广东医学院基础医学院生物化学与分子生物学研究所
- 作品数：660 被引量：2,459H指数：20
- 相关作者：刘新光侯敢黄迪南唐旭东刘文更多>>
- 相关机构：佛山科学技术学院医学院武汉大学中南医院重庆医科大学检验医学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- SV40增强子对奶牛β-酪蛋白启动子活性的影响
- 2013年
- 该文采用重叠PCR方法在奶牛β-酪蛋白启动子(op0)中插入SV40增强子构建重组启动子op0-SV40enh,并分析其活性。首先PCR扩增op0 5′-端2.1 Kb片段、op0 3′-端1 Kb片段和SV40增强子序列,重叠PCR拼接三种片段得到插入SV40增强子的op0-SV40enh启动子并测序鉴定后,酶切连接将其插入pGL3-Basic中的指定克隆位点,构建重组载体pGL3-op0-SV40enh。将重组载体pGL3-op0和pGL3-op0-SV40enh分别瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测启动子op0和op0-SV40enh的相对活性。结果显示,重叠PCR拼接出长度为3.4 Kb的片段,测序结果与预期结果一致,表明成功构建了重组载体pGL3-op0-SV40enh;op0-SV40enh启动子的活性远高于op0启动子的活性,表明奶牛β-酪蛋白启动子中插入SV40增强子序列可显著提高其引导荧光素酶报告基因表达的活性。
- 钟宇邵正江黎明
- hPOT1基因过表达对HeLa细胞细胞周期和凋亡的影响被引量：2
- 2005年
- 目的观察人POT1(protectionoftelomeres1)基因过表达对HeLa细胞细胞周期和细胞凋亡的影响。方法利用本课题组构建的hPOT1基因真核表达重组质粒pcDNA3-hPOT1,经脂质体介导瞬时转染HeLa细胞;通过RT-PCR和EMSA法(电泳迁移率改变分析)检测外源基因的表达效果,流式细胞术分析细胞周期,Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡。结果pcDNA3-hPOT1重组质粒转染HeLa细胞48h后,mRNA和蛋白质分析表明,外源性hPOT1基因能在HeLa细胞中有效表达,HeLa细胞阻滞于细胞周期S期,而对凋亡无明显影响。结论hPOT1基因可能参与了高等真核细胞细胞周期调控过程,但与细胞凋亡无密切关系。
- 黄迪南姜英华侯敢
- 关键词：HELA细胞基因过表达HOECHST33342真核表达重组质粒
- 丁酸钠诱导表达的基因pp3501功能的初步研究
- 丁酸钠能提高化疗和免疫疗法治疗肿瘤的效果。我们发现丁酸钠能诱导SH-SY5Y细胞表达编号为pp3501的基因。我们用RT-PCR方法克隆了pp3501的cDNA。重组并表达了pp3501融合蛋白,制备了抗pp3501抗体...
- 汪亚君马超张海涛
- 关键词：丁酸钠SH-SY5Y细胞
- 文献传递
- Slug的分子调控机制被引量：11
- 2013年
- Slug(Snail2)是一种具有锌指结构的上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)转录因子,在肿瘤EMT过程及癌细胞的迁移、侵袭、转移和干细胞样特性维持中起重要作用,多种信号分子及转导途径参与Slug的表达调控。本文综述了调节Slug降解和表达的信号分子及转导途径、Slug诱导的几种肿瘤相关分子及Slug与其它EMT转录因子的关系。
- 刘锦华唐旭东
- 关键词：SLUG上皮-间质转化信号分子信号转导
- 肿瘤血管生成调节因子的研究进展被引量：5
- 2007年
- 血管生成促进因子和血管生成抑制因子的平衡控制着肿瘤新生血管的形成。当促进因子的作用强于抑制因子时,便会引起肿瘤血管的生长。因此,了解血管生成调节因子的特点及其作用机制是一项非常重要的研究任务,针对肿瘤血管的抗血管新生治疗有着重要的理论意义和临床实用价值。这为肿瘤的诊断、分期、治疗和预后提供了新的参数指标,为寻找有效的治疗靶点提供了有利的依据。该文就有关的重要血管生成调节因子作一综述。
- 李晓黄迪南侯敢
- 关键词：血管生成抑制因子靶向治疗
