究中的应用被引量：3
- 2022年
- 高通量测序技术是研究环境微生物的有效手段,而以纳米孔测序为代表的第三代测序技术以其测序读长长、测序速度快、测序数据实时监控、仪器方便携带、无GC偏好性、无需经过PCR扩增等显著优势有力推动了环境微生物研究的发展。本文对纳米孔测序技术的技术原理和特点进行了简要概述,重点介绍了纳米孔测序技术在环境微生物扩增子测序、宏基因组测序、全基因组测序等领域的研究应用,并分析了纳米孔测序技术在环境微生物应用中的优势及存在的问题。
- 李中浤杜彩丽林彦锋张列宇李晓光黎佳茜陈素华
- 关键词：环境微生物
- 基于RSM模型的碱性磷酸酶参考方法测量条件研究被引量：1
- 2019年
- 目的结合碱性磷酸酶(ALP)催化活性浓度参考测量的特点,采用响应面法(RSM)模型在较少的实验次数下获得最佳测量条件。方法采用单因素法确定ALP参考测量的重要影响因子,结合Box-Behnken设计方式,建立RSM模型,并对模型进行评价及正确度验证。结果 RSM模型预测R^2=94.36%,调整R^2=95.99%。ALP各影响因子的一次效应和二次效应对结果均存在显著影响(P<0.01),4-NPP浓度和AMP浓度之间存在显著交互作用(P<0.05),其他影响因子之间不存在明显交互作用(P>0.05),ALP理论最佳测量条件为反应液pH值10.24、4-NPP浓度15.83mmol/L、AMP浓度747.28mmol/L。结论 RSM模型可用于ALP参考方法测量条件的研究,探索不同影响因子与参考测量结果的关联性及影响因子之间的交互作用,进而为ALP检验项目标准化提供科学依据。
- 刘春龙钱全王勇李申龙徐元勇
- 关键词：响应面法碱性磷酸酶
- 我国赫坎按蚊种团的分子鉴别及中华按蚊的区系分布研究被引量：8
- 2020年
- 目的改进赫坎按蚊种团部分成员种的多重PCR鉴别方法,鉴别赫坎按蚊种团中的中华按蚊,研究我国中华按蚊的区系分布及其影响因素。方法依据赫坎按蚊种团成员种中华按蚊、八代按蚊、雷氏按蚊、比伦按蚊和克莱按蚊的核糖体DNA内转录间隔区2 (rDNA-ITS2)序列差异设计种特异引物,改进多重PCR分子鉴别方法。2013-2018年,在我国8个省(直辖市、自治区)共18个地点,以诱虫灯和人工吸取相结合的方法采集按蚊,依据形态特征初步鉴定为赫坎按蚊种团的成员种。提取单只蚊虫基因组DNA,使用改进的多重PCR方法鉴定种类。对多重PCR法无扩增产物的个体分析rDNA-ITS2序列,在GenBank上进行BLAST比对,确定其种类。查找我国以及韩国和俄罗斯远东地区用分子特征鉴别为中华按蚊的文献,结合本研究结果,汇总中华按蚊采集地的地理位置和气候数据,使用地理探测器模型计算影响决定力q值,分析经度、纬度、年平均气温和年平均降雨量对中华按蚊分布的影响。结果改进的多重PCR法一次扩增即可依据扩增片段大小鉴别赫坎按蚊种团的5个成员种:中华按蚊(490 bp)、雷氏按蚊(313 bp)、八代按蚊(216 bp)、克莱按蚊(386 bp)和比伦按蚊(165 bp)。在我国18个采集点共捕获赫坎按蚊种团按蚊365只,多重PCR鉴别为中华按蚊114只(来自陕西、安徽与山东的采集点)、八代按蚊34只、雷氏按蚊9只、克莱按蚊181只和比伦按蚊5只。22只多重PCR无扩增产物的蚊虫中,经rDNA-ITS2序列分析鉴定为贵阳按蚊2只、类中华按蚊1只、朝鲜按蚊8只、林氏按蚊7只和帕氏按蚊4只。获取用分子特征鉴别为中华按蚊的文献17篇,共汇总了101个采集地信息,其中有中华按蚊分布的采集点80个,无中华按蚊分布的21个地点。地理探测器软件计算获得的q值,从大到小依次为0.592 0(年平均气温)、0.507 2 (纬度)、0.351 2 (经度)和0.214 4 (年平均降雨量
- 彭恒陈翰明陈辉莹王琰李翔宇李基旭杨振洲马雅军
- 关键词：分子鉴别区系分布
- 基于纳米孔测序技术的呼吸道病原体快速确认被引量：8