- H_2O_2对PC12细胞par-4和NF-κBP65基因表达的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨 H2 O2 对 PC12细胞前列腺细胞应答凋亡蛋白 - 4 ( prostate apoptosis response- 4 ,par- 4 )和核转录因子 - κBP6 5 ( NF- κBP6 5 )基因表达的影响。方法 用不同终浓度 H2 O2 ( 0～ 4 0 0 nm ol/ L)处理 PC12细胞 8h,或终浓度 2 0 0 nm ol/ L H2 O2 处理 PC12细胞不同时间 ( 0～ 8h) ,采用 RT- PCR检测 par- 4、NF- κBP6 5 m RNA表达变化 ,Western blot检测 Par- 4和 NF-κBP6 5蛋白表达的变化。结果 随 H2 O2 浓度从 10 0～ 4 0 0 nmol/ L增加 ,par- 4、NF-κBP6 5 m RNA表达和 Par- 4、NF-κBP6 5蛋白表达水平逐渐增加 ;2 0 0 nm ol/ L H2 O2 作用 PC12细胞 0～ 8h,par- 4 m RNA表达和 Par- 4蛋白表达 ,在 2～ 8h随时间延长表达增加 ;在 0～ 8h NF- κB P6 5 m RNA表达和 NF- κBP6 5蛋白表达无明显变化。结论 H2 O2 可时间、剂量依赖性的增加 par- 4 m RNA表达和 Par- 4蛋白表达 ;H2 O2 可剂量依赖性的增加NF-κBP6 5 m RNA表达和 NF-κBP6 5蛋白表达 ;NF-κBP6 5 m RNA表达和 NF-κBP6
- 曲喜英梅寒芳祝其锋
- 关键词：H2O2PC12细胞PAR-4NF-ΚBP65核转录因子-KB
- 七种黄酮类化合物对重组人蛋白激酶CK2全酶抑制作用的结构效应关系(英文)被引量：4
- 2009年
- 目的:观察7种黄酮类化合物对重组人蛋白激酶CK2全酶活性的影响并进行结构效应关系的分析。方法:将利用基因工程技术获得的重组人CK2α′及β亚基在体外等摩尔混合构成CK2全酶。通过测定药物作用后转移到CK2底物上的[γ-32P]ATP的32P的放射性活度,探讨黄酮类化合物对重组人CK2全酶活性的抑制作用,并采用半数效量概率单位法计算其IC50值。结果:杨梅黄酮、槲皮素、桑色素、毛地黄黄酮、莰非醇、芹菜苷配基和白杨黄素能明显抑制重组人CK2全酶活性,其IC50值分别是1.18,0.51,16.16,0.86,1.88,1.72和13.63μmol/L;其中杨梅黄酮、槲皮素、毛地黄黄酮、莰非醇和芹菜苷配基的作用效果均强于目前已知的CK2抑制剂DRB和A3;而桑色素和白杨黄素的作用效果接近于DRB。结构效应关系分析表明,C6,C3′和C4′上的-OH可能是黄酮类CK2抑制剂发挥抑制作用的药效基团;而在C3上去除1个-OH对其抑制效果基本没有影响;此外,C2′和C5′上的-OH可减弱黄酮类化合物对CK2的抑制作用。结论:黄酮类化合物对体外蛋白激酶CK2的抑制效果可能取决于其羟基的位置。
- 李春梅刘新光林小聪陈小文
- 关键词：蛋白激酶CK2全酶黄酮类化合物
- 半边旗有效成分5F的研究现状被引量：2
- 2010年
- 该文以近年来国内外的文献为依据,从提取分离纯化、药理作用及作用机制方面综述了半边旗提取物5F的研究现状。
- 吴科锋梁念慈
- 关键词：分离纯化药理作用
- 半边旗提取物5F对肝细胞癌BEL-7402生长抑制作用及增殖细胞核抗原表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的研究半边旗提取物5F对肝细胞癌BEL-7402细胞生长的抑制作用。方法 MTT法检测5F对BEL-7402细胞的生长抑制作用;用Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测5F对细胞周期的影响;免疫细胞化学法检测5F对增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。结果 5F抑制BEL-7402细胞的生长,其效果与5F的浓度和作用时间相关,24、48和72h的IC50分别为60.33、21.32和11.22 mg/L;荧光双染色法显示经5F作用后细胞出现变形,染色质浓缩,产生凋亡小体;细胞被阻滞在G2/M,PCNA阳性表达率降低。结论 5F在体外能有效地抑制BEL-7402细胞的生长,其诱导凋亡作用可能与下调增殖细胞核抗原(PCNA)表达有关。
- 吴科锋刘义吕应年George G.Chen梁念慈
- 关键词：半边旗提取物5FBEL-7402增殖细胞核抗原
- 3,6-二羟黄酮对HL-60细胞生长增殖的影响被引量：2
- 2008年
- 目的观察3,6-二羟黄酮对HL-60细胞的影响。方法分别用台盼蓝拒染观察药物对细胞的毒性作用,流式细胞术、Hoechst 33258/PI荧光双染和琼脂糖凝胶电泳观察药物对细胞周期的影响以及凋亡情况。结果3,6-二羟黄酮对HL-60细胞具有明显地细胞毒作用,呈一定的时效性;流式细胞术、荧光双染和琼脂糖凝胶电泳实验,发现了典型的凋亡细胞,且随药物浓度的增加,凋亡细胞数明显增加;然而统计学分析发现3,6-二羟黄酮并没有引起HL-60细胞周期的变化。结论3,6-二羟黄酮能明显地抑制HL-60细胞的增殖,并能引起细胞的凋亡。
- 李春梅刘新光梁念慈
- 关键词：HL-60细胞株凋亡