- 2020年
- 目的验证纳米孔测序技术在呼吸道病原体应急检测中的可行性。方法对某上呼吸道感染患者的咽拭子标本进行总核酸抽提并定量,接着进行cDNA的逆转录合成和测序文库构建,在便携式三代测序仪MinION上进行测序,然后对测序数据进行病原分类学分析,最后使用实时荧光定量PCR验证测序结果。结果MinION在15 h内共计产生188063条有效序列。测序数据分析表明,在咽拭子样本中同时检测到人呼吸道腺病毒7型和甲型流感病毒H3N2亚型,分别有19和4条序列匹配到参考基因组。测序开始9 h内,MinION已分别产出78.95%的7型腺病毒序列和100%的H3N2序列。从取样到初步获得鉴定结果,流转时间为18.6 h。实时荧光定量PCR与测序结果一致。结论MinION用于呼吸道病原体的快速检测具有可行性,且具备同时检测多种病原体并对病原分型的能力,在暴发疫情和呼吸道病毒应急检测方面具有应用价值。
- 叶福强李鹏韩一芳张琪林彦锋王凯英王太武宋宏彬王长军汪春晖张锦海
- 关键词：病原体
- 过氧化物类消毒液卫生要求
- 本标准规定了过氧化物类消毒液的原料要求、技术要求、应用范围、使用方法、包装、运输及贮存、标识要求和检验方法。
本标准适用于过氧化氢、过氧乙酸为主要有效成分的液体消毒剂。
本标准不适用于需要加热、加压、汽化等设备或与器...
- 张文福 帖金凤 林玲 林锦炎 魏秋华 任哲 骆艳燕 王洪敏 朱汉泉 于暝雪 吴鸣 杜武华 王金强 吴刚
- 消毒剂消毒效果定性试验标准应用稀释法(发布稿)
- 本标准规定了消毒剂消毒效果定性试验应用稀释法的试验材料、染菌载体的制备、中和剂鉴定试验、杀菌试验、结果判定和注意事项。本标准适用于消毒剂对光滑硬质物体表面的实验室定性消毒效果评价。
- 化学毒物快速检测箱
- 本实用新型涉及一种化学毒物快速检测箱，包括上壳体、下壳体、上衬垫和下衬垫；上壳体的一侧与下壳体的一侧转动连接，另一侧可拆卸连接；上衬垫铺设于上壳体内，底端面设有限位部；限位部为多个，阵列式排布；下衬垫铺设于下壳体内，顶端...
- 黄清臻王强赵增明王莉莉郭雪琪部丽娟
- 文献传递
- 黄连素对铜绿假单胞菌生物被膜和藻酸盐合成相关基因的体外抑制作用被引量：8
- 2020年
- 目的探讨黄连素对铜绿假单胞菌藻酸盐合成系统的调控作用。方法结晶紫染色法和扫描电镜法分别观察不同浓度黄连素对铜绿假单胞菌生物被膜合成的干预作用;逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术检测高、中、低浓度黄连素对铜绿假单胞菌藻酸盐合成系统algR、algD、lasR和rhlR基因表达的影响。结果与空白对照组比较,黄连素高、中和低浓度处理组,在24、72和168 h各时间段生物被膜厚度显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);扫描电镜下,高、中、低浓度黄连素组对铜绿假单胞菌生物被膜的成熟抑制作用明显;与空白对照组比较,高、中和低浓度黄连素组algR、algD、lasR和rhlR基因表达量均显著减低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黄连素对铜绿假单胞菌生物被膜和藻酸盐合成具有负调控作用,呈剂量依赖关系,可能与抑制algR、algD、lasR和rhlR等的基因表达有关。
- 刘心伟苏裕心赵芝静王志盛张小倩李永伟
- 关键词：黄连素铜绿假单胞菌生物被膜藻酸盐
- 222nm紫外线消毒机制和安全性的研究进展被引量：2
- 2023年
- 常用的含氯消毒剂、医用酒精、季铵盐等化学消毒剂具有很好的病毒杀灭效果,但使用操作繁琐,耗时耗力,且大多数化学消毒剂对人体都有一定的刺激作用[1]。紫外线消毒是一种有效的物理消毒方法,操作简便,不产生残留,微生物不会对其产生抗性[2-3]。
- 邵子轩费春楠魏秋华
- 关键词：紫外线消毒应用方式安全性
